Антипролиферативният ефект е

Захранване

Когато се появи инфекция в човешкото тяло, имунните реакции се развиват със сложни клетъчни взаимодействия. Регулаторите на тези взаимодействия са специални протеинови молекули - цитокини. Към днешна дата са изследвани повече от 200 различни сигнални молекули. Особеността им е, че те самите не могат да окажат никакво влияние върху чужди антигени и служат изключително за прехвърляне на информация от една клетка в друга. Без участието на цитокини е невъзможно да се развие нормален имунен отговор. Един от ключовите цитокини е интерферонът.

Има три типа на интерферон: интерферон-алфа (IFN-α), интерферон-бета (IFN-β), интерферон-гама (IFN-γ). Всички интерферони имат антивирусни, имуномодулиращи, противотуморни и антипролиферативни ефекти. В допълнение към общите свойства, интерфероните имат редица разлики.

IFN-α и IFN-β са по-сходни помежду си. Техните гени са локализирани в хромозома 9. За генериране на двата индуциращи сигнала са вируси. Те имат подчертан антивирусен и антитуморен ефект, много по-малко имуномодулаторни свойства. Основните производствени клетки за INF-α са макрофаги, за IFN-β - епителни клетки, фибробласти.

IFN-γ има изразен имуномодулиращ ефект, заедно с интерлевкин-2 (IL-2) и тумор некрозисфактор (TNF или TNF) се отнася до главния провъзпалителен цитокин, е индуктор на клетъчния имунитет. Антивирусните и антитуморни свойства са по-малко изразени, отколкото в IFN-α и IFN-β. ген IFN-γ се намира в хромозомата 12, основните клетки на производителите са Т-лимфоцити, природни или естествени убийци (NK-клетки). Индуциращият сигнал за производство може да бъде всеки антиген или други цитокини.

Антивирусен ефект на интерферони е да подтисне синтеза на вирусна РНК, да потисне синтеза на протеиновата обвивка на вируса. Механизмът на този ефект е активирането на вътреклетъчни ензими, като протеин киназа или аденилат синтетаза. Протеин киназата разрушава фактора на иницииране на протеиновата синтеза с матрична РНК, която потиска протеиновия синтез. Аденилат синтетазата - причинява синтеза на вещества, които разрушават вирусната РНК.

Имуномодулиращо действие на интерфероните - способността да регулира взаимодействието на клетките, участващи в имунния отговор. Интерфероните изпълняват тази функция чрез регулиране на чувствителността на клетките към цитокини и експресията на клетъчните мембрани на молекулите на главния комплекс за хистосъвместимост тип I (GKG1). Засилване GKG1 експресия на инфектирани с вирус клетки значително увеличава вероятността, че те ще бъдат признати от имунните клетки от тялото и eleminirovany. Най-силно изразени имуномодулиращи свойства има IFN-γ, като продукт на Т-лимфоцити помощник го тип заедно с други провъзпалителни цитокини активират макрофаги, Т-цитотоксични лимфоцити, естествени клетки убийци (NK-клетки), да инхибира активността на В-лимфоцити активира простагландин и кортикостероидна система. Всички тези фактори повишават фагоцитната и цитотоксичен отговор към зоната за възпалително фокус и допринася за ефективно отстраняване на инфекциозния агент.

Антитуморният ефект на интерфероните е свързано със способността им да забавят или да потискат растежа на клетъчната култура и да активират противотуморните механизми на имунната система. Това свойство на интерфероните е открито отдавна и широко се използва за терапевтични цели. Всички антитуморни ефекти на интерфероните са разделени на преки и косвени. Правите линии са свързани със способността да имат директен ефект върху туморните клетки, техния растеж и диференциация. Непрекият е свързан с повишаването на способността на имунокомпетентните клетки да откриват и унищожават атипичните клетки на тялото.

Директни антитуморни ефекти на интерферон:

  • Потискане на синтеза на РНК.
  • Потискане на протеиновата синтеза.
  • Стимулиране на недиференцирани клетки до зреене.
  • Повишена експресия на антигени на туморни клетъчни мембрани и хормонни рецептори.
  • Нарушаване на процесите на вазогенеза.
  • Неутрализиране на онкоирусите.
  • Потискане на ефекта от туморните фактори на растежа.

Индиректни антитуморни ефекти на интерферон:

  • Стимулиране на активността на клетките на имунната система (макрофаги, NK клетки, Т-цитотоксични лимфоцити).
  • Повишаване на експресията на клетките на хистосъвместими молекули от първи клас.

Антипролиферативен ефект на интерфероните е способността на интерферони да покаже цитостатични свойства - за инхибиране на клетъчния растеж чрез потискане на синтеза на РНК и протеини, както и инхибирането на растежни фактори стимулират клетъчната пролиферация.

Глюкокортикоиди (антипролиферативен ефект)

Антипролиферативните ефекти на глюкокортикоидите, свързани с ограничен контакт с моноцити в възпаление и инхибиране огнище разделящи фибробласти от двете хормони, както и намаляване на техния стимулиращ ефект на хистамин, серотонин, кинини, формирането на което намалява споменато стероиди.

В допълнение, глюкокортикоиди инхибират синтеза на мукополизахаридите и по този начин ограничават водни свързващи тъкани и плазмата Br залив уловени заедно с ексудат в огнището на ревматоиден възпаление. Това намалява подуване и най-важното е, че развитието на ревматоиден възпаление фибриноидна фаза и след това hyalinosis.

В резултат на това предотвратява или значително намалява смущения в структурата на сърдечните клапи, миокарда, кръвоносните съдове и така нататък. Най развива добър ефект, когато се използва заедно с кортикостероиди нестероидни противовъзпалителни лекарства.

Използват се глюкокортикоиди и за компенсиране на техния недостиг в организма и за регулаторно въздействие върху нарушените функции.

За да се възстанови глюкокортикоидните хормони липсата когато се използва като първична надбъбречна недостатъчност (болест на Адисон, кръвоизлив в кората на надбъбречната жлеза при сепсис, травма раждане, хипоксия), характеризиращ се с недостатъчност и глюко и минералокортикоиди, и при вторична надбъбречна недостатъчност (хипопитуитаризъм, хипоталамуса система инхибиране - хипофиза - надбъбречната кора поради продължителна употреба на глюкокортикоиди), характеризиращо се с дефицит на само глюкокортикоиди.

"Педиатрична фармакология", IVMarkova

Назначаването на кортикостероиди за един ден може да предотврати или да намали инхибирането на системата на хипоталамо-хипофиза-надбъбречна кора и да потисне неспецифичната резистентност на организма към инфекция. J. Melby (1977), изброени показанията, за които с глюкокортикоиди могат да назначават по-голямата част от пациентите в един ден, както и заболявания, при които е невъзможно. Можете да прилагате глюкокортикоиди всеки ден със следните заболявания: бронхиална...

При назначаването на кортикостероиди в случаи, при които не се налага спешна терапия, се препоръчва да се вземе предвид дневния ритъм на секреция на ендогенни хормони на надбъбречната кора. В началото на лечението, повечето (обикновено 2/3) от дозата трябва да се приемат сутрин, 7-8 часа, а останалата част - следобед, на 13-14 часа. При разделяне на дневната доза на три дози, те се прилагат на 7, 10...

Естествен минералкортикоид, алдостерон, се произвежда от гломерулната кора на кората на надбъбрека; Този процес се регулира от ангиотензин II, който се образува под въздействието на ренин. Като лекарства се използват дезоксикортикостеронов ацетат (DOXA) и DOX-триметилацетат. Индикации за употреба. Прилагайте минералкортикоиди в чревна токсикоза в комбинация с инфузионна терапия. Те се използват и за остра хипотония, свързана със загубата на натрий и вода (но...

Показания за продължително прилагане на високи дози глюкокортикоиди. Те се използват в продължение на няколко седмици или дори месеци за лечение на автоимунна хемолитична анемия, тромбоцитопения пурпура, някои нефрит, язвен колит, саркоидоза, остра левкемия, генерализирана болест на Ходжкин, не-ревматична кардит, понякога в тежка астма. В повечето случаи, терапевтичният ефект зависи от потискането на цитолиза реакции, по-специално алергичен генезис....

Анаболни стероиди: Methandrostenolone (Dianabol, Nerobolum) metilandrostendiol (Methandriol) fenobolin (Durabolin, Nerobolum) retabolil - вещество, произведено от син-тезата на мъжки полови хормони (андрогени). Андрогените са дадени две отделни реакции: андрогенен (.. т.е. да се стимулира развитието на вторични полови белези) и анаболни. Анаболни стероиди са различни от структурата на андрогени и техните андрогенни свойства драстично намалени (100 или повече)....

Антипролиферативни лекарства - Списък на лекарства и лекарства

Описание на фармакологичното действие

Антипролиферативният ефект е насочен към потискане на прекомерната пролиферация на различни клетки. Механизмът на действие е различен и зависи от специфичната подготовка и вида на клетките, към които е насочено това действие. По-специално, механизмът на това действие може да бъде свързано с предоставянето на модулиране ефект върху синтеза на някои онкогени, което води до нормализиране на неопластична клетъчна трансформация и инхибиране на растежа на тумора. Или механизъм на действие може да се основава на инхибирането на фибробластна пролиферация, стимулирана от основен фибробластен растежен фактор. Препарати с антипролиферативна активност се използват за лечение и профилактика на различни видове рак, рак на простатата аденом, различни хронични кожни заболявания (например псориазис).

Търсене на наркотици

Препарати с фармакологично действие "Антипролиферативни"

  • А
  • Avonex (лиофилизат за инжекционен разтвор)
  • Avonex (разтвор за интрамускулно инжектиране)
  • Adenostop (концентрат за разтвор за перорално приложение)
  • Altevir (инжекционен разтвор)
  • Alfaferon (инжекционен разтвор)
  • Arava (таблетки за перорално приложение)
  • B
  • Beloderm (крем за външна употреба)
  • Beloderm (мехлем за външна употреба)
  • D
  • Genferon (супозитории ректално)
  • Genferon Light (спрей за носа)
  • D
  • Dilatrend (перорални таблетки)
  • L
  • Лефлуномид (вещество-прах)
  • Лефлуномид (таблетките са перорално)
  • P
  • Пермиксон (капсула)
  • P
  • Realdiron (лиофилизат за приготвяне на разтвор за подкожно приложение)
  • Ronbetal (разтвор за подкожно приложение)
  • T
  • Таденан (капсула)
  • Tyqveol (масло за орално приложение)
  • Tyqveol (супозитории ректално)
  • Tyqveol (капсула)

Моля, обърнете внимание! Информацията, предоставена в това ръководство за лекарства, е предназначена за медицински специалисти и не трябва да представлява основа за самолечение. Описанията на лекарствата са предвидени за справка и не са предназначени за предписване на лечение без участието на лекар. Има противопоказания. Пациентите се нуждаят от специализиран съвет!

Ако се интересувате от някои по-антипролиферативни средства и лекарства, техните описания и инструкции за употреба, синоними и аналози, информация за състава и формата на освобождаване, указания и странични ефекти, методи за използване, дозиране и противопоказания, отбелязва на лечение на детски медицина бебета и бременни, цена и прегледи на лекарства, или имате други въпроси или предложения - пишете ни, ние ще се опитаме да ви помогнем.

антипролиферативна

Антипролиферативният ефект е насочен към потискане на прекомерната пролиферация на различни клетки.

Механизмът на действие е различен и зависи от специфичната подготовка и вида на клетките, към които е насочено това действие. По-специално, механизмът на това действие може да бъде свързано с предоставянето на модулиране ефект върху синтеза на някои онкогени, което води до нормализиране на неопластична клетъчна трансформация и инхибиране на растежа на тумора. Или механизъм на действие може да се основава на инхибирането на фибробластна пролиферация, стимулирана от основен фибробластен растежен фактор.

Препарати с антипролиферативна активност се използват за лечение и профилактика на различни видове рак, рак на простатата аденом, различни хронични кожни заболявания (например псориазис).

Антипролиферативно средство

Изобретението се отнася до фармацевтичната промишленост, по-специално до естествено срещащо се средство, имащо антипролиферативна активност. Средства като антипролиферативна активност, която е протеин, екстракт Toxocara Canis, получен чрез екстракция gomogentata хелминти Т. Canis фосфат-буфериран физиологичен разтвор при рН 7.2 в съотношение 01:10 за 36-48 часа при 4 ° С, центрофугиране. Гореописаният агент има изразена антипролиферативна активност. 1 z.s. f-ly, 1 табл., 2 pr.

Изобретението се отнася до областта на медицината и ветеринарната медицина, по-специално до нов агент с естествен произход, който има антипролиферативен ефект.

Съвременната медицина има доста голям арсенал от лекарства за тумори на химиотерапия. По принцип химиотерапия означава групите представени чрез антинеопластични алкилиращи агенти, антиметаболити, противоракови антибиотици, противоракови хормонални агенти, имуномодулатори и някои други с различен механизъм на действие. Повечето от тези противоракови лекарства са силно токсични и, следователно, схеми и продължителност на химиотерапия е избран с оглед на странични ефекти, които засягат ефективността на лечението като цяло.

Известни природен противоракови лекарства от растителен произход (винка алкалоиди (винбластин, винкристин); алкалоиди тис дърво (таксани) (паклитаксел, доцетаксел), подофилотоксин разпределени от podofilla щитовидната жлеза (етопозид, тенипозид) и алкалоиди Colchicum speciosum (demekoltsin (kolhamin), колхицин )) и бактериален произход (rubromitsin и др.), които също имат ограничена употреба поради високата токсичност и тесен терапевтичен спектър (лечение на някои raznovidnos тумор, за предпочитане с екзофитичен растеж).

Следователно, съществува необходимост от нови високо ефективни противотуморни лекарства от естествен произход, които биха имали широк спектър на действие и биха били по-малко токсични.

Хелминтите са общоприето име за паразитни червеи, които живеят в човешкото тяло, други животни и растения, които причиняват хелминтиази.

Хелминтите включват представители на тения, пътниците, трематодите или трематодите (и двете групи принадлежат към плоски червеи) и кръгли червеи или нематоди.

Последните включват Toksokary (по-специално Toxocara canis). T. canis представлява нематод, паразитиращ интестинални хищници, например кучета; Инвазия, известна като токсокариаза.

По време на паразитизма, хелминтите произвеждат и освобождават различни метаболитни продукти. Секреторните екскретиращи продукти на жизнената активност на хелминти са за организма на гостоприемника неестествени вещества в неговите физиологични процеси.

Известно е, че агенти, причиняващи инвазии могат да имат модулиращ ефект върху хода на много заболявания на много различна етиология, включително злокачествен (например, Василев S. и сътр. (2015). По-специално, това е съобщено, че мишките, заразени с спиралис на нематод трихинела ( възпроизвеждане трихиноза) води до потискане на злокачествен клетъчен растеж и повишаване на скоростта на оцеляване на животните след инокулиране на клетките на меланома в-16, в условия ин виво (Molinari JA, Ebersole JL, 1977; Покок D., Meerovitch Е., 1982; Kang ИЛ сътр, 2013. ) Съществуват и данни за тестването на продуктите от метаболизма на T. spira LIS с инхибиторен ефект върху растежа и оцеляването на туморните клетки при условия ин витро (Василев S. и др, 2015 ;. Wang X.L. и др, 2009 ;. Wang X.L. и др, 2013).

Изследвания за оценка на антитуморната активност на Т. canis или продуктите на метаболизма на тези хелминти не са провеждани преди това.

Целта на изобретението е да осигури протеинови екстракти от тъкани на Т. canis, за да оцени техния антипролиферативен ефект върху модели на туморни клетки от различни линии и да осигури тяхното възможно приложение в бъдеще като ефективен антитуморен агент.

Резюме на изобретението се състои в това, че средството, имащо антипролиферативна активност, е протеинов екстракт от хелминти, по-специално екстракт от Toxocara canis. Трябва да се отбележи, че условията за получаване на екстракт от хелминти хомогената, включително Т. Canis, зависят от биологичния материал и основните характеристики за получаване на протеинови екстракти е екстракция с буфериран с фосфат физиологичен разтвор рН = 7.2.

Екстрактът има подчертан антипролиферативен и цитостатичен ефект върху модели на човешки туморни клетки in vitro. Както вече беше споменато по-горе, екстрактът на токсокар не беше тестван преди това в модели на човешки туморни клетки in vitro.

Поради естествения произход предложеният антипролиферативен агент може да бъде по-малко токсичен в присъствието на висока антитуморна ефикасност на широк спектър на действие.

Примери за конкретно изпълнение

ПРИМЕР 1 Получаване на протеинов екстракт от Т. canis.

Като предполагаема антипролиферативна активност се използва протеинов екстракт от зрелия Т. canis, предварително пречистен от съединения с ниско молекулно тегло.

Старателно се промива с дестилирана вода и след това с физиологичен разтвор замразени зрели червеи - Toxocara Canis се разпадат ножици, хомогенизиране в порцеланов хаван, поставени в съд с лед. По време на хомогенизиране на получената биоматериалът се повтаря (3-5 пъти) замразяване и размразяване с едновременно смилане за пълно унищожаване на структурата на суровината до получаване на хомогенна маса. Както естрагента протеини от Т. Canis получава хомогенат се използва фосфатен буфериран физиологичен разтвор рН 7,2, което се получава съгласно рецепта (натриев хлорид - 8,5 грама двуосновен натриев фосфат - 1,15 грама калиев дихидроген фосфат - 0, 2 g в 1 литър дестилирана вода) в съотношение 1:10. Екстракцията се провежда в хладилно отделение при + 4 ° С в продължение на 48 часа при постоянно разбъркване върху магнитна бъркалка. След време екстракция биоматериал получава се центрофугира при 15,000 об / мин в продължение на 20 минути в охладена центрофуга Optima TLX (настолна центрофуга контролира микропроцесор Becman Coulter Herneshal, S.A.). Полученият екстракт протеин след центрофугиране на Т. Canis освободен от протеини с ниско молекулно тегло чрез диализа срещу буфериран с фосфат физиологичен разтвор, разреден с дестилирана вода в съотношение 1:10.

Полученият протеинов екстракт се съхранява при -20 ° С. Използвайки метода на полиакриламидна гел електрофореза, бе определено, че протеиновият екстракт от Т. canis съдържа повече от 20 протеинови фракции с различна електрофоретична подвижност и молекулно тегло.

Пример 2. Оценка на ефекта на протеиновия екстракт от Т. canis върху културите на човешки гръдни туморни клетки (MCF-7) и човешки колона (Caco-2) в зависимост от концентрацията на екстракта.

Целта на настоящия експеримент е да се оцени ефекта на протеиновия екстракт от Т. canis върху пролиферацията на човешки туморни клетки в две линии.

Материали и методи

Целеви клетки. MCF-7 (човешки аденокарцином на гърдата), и Сасо-2 (човешки аденокарцином на дебелото черво): В двете епителни клетъчни линии са използвани. Клетките, извън периода на поставяне на експеримента, се съхраняват в течен азот. Преди проучвания ампули клетки се размразяват и се култивират по стандартни методи в културални колби (Corning, Колба, 25 см 2, USA) в растежната среда DMEM GlutaMAX (Gibco), допълнена с 10% FBS и антибиотици / антимикотик (Gibco, х 100) високи влажност2-инкубатор (New Brunswick, Galaxy 170R) при Т = 37 ° С в атмосфера от 5% СО2.

Изследваният протеинов екстракт. Изследваният протеинов екстракт от Т. canis (приготвяне вижте в пример 1) е екстракт в физиологичен разтвор, фосфатно буфериран, не стерилен. Концентрацията на протеин в основния разтвор е 10.9 mg / ml. Преди изследването разтворът се съхранява при -70 ° С.

Преди работа тръбата с протеиновия екстракт се размразява при стайна температура. При in vitro експеримент протеиновият екстракт се тества при следните протеинови концентрации: 12,5, 25, 50, 100, 250, 500, 1 и 2 mg / ml. За да се получат разрежданията, беше използвана DMEM GlutaMAX растежна среда (DGIBCO) с 2% FBS и антибиотик.

Преди експеримента се получава работен разтвор с концентрация 2 мг / мл, след стерилизация чрез Millipore папка-дюза (0,22 μ) се получават чрез разреждане на екстракта на Т. Canis: 1, 500, 250, 100, 50, 25 и 12.5 мкг / мл с растежна среда DMEM GlutaMAX (DGIBCO) с 2% FBS и антибиотици.

За експеримента, MCF-7 клетки и Сасо-2 се инкубират съгласно стандартни процедури, за да се получи subkonfluentnogo монослой. В активната фаза на растеж клетъчния монослой се диспергира с трипсин / Versene, получените клетки се суспендират отново в растежна среда DMEM GlutaMAX (Gibco) с 10% FBS и антибиотици стандартната концентрация. Прясно приготвен клетъчна суспензия се посяват в 24-ямкови плаки (Sarstedt, Германия) при 35 х 10 3 клетки на ямка за MCF-7 клетки и 30 х 10 3 клетки на ямка за Сасо-2 клетки. След това плочите се поставят в СО2-инкубатор за 3 часа до пълното разпространение на клетките. След това средата с неприкрепени клетки се отстранява от ямките и растежната среда се въвежда в изследваните кладенчета с изследваните концентрации на веществото (в 4 повторения за всяка тествана концентрация). Като контрола бяха оставени четири гнезда с клетки, които бяха култивирани в пълна хранителна среда с 2% FBS без тестваното вещество. Крайният обем на средата за растеж в контролните и изпитваните групи е 500 ul на ямка.

По време на експеримента се извършва ежедневно светлинно-оптично наблюдение на клетките, като се използва обърнат микроскоп Olympus СК 40 (Япония), оценяващ наличието или отсъствието на промени в клетъчната морфология в тестовите кладенчета в сравнение с контролата. Пролиферативният отговор на туморните клетки към ефекта на изследвания екстракт от Т. canis се оценява чрез плътността и жизнеспособността на образувания монослой след 96-часово инкубиране на клетките в присъствието на изследвания екстракт.

Клетъчната жизнеспособност се определя като се използва стандартната процедура за преброяване на клетки в Goryaev камера с предварително оцветяване на клетъчната суспензия с разтвор на трипанново синьо. За това монослоят беше диспергиран с разтвор на трипсин / везен, клетките бяха ресуспендирани в растежна среда и получената клетъчна суспензия беше оцветена с 0.4% разтвор на trypan Blue (SIGMA). След това клетките се преброяват в клетката на Горяев. За тази цел се отчита броят на общия (общия) брой клетки и броят на оцветените (нежизнеспособни) клетки във всяка ямка.

% от жизнеспособните клетки (Nдобре) се изчислява по формулата

където Nт - общ (общ) брой клетки в ямката;

Nза - броя на оцветените (нежизнеспособни) клетки в ямката.

Ефектът на изследвания екстракт от Т. canis върху пролиферативната активност на туморните клетки MCF-7 и Сако-2 беше оценен след 96 часа, сравнявайки общия брой клетки в тестовите кладенчета по отношение на контролата.

По време на експеримента оценка на ефекта на екстракта от тест на Т. Canis в концентрации, посочени в епителни култури от човешки гръдни туморни клетки (MCF-7) и човешки колон (Сасо-2), се провежда ежедневно визуален контрол върху характера на растеж и морфология на растящите колонии от клетки. След 24 и 48 часа във всички експериментални ямки с клетки MCF-7 и Сасо-2 плътност на колониите е сравнима с контролата. Не са открити морфологични промени. Детрит напълно отсъстваше.

След 72 h в MCF-7 и Сако-2 клетки при концентрация 2 mg / ml се наблюдава забележимо забавяне на растежа. Беше отбелязано, че в експерименталните кладенчета при 2 mg / ml размерът на колонията е по-малък, отколкото в контролната група; Също така броят на митотично разделящите се клетки намалява значително в полето на зрението, но не се наблюдават морфологични промени. В ямките с MCF-7 и Сако-2 клетки при 1 и 500 ug / ml се наблюдава слабо забавяне на растежа в сравнение с контролата. В експериментални ямки с концентрация 12,5, 25, 50 и 250 μg / ml не са установени разлики в сравнение с контролната група К.

След 96 часа култивиране в MCF-7 клетки и Сасо-2 при концентрации от 2, 1 и 500 мкг / мл в областта оглед наблюдава значително по-малко пролиферативно колонии с по-малко клетки в сравнение с колонии от клетки контролната група. Морфологични промени са наблюдавани в MCF-7 клетки само при максимална концентрация от 2 mg / ml. В този тест група видими единични колонии, които се наблюдават в клетките без ясни и различни схеми със загуба на характеристичен шаблон. Броят на митотично разделящите клетки в полето на видимост се намалява. В същото детрит в околната среда е отсъствал.

След завършване на експеримента, след 96 h, клетките се трипсинизират, получената клетъчна суспензия се оцветява с 0.4% разтвор на триптаново синьо и броят на клетките се брои в камерата на Горяев. Резултатите от преброяването на клетките са показани в Таблица 1.

От данните, представени в Таблица 1, следва, че изследваният екстракт от Т. canis не повлиява значително броя на жизнеспособните Сако-2 клетки след 96 часа инкубация. Така при концентрации от 2, 1 и 500 ug / ml броят на жизнеспособните клетки на човешкото дебело черво е 90.0, 88.5 и 88%, което е сравнимо с контролната група на клетките, където жизнеспособността е 96%. В същото време при същите стойности на концентрация се наблюдава значително понижение на общия брой клетки в сравнение с контролната група. Следователно, общият брой на Сако-2 клетки в контролната група след 96 часа култура е 116.7 х 103 клетки / ямка и при 500, 1 и 2 mg / ml, стойностите са 72.0 х 103, 63.3 х 10 3 и 65.9 х 103 клетки / ямка, съответно. При концентрации на екстракта от 12.5 до 250 ug / ml общият брой на клетките е сравним с контролната група и варира от 94.0 х 103 до 106.0 х 103 клетки / ямка. Въз основа на това може да се заключи, че високи концентрации на екстракт от Т. canis от 500 до 2 mg / ml инхибират активността на пролиферацията на Caco-2 туморни клетки.

При сравняване на резултатите, получени (Таблица 1) за ефекта на екстракт от Т. Canis до култура туморни клетки от човешки рак на гърдата и дебелото черво човешки може да се приеме, че MCF-7 клетки са по-чувствителни към неблагоприятното въздействие на изпитваното вещество. По този начин, данните от таблица 1, че броят на жизнеспособните клетки MCF-7 постепенно намалява от 95,2% на минималната доза от 12.5 до 79.5% при максималната от 2 мг / мл, в сравнение с референтна стойност 96.8 %. Леко инхибиторен ефект на екстракта от тест на пролиферативна активност на MCF-7 клетки се проявява вече в концентрация от 50 мкг / мл, където общият брой на клетките възлиза на 151,9 х 10 март клетки / ямка, в сравнение с референтна стойност 181,3 х март 10 клетки / добре. С увеличаване на концентрация от 100 мкг / мл и по-инхибиторен ефект се засилва пропорционално на концентрацията на екстракта и достига максимални стойности при 2 мг / мл, където общият брой на клетките се намалява от три пъти в сравнение с контролата и е 60,0 х март 10 клетки / ямка.

Въз основа на резултатите, получени в тази статия, можем да заключим следното.

1. Изследвания екстракт от T. canis има подчертан антипролиферативен ефект върху MCF-7 клетки при концентрации от 100, 250, 500, 1 и 2 mg / ml, което се проявява в 96 часа инкубация.

2. Ефектът на екстракта върху MCF-7 клетките зависи от дозата.

3. Инхибиторен ефект на екстракт от Т. Canis в пролиферативна клетъчна култура Сасо-2 активност е по-слабо изразено, и при по-високи концентрации от 500, 1 и 2 мг / мл.

4. MCF-7 клетъчната култура има по-висока чувствителност към антипролиферативния ефект на екстракта от Т. canis в сравнение с клетките на Сако-2 в in vitro модел след 96 часа култура.

1. Kang Y.J., Jo Jo, Cho M.K. et al. Инфекция от Thrichinella spiralis, туморен растеж и метастази на меланомни клетки B16-F10, Vet. Parasitol. - 2013 г. - В. 196 (1-2). - стр. 106-113.

2. Molinari J.A., Ebersole J.L. Антинеопластични ефекти на дългосрочната инфекция на Trichinella spiralis върху меланома B-16 // Int. Арх. Alergy Appl. Immunol. - 1977. - V. 55 (1-4). - стр. 444-448.

3. Поок, Д., Мерович, Е., Антинеопластичният ефект на трихинелозата в сингенния миши модел, Паразитология. - 1982. - V. 84 (т.3). - стр. 463-473.

4. Василев С., Илич Н., Груден-Монсесиджан А. и др. Некроза и апоптоза в редуцирана туморна редукция, медиирана от Trichinella spiralis // Cent. Eur. J. Immunology. - 2015. - V. 40 (1). P. 42-53.

5. Wang X.L., Fu B.Q., Yang S.J. et al. Trichinella spiralis - потенциален антитуморен агент // Vet. Parasitol. - 2009 г. - V. 159 (3-4). - стр. 249-252.

6. Wang X.L., Liu M.Y., Sun S.M. et al. Анти-туморен протеин, продуциран от Trichinella spiralis, индуцира апоптоза в човешки хепатом H7402 клетки // Vet. Parasitol. - 2013 г. - В. 194 (2-4). - стр. 186-188.

1. средство, имат антипролиферативна активност, която е протеин, екстракт Toxocara Canis, получен чрез екстракция gomogentata хелминти Т. Canis фосфат-буфериран физиологичен разтвор при рН 7.2 в съотношение 01:10 за 36-48 часа при 4 ° С, и центрофугиране.

2. Средство съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че има антипролиферативна активност върху човешки туморни клетъчни модели in vitro.

Антипролиферативният ефект е

Някои функции са в основата си антипролиферативно действие на интерферони. Повечето от компонентите на противоинфекциозната активност на интерфероните играят една или друга роля в техния антитуморен ефект.

Посочено увеличение синтеза на Mx-протеини, са инхибитори на РНК транскрипция ензими 2'-5'-олигоаденилат синтетаза система, инхибиране превод необходими за синтезата на клетъчни протеини, триптофан изчерпване на вътреклетъчните запаси, което води до нарушаване на синтеза на протеини в клетката, са от голямо значение в антипролиферативна, включително антитуморен, интерферони акт,

Стойността на промяната в нивото на 2'-5'-синтетазата в антипролиферативен ефект на IFN-a потвърдено от клиничните наблюдения: е показана корелацията на степента на повишаване на ензимното ниво с ефективността на терапията при пациенти с чревни карциноиди и лимфоми.

Не по-малко важно в антипролиферативен ефект интерферонът е друг механизъм. Сигналът, предаден от клетъчното ядро ​​чрез свързване към интерферон рецептор interferonovym намалява експресията на прото-онкогени, по-специално с-тус и С-FOS, участващи в регулирането на клетъчния растеж.

Подтискане на тези протоонкогените води до блокиране на клетъчния цикъл, натрупване на клетки в гена на гена, в резултат на което пролиферацията забавя или дори спира, тъй като повечето клетки претърпяват апоптоза. Този процес е обратим, а след известно време след отстраняване на разпространението на интерферон клетка може да се възстанови по-темпо, изразяването на онкогени, потиснати в присъствието на интерферон, след изваждането му от тялото може да се възстановят до предишното ниво.

По същия начин, действието интерферони в повечето случаи не предизвиква необратими процеси в клетките, чийто генотип се променя от интегрирането на вирусния геном в ДНК на клетката. Дългосрочната употреба на интерферон в тези случаи може да възстанови нормалния фенотип на клетките, но прекратяването на действието на интерферона отново води до развитието на тумора.

Важно в антипролиферативна, по-специално, антитуморно, интерферони действие е инхибирането на ангиогенеза - растеж и образуването на нови съдове, играе важна роля в растежа и метастазите на тумора. Многобройни проучвания, изследващи терапевтичния механизма на действие на IFN-а в хемангиоматоза показват, че интерфероните инхибират пролиферацията на ендотелни клетки и гладкомускулни клетки, инхибират фибробластен растежен фактор и ангиогенин (растежен фактор и съдови новообразувания), намаляване на производството на колаген.

Показано е, че IL-12, притежаващ подчертан антиангиогенен ефект, подобрява образуването на IFN-y и неговия ефекторен протеин р10.

На клетъчни култури от здрави донори и пациенти с остра левкемия показа, че IFN-a значително потиска активността на теломераза - ензим, който регулира дължината на теломерите, необходим за клетъчното делене. Има многократно потвърдени данни, че IFN-y увеличава експресията на FAS-антиген и каспаза 3 и по този начин предизвиква апоптоза в прекурсорите на костен мозък (CD34 +).

Получени бяха данни По подобен начин, IFN-a, и ефектът от апоптотичното му действие се усилва от фрагментирането на антиапоптозната молекула Bax, причинена от нея. IFN-a също така увеличава освобождаването на тумор некрозисфактора в кръвта, действието на което е насочено към разграждането на туморните клетки.

По този начин, от наличните до момента данни, става ясно, че интерферони антипролиферативна, включително анти-туморно действие, реализирани няколко, често взаимосвързани пътища. антитуморната активност на интерферони са от значение, тъй като, описани методи за директни ефекти върху тумора, и непреки механизми антитуморни свързани с повишена активност на макрофагите, активиране на Т клетки, естествени клетки убийци и увеличена продукция на антитела.

Антипролиферативният ефект е

Институт по епидемиология и микробиология. NF Gamalei RAMS, Москва

Антипролиферативен ефект

Висока чувствителност към туморни клетки с ефект на АР, характеризиращи се с непрекъснат неконтролиран растеж, поради което AP ефектът дава надежда за антитуморната активност на IFN. Много стотици изследователи са проучили този проблем, често комбинирайки тези две понятия, което е клинично неправилно.

Когато се използва IFN във високи дози (> 1 милион IU), ефектът на АР се изразява главно в цитопения. Клетките на хематопоетичната система са силно чувствителни към IFN. В същото време, растежът и способността за колония в костния мозък и далака се потискат. Потиснато и възпроизвеждане на митоген-стимулирани лимфоцити. Като правило лимфоидната серия е по-чувствителна към IFN, отколкото миелоида. Най-слабо засегнати от IFN еритропоезата.

Въпреки това, IFN използва във високи дневни дози (3-15 MIU), причинена циторедукция (намаляване на броя на циркулиращите туморни левкоцити) от средно 9 до 97,4x10 4,2x10 9 / л с намаляване размера на далака [28] при пациенти хронична миелогенна левкемия. Ефектът е в зависимост от прилаганите дози от лекарството (т.е. постига за сметка на АР-ефект), но за постигане на противотуморния ефект и лечебни необходими допълнителни мерки, включително костно-мозъчна трансплантация.

AP ефектът е обратим. След преустановяване на IFN, хематопоезата се възстановява напълно. Увеличава се и растежът на туморните клетки. За да се поддържа AP ефектът в организма, е необходимо постоянно да се прилагат високи дози IFN.

AP ефект е определено, свързани с активиране на 2 ', 5'-олиго (А) синтетаза, както и в различни култури на припокриване между Layer 2', 5'-oligoadenylates в цитоплазмата и степента на потискане на пролиферацията. Тази връзка все още е неясна. Един не се съмнява, че молекулярните механизми на развитието на АВ и AP-членки в следващите етапи, както изглежда различно. Например, холера токсин, промяна на физико-химичното състояние на цитоплазмената мембрана и нивото на сАМР инхибира развитието на AB състояние, но не AP ефекти [29]. Подобен ефект има и убаин, пуромицин и циклохексимид в определени концентрации.

Клетките на мускулно-кожни, мезенхимни и епителни тъкани в организма обикновено са резистентни на АР-действието на IFN. Най-чувствителният модел, използван за измерване на AP ефекта, са трансформираните В-лимфоцити от линията Daudi, изолирани от пациенти с лимфома на Burkitt. В ретроспективен анализ може да се заключи, че най-активният антипролиферативен потенциал е IFN-α. Той често е 10-20 пъти по-ефективен от IFN-s. Активността на IFN и IFN варира в зависимост от вида на клетките, но по-често IFN има предимства за клетките на кожата мускулна тъкан. По отношение на антипролиферативния потенциал са валидни следните IFN серии: IFN-> IFN-> IFN-. В този случай трябва да се има предвид, че AP ефектът е общ за всички IFN и винаги се проявява клинично, когато се използва във високи дози. Тъй като клиничният синдром обикновено е обратима цитопения, препоръчително е прилагането на IFN в дневни дози> 1 милион IU с хематопоетични активатори, например, с леувинферон.

АР-ефектът се проявява само когато IFN взаимодейства със специфични рецептори, последвано от дълбоко нарушение на синтеза на макромолекули. Мутантите на клетките, които са загубили рецептора, придобиват резистентност както към антивирусните, така и към антипролиферативните ефекти. Трябва също да се има предвид, че антипролиферативните ефекти при ниски дози е цитостатично характер: растежа на клетки е напълно възстановена след отстраняването на IFN, но това отнема време - най-малко 24 часа [30, 31].

Прегледът на множество наблюдения [32] позволи да се заключи, че антипролиферативният ефект на IFN е особено изразен в подготвителния период на пропуски (фаза G0, G1, G2), така че клетките, които имат кратък период от време и синтезата на ДНК (S-период) са интензивни или са в митозна фаза (М-фаза), са по-малко чувствителни.

Известно е, че има известно изходно ниво на 2 ', 5'-олигоаденилати в цитоплазмата, необходима за пролиферацията. Въпреки това, когато IFN се прилага в повечето тъкани, тяхното ниво може да се увеличи 10-15 пъти. Така, в мишки, получаващи IFN / вече след 2-5 часа започва да се увеличава ниво на 2 ', 5'-oligoadenylates в далака, белите дробове, черния дроб и в по-малка степен, тимус и мозъка [33]. Така например, в клетки Дауди в цитоплазмата, нови протеини с молекулно тегло от 15, 16, 20, 53, 79, 87 и 105 Ша и намалено ниво на само един протеин - 23 кД. В резистентни към АР-действащи мутантни клетки от същата линия, само един протеин - 15 kDa - очевидно не се индуцира. Нивото на други протеини е значително намалено, но все още се откриват. В същото време експресията на клетъчния прото-онкоген c-myc също се инхибира от IFN [34].

Вече е известно, че човешкия геном има около 40 клетъчни прото-онкогени, които се експресират само в ембрионални клетки, но по-малко активни в зрели. Според публикуваните данни, например, Xenopus Laevis по време на узряването на яйцеклетките във всяка от тях се натрупва до 8 милиона копия на гена с-тус, в зрели яйцеклетки етап на ниво също остава много висока - 5 милиона единици, а след това след оплождането те се разпространяват в деленето и всяка клетка на тадол съдържа само 20-50 копия на c-myc, т.е. за същото като за човек.

В човешкия геном, c-myc в зрели клетки е малко изразена. Въпреки това, в ембриогенезата, както и хирургически операции, настъпва регенерация и възстановителни процеси друга активиране генезис с-тус и други растежни онкогени С-Ras и с-Abl. Тези протоонкогени са абсолютно необходими за инициирането на пролиферацията. Активирането на растежни прото-онкогени стимулира клетките да преминат от фаза G0/ G1 до следващите етапи на клетъчния цикъл - S, G2 и митоза (М). Обаче растежът на тъканите се определя генетично и се контролира стриктно с участието на растежни фактори, инхибиране на контакт, фактори на апоптоза [22]. Главният регулатор на растежа на прото-онкогени е протеинът р53, чийто ген е широко представен в генома на бозайниците.

Клетките на система експресията на р53 ген хематопоетични води до физиологично явление - програмирана смърт - апоптоза. Предотвратява този протеин от гена bcl-2. По този начин, повишена експресия на растеж протоонкогените създава условия за неконтролиран растеж и злокачествено заболяване (особено точкови мутации, трансформиране прото-онкоген в онкоген, или когато са включени във вирусния геном и вирусен въздействието енхансер). Намаляване на тяхната експресия под действието на IFN или р53 (участва протеин и Rb, които не се считат тук) инхибира растежа и пролиферацията. Но, разбира се, тези процеси не са ограничени, всъщност те са много по-сложни.

С туморната трансформация трябва да се осъществи активиране на c-myc и други онкогени на растежа. Интересно е, че за поддържане на трансформиран фенотип е необходима постоянна експресия на онкогени и полученото присъствие на онкопротеини в цитоплазмата. Въвеждането в нормалната клетка на онкопротеините води до появата на фенотипни признаци на трансформация, които започват да изчезват, след като онкопротеините стават разградени. Въвеждането в цитоплазмата на трансформирани клетки на антитела срещу онкопротеини също води до временно възстановяване на фенотипно нормални клетки. По този начин, трансформирана клетка, като загуби на специфичните функции (диференциация), и се характеризира с неконтролиран растеж, подтискане на експресията на растеж онкогени под действието на IFN може да се върне към нормалния фенотип. Много е важно да знаете всеки лекар.

Има няколко начина за активиране клетъчни прото-онкогени - точкови мутации, геномна амплификация, натрупване на транскрипти или накрая транслокация гени, описани за хронична миелогенна левкемия (с-Abl 09:22 ген) или Burkitt лимфома (ген-тус 08:14) [35], Транслоцираният ген се влияе от нов промотор и може да бъде активиран. Може да играе важна роля и онкогенни вируси, носещи тези онкогени (обикновено с малки модификации) и могат да ги вградите в генома. Въпреки това, няма съмнение, че най-вероятно точкови мутации в гена р53, които се намират в най-малко 50% от туморните клетки, характерни за Великобритания и САЩ за човешки тумори [36]. Предполага се, че фактът, че р53 ген мутация, която намалява контрола върху дейността на растеж онкогени създава само условията за растеж на тумора. Техните клинични прояви трябва да се очаква в рамките на до 30 години, когато са включени и други сигнали, или да отслабят механизмите на противотуморния имунитет.

Възможностите на IFN за предотвратяване на антитуморни процеси са неоспорими, поне чрез влиянието върху експресията на растежни онкогени. Но те изобщо не са изследвани.

В пример-тус гена в клетки Daudi първо през 1984 г., е показано, че тип IFN I могат да се разглеждат като отрицателен регулатор на растежа на експресията на онкогени, които поне частично може да обясни АР-ефект в нормални тъкани [37]. По-късно, този ефект се наблюдава при друг онкоген растеж c-Ha-ras. Ефектът се осъществява по-често на нивото на транслация на онкогените (протеиново ниво). В примера, показан с-тус, ДНК-свързващ протеин P62 Ша, който е продукт с-тус, е необходимо за лигиране на ДНК фрагменти в една спирала Okazaki. Неговото потискане при въвеждането на IFN пречи на синтеза на нова ДНК, последвано от инхибиране на пролиферацията.

Въпреки това, други известни примери за потискане на репликация без значителен ефект върху експресията на протоонкогените растеж (моноцитен клетъчния брой I-937, HL-60, Freund еритролевкемия, Balb C / 3T3). Система 2 ', 5'-олиго (А) синтетаза-RNase L може да играе важна роля този процес чрез осигуряване на бързо разграждане на новосинтезирани иРНК, необходими за пролиферация [38].

Имуномодулаторно действие

За почти десетилетие IFN препарати се използват като антивирусни средства, които могат да защитават клетките от вирусна инфекция без имунни ефектори. Въпреки че вече редица клинични наблюдения, като например стимулиране на репарационните процеси в рани, включително силно заразен [39, 40] и обширни изгаряния [41] не се вписва в общата схема и необходим нов разбиране на [2].

Голям интерес привлича проучване в примати център в Холандия, са показали, че при маймуни, заразени с високо чувствителни към IFN щам ваксина вирус или мутант устойчиви на дозата IFN трудно постижим в организма (> 10 хиляди. IU), с тяхното последващо лечението на IFN, няма значителни разлики в клиничната динамика и напрежението на развития имунитет. И в двата случая IFN предотврати вирусно увреждане. Той посочи към доминиращата роля на имунни ефектори активирани IFN, в процес на елиминиране на вируса и последвалото клинично възстановяване.

С мерник може да се твърди, че неспецифично активиране на клетъчни имунни реакции и регулиране на ефектори в имунния отговор изглежда е - основната функция на интерферон в организма [4]. При взаимодействие с IFNy на патоген, произведен от макрофаги и лимфоцити, има възпалителна реакция, която води до унищожаване на патогена в огнището на минималната нормална тъкан лезията. Известно е, че нормално здраве се поддържа предимно чрез не-специфични клетъчни имунни отговори, по известен триада имунни ефектори: макрофаг, Т хелпер лимфоцитите и неутрофилите фагоцит. Макрофаги в този случай се разглежда като универсален антиген-представящи клетки (АРС), твърди преработени антиген на Т-клетки, заедно с активиращи цитокини. Ролята на APC се осъществява и от дендритни клетки и Langerhans клетки (кожа). Но същността на този феномен не се променя с това. APC представя обработен антиген комплекс с главния хистосъвместим комплекс (МНС) клас 2 (вирусни и туморни антигени в комплекс с МНС клас 1), която трябва да бъде разпознат от Т-клетъчен рецептор (TCR) CLE + лимфоцити. Известно е, че имуногенността на обработения антиген се увеличава приблизително 10 000 пъти, а 100 комплекси от антиген + GKG2 клас могат да взаимодействат с 18 000 TCR [42]. Това характеризира ефективността на имунното разпознаване.

Ролята на антигена може да бъде извършена от всеки патоген, който първо е умъртвен от реакции на убиване с пероксид, след което се интернализира. Следващите реакции на неспецифичния отговор са показани на Фиг. 1. Под действието на антигена, макрофагите трябва да се активират, като продуцират автокринен INF-a и IL-6. МНС клас 2 антигени, които продължават да съществуват върху макрофага, не се експресират и техният външен вид се стимулира от IFN-a и IL-4. Процесът се подтиска от трансформиращия фактор на растежа на TGF-който може също да бъде произведен от макрофагите. Източникът на IFN е винаги активиран Т-лимфоцити.

Директен контакт на макрофаги и Т-хелпер лимфоцитите антиген структура се извършва чрез МНС клас 2 + и TCR, допълнения трансмембранни гликопротеини ICAM. Това осигурява ограничаване на имунния отговор, но не е достатъчно за активиране на Т-лимфоцитите. Изисква втория сигнал като комплекс цитокин, продуциран от активираните макрофаги: тя първо IFN-а, и IL-1, IL-6, IL-12, TNF, който взаимодейства с съответната рецептор на Т хелперни клетки.

Активирани Т-хелпер лимфоцитите, поддържане макрофагите освободени в средата цитокините като IFN (стимулиране на експресията на МНС клас 2) и IL-4 (за активиране на МНС клас 1 гени), и LIF MIF задържане на макрофаги в възпаление и колония фактори (CSF) - M-CSF и GM-CSF. Поради взаимното влияние базирана активирани макрофаги и Т хелпер лимфоцитите активиране състояние се поддържа и усилване на имунния отговор постига чрез ускоряване на диференциацията на началото на макрофаги прекурсори на моноцити / макрофаги.

Сигналите от активирането на макрофаги (IFN, IL-1, TNF, IL-8, G-CSF и GM-CSF) и Т-хелперните лимфоцити (IFN, IL-3) възприемат неутрофилни фагоцити, насърчаване на тяхната диференциация, стимулиращи фагоцитната функция. В този случай, всички параметри повишени фагоцитоза - броя на зрелите сегментирани неутрофили, генерирането на пероксиди, фагоцитна индекс и номер, и (най-важното) пълнотата на фагоцитоза. Можете да кажете, че този кръг се затваря.

Основният отрицателен сигнал за цялата система е IL-10, който може да се получи както от макрофаги, така и от Т-лимфоцити. Но основната регулаторна роля в този процес привидно принадлежи на Т-лимфоцитите. Специфичните антитела при тези реакции може да не участват.

Съвкупността от клетъчни реакции антиген премахване включващи макрофаги (или други APCs), Т-лимфоцити и полиморфонуклеарни фагоцити, в които не е необходимо в пролиферацията и диференциацията на Т лимфоцити може да се счита първата фаза на имунния отговор. Това е тясно свързано с следната - втора фаза, която започва в нивото на пролифериращи Т-лимфоцити и определя основната посока в последващи реакции на организма на патогена, когато са включени старт клетка (в частност DTH), или хуморален immunogenesis път.

Първата фаза на имунния отговор постоянно функционира и очевидно е основната непосредствена реакция на организма с ниски натоварвания на патогена. Той се активира веднага след разпознаването на антигена. Неговите участници са имунни ефектори, диференцирани към този момент, но от друга страна, създават основа за последващи имунни реакции. Защитната роля на реакциите от първата фаза на имунния отговор е изключително висока и очевидно е подценена от лекаря.

Влезте в профила си

AN Мойсеев, Кан. ветеринар. Sciences, LLC "BIOTECH-PHARM", Санкт Петербург

PI Баръшников, д-р Ветеран. Sci., Професор, Държавен аграрен университет в Алтай, Барнаул

Семейството цитокини включва интерферони (по-нататък - IFN), интерлевкини, хемокини, фактори, стимулиращи растежа и колонията, които са сигнални полипептидни молекули на имунната система. Те притежават широк спектър от биологична активност, определят не само адекватно ниво на имунна реакция, но и регулират взаимодействията на основните интегративни системи на тялото - нервни, имунни и ендокринни.

Структурата и механизмът на действие на повечето цитокини са напълно характеризирани. Чрез използването на техники на генното инженерство и биотехнологиите модерен, много цитокини в момента са получени като рекомбинантни препарати идентични ендогенни молекули, в количества, достатъчни за тяхното клинично използване.

Многобройни микроорганизми - бактерии, дрожди, вируси - се използват като реципиенти на чужд генетичен материал, за да се получат рекомбинантни щамове - производители на биотехнологични продукти. По този начин бяха получени рекомбинантни щамове на Е. coli, произвеждащи интерферони, инсулин, растежни хормони, различни антигени; щамове на B. subtilis, произвеждащи интерферон; дрожди, произвеждащи интерлевкини и др.

Използването на рекомбинантни цитокини, които осигуряват адекватна и целенасочена лекарствена корекция на имунните дисфункции, повишава ефективността на имунотерапията и лечението като цяло. Въведени в тялото, цитокините запълват дефицита на ендогенните регулаторни молекули и напълно възпроизвеждат ефектите от тях. Това е особено важно при тежки или хронични заболявания, в които използването на конвенционални имуномодулатори или индуктори на синтеза на цитокини е безполезен поради изчерпването на изравнителната капацитета на имунната система. В момента рекомбинантната цитокинова терапия е една от най-обещаващите и все по-разширяващи се области на имунофармакологията.

По този начин, антивирусното и антипролиферативното действие се упражнява от интерферони от първия тип (оттук нататък - IFN-a, IFN-p). Специално място в светлината на съвременните идеи за молекулните механизми на имунните отговори принадлежи на интерферон гама (по-нататък - IFN-y) - регулаторен цитокин на имунния отговор.

Въз основа на рекомбинантни интерферони, различни компании са разработили лекарства за животни и хора, които се използват за лечение и профилактика на инфекциозни заболявания, предимно вирусна етиология.

Рекомбинантен IFN в животни и хора за лечение и профилактика на заболявания на различни етиология осигури адекватна и целенасочено корекция лекарство имунни дисфункции попълване дефицитни ендогенни регулаторни молекули и възпроизвежда техните ефекти. Висока immunokorrigirujushchaja ефективност, предвидимостта и селективност на тяхното действие се дължи на наличието на специфични рецептори върху клетките и наличието на естествени механизми за отстраняването им. Фармацевтичните състави на базата на рекомбинантен IFN са мощни патогенни агенти и притежават имуно-терапия като пряко действие заместител, и упражняват различни индуктивни ефекти. В момента те се използват широко при лечението на инфекциозни, онкологични и някои други болести по животните.

Класификация на интерфероните

Интерфероните (IFN, IFN) - общо наименование, при които сега общият брой на биологично активни протеини или гликопротеини, които имат подобни свойства, които са синтезирани от клетките в процеса на защитна реакция в отговор на нахлуването на чужди агенти - вирусна инфекция или антигенна експозиция. Благодарение на интерфероните клетките стават имунизирани срещу вируса.

Интерфероните са мултигенно семейство от индуцируеми цитокини, които имат различни функции, включително антивирусни, антипролиферативни, антитуморни и имуномодулиращи.

Понастоящем са известни повече от 20 IFN, които се различават по структура, биологични свойства и преобладаващия механизъм на действие. IFN е разделен на три типа:

• Тип I, известен като вирус интерферон, включително IFN-α (левкоцити, синтезиран от активирани моноцити и В-лимфоцити), IFN-β (фибробластен синтезира от фибробласти, епителни клетки и макрофаги) и други IFN. Първи тип (IFN-α, IFN-β) главно присъщи противовирусни и антипролиферативни ефекти в по-малка степен - имуномодулаторни. Те се произвеждат веднага след срещата с патогена - индуцирана в процеса на вирусната инфекция, и тяхното действие е насочено към локализацията на патогена и предотвратяване на разпространението му в организма. Индуктори на IFN-α и -β са вируси, РНК (особено двойноверижна), липополизахариди (LPS), някои компоненти на бактериите. Сред вирусите най-мощните индуктори на интерферон са РНК геноми. ДНК-съдържащите вируси са слаби индуктори (с изключение на поксвирусите).

• Тип II, известен като имунен, включва IFN-y (синтезиран от активирани Т лимфоцити и NK клетки). Основният ефект на интерфероните от втория тип (IFN-y) е участието в реакции на имунитет. Той започва да се генерира в последващите етапи на инфекциозния процес е чувствителен Т лимфоцити и участва активно в каскадата на специфичен имунен отговор. Индуцирането на IFN-y продуцира интерфероногенни субстанции, антигени, Т-митогени и някои цитокини. Целевите клетки за действието на IFN-γ са макрофаги, неутрофили, естествени клетки убийци, цитотоксични Т-лимфоцити, като на техните повърхностни рецептори за производство на IFN-γ IFN-γ се контролира от цитокини. IL-12 и IL-18 се подобри неговата експресия, и IL-2 помага за изпълнение на функцията на CD4 + лимфоцити чрез активиране на производството на IFN-γ. Предистория брой IFN-γ е винаги там, в тялото, дори и ако е налице инфекция, например, анализ на състоянието на интерферон показва при здрави хора и животни винаги забележимо количество IFN в кръвта, тя увеличава много пъти по време на стимулация или инфекция. Въпреки това, ако херпес вирусна инфекция и в последните етапи на тумор количество от IFN-γ клони към нула като вируса херпес и раковите клетки продуцират протеини, които инхибират синтеза на IFN-γ. Ето защо, при херпесвирусна инфекция и рак, индукторите на интерферона са безсмислени, те трябва да се инжектират в тялото отвън.

• Тип III е открит по-късно, тип I и тип II; информацията за него показва важността на IFN тип III при определени видове вирусни инфекции.

Вирусните интерферони (IFN-α / β) се индуцират по време на вирусната инфекция и синтезата на тип II интерферони (IFN-y) се индуцира от митогенни или антигенни стимули. Повечето видове вирусно инфектирани клетки могат да синтезират IFN-a / p в клетъчна култура. За разлика от това, IFN-y се синтезира само от определени клетки на имунната система, включително естествени убийци (NK) клетки, CD4 Т клетки и CDS цитотоксични супресорни клетки.

Антивирусен ефект на интерферони

Интерфероните не действат директно върху вируса. Под тяхно влияние клетката става устойчива на инфекция. Интерфероните са първата линия на защита срещу вирусна инфекция, тъй като те започват да се произвеждат непосредствено след излагането на вируса. В този случай тежестта на отговора е директно пропорционална на инфекциозната доза.

Някои вируси могат да блокират антивирусния ефект на IFN. Например, аденовирусите продуцират специфична РНК, която предотвратява активирането на протеин киназа.

Свързването на IFN с рецептора индуцира три съпътстващи процеси в клетката, които завършват:

• активиране на латентна ендорибонуклеаза, водещо до разрушаване на вирусна РНК;

• подтискане на синтезата на вирусна матрична РНК;

• потискане на синтеза на протеини от вирусната обвивка.

Тези механизми интегрират антивирусния ефект интегрално, което води до потискане на вирусната репликация.

Имуномодулиращо действие на интерфероните

IFN не само притежават антивирусна, имуномодулиращо действие, но също и поради влиянието на експресията на главния хистосъвместим комплекс рецептор (МНС). IFN молекули увеличават експресията на клас 1 МНС на всички видове клетки, като по този начин подобряване на признаването на инфектираните клетки от цитотоксични Т лимфоцити (CTL). В допълнение, IFN-γ повишава експресията на молекулен клас 2 МНС на антиген-представящите клетки, като по този начин подобряване представянето на вирусни антигени CD4 + лимфоцити и естествени клетки убийци (NK-клетки) са активирани. IFN също стимулира фагоцитозата.

Регулирането на имунния отговор от цитокини, включително интерферони, се извършва съгласно принципа на релето, ефектът на цитокин върху клетката предизвиква образуването на други цитокини (цитокинова каскада).

Антипролиферативен ефект на интерфероните

Антипролиферативният ефект на IFN се обяснява със следните механизми:

• активиране на цитотоксични клетки;

• повишена експресия на тумор-свързани антигени;

• модулация на производството на антитела;

• инхибиране на туморни растежни фактори;

• инхибиране на синтеза на РНК и протеини на туморната клетка;

• забавяне на клетъчния цикъл с преход към фаза на почивка;

• Стимулиране на туморни клетки за зреене;

• възстановяване на възпиращия контрол на разпространението;

• инхибиране на образуването на нови съдове в тумора;

• биомодулация на цитостатичната активност: промени в метаболизма и намален клирънс;

• преодоляване на лекарствената резистентност чрез инхибиране на гени за множествена лекарствена резистентност

Антибактериален ефект на интерфероните

През последните години е показано, че IFN също има антибактериален ефект, който се основава на способността на IFN да индуцира активността на някои ензими в засегнатата клетка.

В допълнение, антибактериалната роля на IFN-y е да активира макрофаги, които произвеждат провъзпалителни цитокини, както и активни форми на кислород и азот, простагландини. Тези фактори допринасят за развитието на възпалителен процес, водещ до смъртта на бактериите.

По този начин, всички интерферони са група от полифункционални протеинови фактори с изразен антивирусен и антитуморен ефект в различна степен. IFN-a има най-силна антивирусна активност сред всички интерферони и IFN-y има по-изразена антипролиферативна активност. Всички интерферони имат имунорегулаторни ефекти с различна тежест (максимално притежава IFN-y) - повишават активността на макрофагите, Т-лимфоцитите и NK клетките.