Протеинови фракции чрез електрофореза (в кръвта)

Метастази

Протеиновата електрофореза е метод за отделяне на протеини от кръвния серум в фракции под въздействието на електрически ток. Методът осигурява цялостна оценка на съотношението протеини при нормални и патологични състояния. По-често това е допълнителен тест за диагностицирането на заболявания. Основните индикации за назначаването: различни възпалителни заболявания, системни заболявания, чернодробни заболявания, туморен процес (миелом).

При миелом и други гамапатии в кръвта и урината могат да се появят парапротеини (патологични имуноглобулини и техните вериги). За да бъдат открити чрез метод имунофиксация електрофореза с помощта на специфични антисеруми (вж. "Имуноелектрофорезата", "Определяне на свободния имуноглобулинови леки вериги (капа и ламбда) в серума и урината").

  • Алопуринол. Asparginaza. Азатиопрингг. Хлорпропамид. Цисплатин. Дапсонът. Декстран. Естрогените. Ибупрофен. Изониазид. Поемането на нитрофлорантоин. Перорални контрацептиви. Фенитоин. Преднизолон (високи дози). Sargramostim. Валпроева киселина.

  • Естрогените. Перорални контрацептиви. Фенитоин.

  • Естрогените. Перорални контрацептиви.

    Назначен в следните случаи.

  • При остри и хронични възпалителни заболявания (инфекции, колагенози и много други). С онкологични заболявания. Синдром на недохранване и малабсорбция.

    Реалната хипералбуминемия, поради естествени причини, не съществува. Всяка ситуация, водеща до намаляване на съдържанието на вода в плазмата, повишава концентрацията на всички плазмени протеини, включително албумин.

  • Ревматични заболявания. Топлинни изгаряния. Грануломатозни процеси. Повечето бактериални инфекции. Вирусни инфекции. Съпътстващо унищожаването на тъканите. Некроза на тъканта (по-специално, наблюдавана при злокачествени процеси). Васкулит. Улцерозна болест на червата. Serozity. Субакутен бактериален ендокардит. Някои паразитни лезии.

  • Остри и хронични чернодробни заболявания. Амилоидоза. Нарушения в храненето. Злокачествени неоплазми. Застойна сърдечна недостатъчност. Констриктивен перикардит. Лезии на сърдечните клапи. В някои редки случаи синтезата на албумин практически липсва в резултат на генетични механизми, т.е. вродена аналбуминемия. Стойностите на албумина по време на бременност обикновено се намаляват заедно с увеличаване на обема на плазмата.

  • Нефротичен синдром. Топлинни изгаряния. Увреждания и смачкване на тъканите. Транудация или ексудация от кухи органи или епителни повърхности. След кървене и въвеждането на течности, отблъскващи кръвта. Гастроинтестинални и лимфни фистули. Повторна торакоцентеза или парацентеза, различни ентеропатии, свързани с повишена чувствителност към храна (напр. Глутен).

  • Повишена телесна температура. Антиметаболити. Семейска идиопатична хипопротеинемия. Състоянието на хиперметаболизъм от хормонален произход (например, болест на Кушинг, тиреотоксикоза, някои злокачествени неоплазми, прееклампсия).

  • Бременност. Въвеждане на екзогенни естрогени. Различни моноклонални имунопатии (включително миелома и Waldenstrom макроглобулинемия). Застойна сърдечна недостатъчност.

  • Острата фаза протеин (а1 глобулин фракция съдържа главно алфа-1-антитрипсин, kisly1 алфа 1-гликопротеин, алфа 1-липопротеин). Увеличаване на многобройни остри, субакутни или хронични възпалителни и неопластични заболявания, както и при чернодробни заболявания.

  • Тежко чернодробно заболяване. Наследствен дефицит а1 - антитрипсин. Tangiera заболяване (а1 - липопротеин) -Не плазмен HDL и ApoA-l, увеличаване на нивата на триглицеридите и ранно начало на атеросклероза.

  • Алфа2-фракция - съдържа главно алфа2-макроглобулин, хаптоглобин, аполипопротеин В.
    Нефротичен синдром (свързан с хипоалбуминемия); с някои субакутни и хронични възпалителни и неопластични заболявания, стадий на възстановяване от топлинни изгаряния.

  • В редки случаи, със захарен диабет. Панкреатит. Хемолиза.

  • Първична или вторична хиперлипопротеинемия (особено тип II), моноклонална гамопатия.

    Хипобеталипопротеинемия, IgA дефицит.

  • Поликлонални гамопатии: Хронични чернодробни заболявания, хронични инфекции, някои автоимунни (RA, SLE). Поликлонални гама патологии (припокриване на бета и гама зони): Свързани с хепатит, цироза. Поликлонални гамапатия (олигоклонално на eletroforegramme пътека на тясна лента): хроничен активен (липоиден) хепатит, циркулиращи имунни комплекси (например, ревматоиден артрит). Моноклонална гамапатия: болести срещащи с дискразия или лимфопролиферация лимфоидна тъкан клетки (например миелом, макроглобулинемия, амилоидоза, лимфом, хронична лимфоцитна левкемия), моноклонална гамопатия с неизвестна етиология.

  • Имунодефицит или имуносупресия.

    Протеиновата електрофореза е метод за отделяне на протеини от кръвния серум в фракции под въздействието на електрически ток. Методът осигурява цялостна оценка на съотношението протеини при нормални и патологични състояния. По-често това е допълнителен тест за диагностицирането на заболявания. Основните индикации за назначаването: различни възпалителни заболявания, системни заболявания, чернодробни заболявания, туморен процес (миелом).

    При миелом и други гамапатии в кръвта и урината могат да се появят парапротеини (патологични имуноглобулини и техните вериги). За да бъдат открити чрез метод имунофиксация електрофореза с помощта на специфични антисеруми (вж. "Имуноелектрофорезата", "Определяне на свободния имуноглобулинови леки вериги (капа и ламбда) в серума и урината").

    Съотношението албумин / глобулин е съотношението на броя на албусите към серумните глобулини. Обикновено това е 1.5-2.3.

    Протеинови фракции чрез електрофореза (в кръвта)

    Ключови думи: възпаление на имуноглобулиновата гематопатия албумин глобулин миелом на кръвта

    Протеиновата електрофореза е метод за отделяне на протеини от кръвния серум в фракции под въздействието на електрически ток. Методът осигурява цялостна оценка на съотношението протеини при нормални и патологични състояния. По-често това е допълнителен тест за диагностицирането на заболявания. Основните индикации за назначаването: различни възпалителни заболявания, системни заболявания, чернодробни заболявания, туморен процес (миелом).

    При миелом и други гамапатии в кръвта и урината могат да се появят парапротеини (патологични имуноглобулини и техните вериги). За да бъдат открити чрез метод имунофиксация електрофореза с помощта на специфични антисеруми (вж. "Имуноелектрофорезата", "Определяне на свободния имуноглобулинови леки вериги (капа и ламбда) в серума и урината").

    Съотношението албумин / глобулин е съотношението на броя на албусите към серумните глобулини. Обикновено това е 1.5-2.3.

    Протеинови фракции

    Протеинови фракции - е съотношението на компонентите, които образуват един индикатор - общия протеин на кръвта. Оценката на съотношението на протеиновите фракции позволява да се открият характерни патологични състояния в тялото.

    Сместа от кръвни протеини може да бъде разделена чрез електрофореза на 5 фракции:

    2. α1 - глобулини: алфа1-антитрипсин, алфа1-киселинен гликопротеин (орозомукоид), алфа1-липопротеин.

    3. α2 - глобулини: алфа2-макроглобулин, церулоплазмин, хаптоглобин, антитромбин III, тироксин-свързващ глобулин. Това са протеини с остра фаза, главният от тях алфа2-макроглобулин е отговорен за развитието на възпалителни реакции при инфекции.

    4. β - глобулини: трансферин (желязо носител протеин), компонентите на системата на комплемента, hemopexin (хем се свързва с не отделя чрез бъбреците), имуноглобулини, С-реактивен протеин.

    5. γ - глобулини: лизозим, фибриноген, имуноглобулини от класове IgG, IgA, IgM, IgE. Последните са антитела, които предпазват тялото от проникване на чужди агенти.

    Оценката на протеиновите фракции е сложно проучване, чиито резултати трябва да бъдат разгледани в агрегата. Основните видове нарушения на протеиновия метаболизъм, които най-често се откриват, са диспротеинемията и парапротеинемията.

    Диспротеинемията е нарушение на съотношението на компонентите, обединени в понятието "общ протеин". В същото време количеството на общия протеин може да бъде нормално. Типични промени в състава на протеините са характерни за някои заболявания.

    • Увеличаване алфа1 - и алфа2-глобулини характеристика на остро възпаление - остър бронхит, пневмония, остър пиелонефрит, миокарден инфаркт, травма, тумори.
    • Увеличаването на алфа2-глобулини показва, нефротичен синдром, се обяснява с натрупването на алфа 2 макроглобулин с едновременно загуба на албумин по време на филтриране в бъбреците.
    • Увеличаването на нивото на гама глобулини показва хроничен възпалителен процес в организма: хроничен хепатит, ревматоиден артрит.
    • Увеличаване на гама глобулини при едновременно сливане на фракции на гама и бета глобулини по време на електрофореза: цироза на черния дроб.

    Парапротеинемията е появата на необичаен моноклонален протеин, наречен парапротеин, М-протеин, М-градиент. Нивото на М-протеина над 15 g / l показва миелом. Малки количества М-протеин могат да бъдат намерени при пациенти в напреднала възраст с хроничен хепатит.

    Появата на М белтъка вероятно в множествена миелома (повишено производство IgG) с макроглобулинемия (прекомерно образуване IgM) на Waldenstrom, с моноклонална гамопатия с неизвестен произход (хиперпродукция IgA). Във всеки случай, при изследването на протеинови фракции класа на имуноглобулина не може да бъде изяснен, така че се оценява само общо увеличение на протеина М.

    Индикации за анализ

    Остри възпалителни заболявания.

    Хронични възпалителни заболявания.

    Подготовка за изследвания

    В деня преди проучването не вземайте алкохолни напитки, мастни храни, ограничавайте физическата активност.

    Кръвта се изразходва за изследване сутринта на празен стомах, дори чай или кафе се изключва. Допустимо е да се пие обикновена вода.

    Времето между последното хранене и вземането на кръв за изследването е поне осем часа.

    Кръвта трябва да се вземе за изследването от 8 до 11 часа сутринта.

    Материал за изследване

    Тълкуване на резултатите

    норма: Стойностите на нормата могат да варират леко в зависимост от лабораторията. Сравнете резултата с нормата на празното място на резултата от анализа. Ако не е в списъка, вижте по-долу.

    Увеличение:

    • бременността,
    • алкохолизъм,
    • дехидратация на тялото.

    2. α1 - глобулини:

    • инфекциозни заболявания,
    • системни заболявания на съединителната тъкан,
    • болест на Ходжкин,
    • цироза на черния дроб,
    • третото тримесечие на бременността,
    • приемане на хормонални лекарства - андрогени.

    3. α2 - глобулини:

    • нефротичен синдром,
    • цироза на черния дроб или хепатит,
    • хроничен възпалителен процес (ревматоиден артрит, нодуларен периартрит).
    • механична жълтеница,
    • желязо-дефицитна анемия (повишен трансферин),
    • приемане на естрогени.
    • хронични инфекциозни заболявания,
    • паразитни инфекции,
    • саркоидоза,
    • чернодробно заболяване (хроничен хепатит, цироза);
    • множествена миелома,
    • Болестта на Waldenstrom,
    • моноклонална гамопатия.

    Намалена:

    • недостатъчен прием на протеини от храната,
    • нарушаване на абсорбцията на протеини в червата,
    • злокачествени тумори,
    • изгаряния,
    • излишната течност в тялото,
    • наследствена патология - аналбуминемия.

    2. α1 - глобулини:

    • вроден дефицит на алфа1-антитрипсин.

    3. α2 - глобулини:

    • Изгаряния и травми (намаляване на алфа2-макроглобулин),
    • хемолиза (намаляване на хаптоглобина).
    • хронично чернодробно заболяване
    • нефротичен синдром.
    • радиационна болест,
    • агамаглобулинемия или хипогамаглобулинемия,
    • лимфосарком
    • болест на Ходжкин.

    Изберете симптомите, които ви засягат, отговорете на въпросите. Разберете колко сериозен е проблемът Ви и дали трябва да посетите лекар.

    Преди да използвате информацията, предоставена от medportal.org, моля прочетете условията на потребителското споразумение.

    Споразумение с потребителя

    Сайтът medportal.org предоставя услуги по условията, описани в този документ. Чрез използването на уебсайта потвърждавате, че сте прочели условията на това Споразумение с потребителя, преди да използвате сайта, и приемете напълно всички условия на това Споразумение. Моля, не използвайте уеб сайта, ако не сте съгласни с тези условия.

    Описание на услугата

    Цялата информация, публикувана на сайта, е от референтен характер, информацията, взета от отворени източници, е референтна и не рекламира. Сайтът medportal.org предоставя услуги, които позволяват на потребителя да търси лекарства в данните, получени от аптеките в рамките на споразумение между аптеките и сайта medportal.org. За удобство при използването на сайта данните за лекарствата, хранителните добавки се систематизират и им се дава само един правопис.

    Сайтът medportal.org предоставя услуги, които позволяват на потребителя да търси клиники и друга медицинска информация.

    Ограничаване на отговорността

    Информацията, поставена в резултатите от търсенето, не е публична оферта. Администрацията на сайта medportal.org не гарантира точността, пълнотата и (или) уместността на показваните данни. Администрацията на сайта medportal.org не носи отговорност за вредите или щетите, които бихте могли да причинят от достъп или невъзможност за достъп до сайта или от използването или невъзможността да използвате този сайт.

    Приемайки условията на това споразумение, напълно разбирате и приемате, че:

    Информацията в сайта е само за справка.

    Администрацията на сайта medportal.org не гарантира липсата на грешки и несъответствия по отношение на обявената на сайта и действителната наличност на стоки и цени на стоките в аптеката.

    Потребителят се задължава да изясни информацията, представляваща интерес за него, чрез телефонно обаждане в аптеката или да използва предоставената информация по свое усмотрение.

    Администрацията на сайта medportal.org не гарантира липсата на грешки и несъответствия по отношение на работния график на клиниките, тяхната контактна информация - телефонни номера и адреси.

    Нито администрацията на сайта medportal.org, нито друга страна, участваща в процеса на разкриване на информация, не носи отговорност за вредите или вредите, които бихте могли да понесате, като изцяло зависи от информацията, предоставена на този уебсайт.

    Администрацията на сайта medportal.org се ангажира и се ангажира да продължи да полага всички усилия, за да сведе до минимум несъответствията и грешките в предоставената информация.

    Администрацията на сайта medportal.org не гарантира липсата на технически неизправности, включително във връзка с работата на софтуера. Администрацията на сайта medportal.org се ангажира да поеме възможно най-скоро възможно усилие, за да отстрани всички пропуски и грешки в случай на тяхното възникване.

    Потребителят е предупреден, че администрацията на сайта medportal.org не носи отговорност за посещаването и използването му на външни ресурси, връзки към които могат да се съдържат в сайта, не предоставят одобрение на съдържанието им и не носят отговорност за тяхната наличност.

    Администрацията на сайта medportal.org си запазва правото да спре експлоатацията на сайта, частично или напълно да променя съдържанието му, за да измени Споразумението за ползване. Такива промени се правят само по преценка на администрацията без предварително уведомяване на Потребителя.

    Вие потвърждавате, че сте прочели условията на това Споразумение за ползване и напълно приемете всички условия на това Споразумение.

    Рекламната информация, чието разположение на уебсайта има подходящо съгласие с рекламодателя, се отбелязва "върху правата за реклама".

    Работна бройка 1. Отделяне и количествено определяне на протеин

    Фракции на кръвния серум чрез електрофореза на хартия.

    Принцип на метода. Електрофорезата е движението на заредени частици в областта на постоянен електрически ток. Скоростта на движение на протеиновите молекули в електрическото поле зависи от заряда, молекулното тегло, рН, йонната сила на разтвора.

    Серумните протеини се поставят върху лента от хартия, навлажнена с буферен разтвор, през който преминава постоянен електрически ток. При рН 8,6 серумните протеини се зареждат отрицателно и се прехвърлят в анода под действието на електрическото поле.

    Човешкият кръвен серум съдържа различни протеини. С помощта на електрофореза на хартия, пет фракции - албумини, α1-, α2-, Р-, г-глобулини.

    Клинично и диагностично значение.Много патологични състояния са придружени от количествени промени в съотношението на белтъчните фракции на кръвта - диспротеинемия. Намаляването на съдържанието на албуминната фракция е характерно за чернодробните заболявания, дължащи се на намаляването на протеино-синтезиращата функция на хепатоцитите. Хипоалбуминемията също съпътства бъбречно заболяване поради загуба на протеини в урината. Увеличаване на съдържанието на α1- и α2-глобулините се наблюдават при стрес, наличието на възпалителни процеси, дължащи се на протеини от "острата фаза", с колагеноза и метастази на злокачествени неоплазми. Р-глобулиновата фракция расте с хиперлипопротеинемия. Г-глобулиновата фракция се увеличава в имунните отговори, причинени от вирусни и бактериални инфекции. Намаляване на фрагмента на г-глобулин може да възникне при първичен и вторичен имунен дефицит.

    Редът за изпълнение на работата

    1. Устройство на устройството за електрофореза. Устройството се състои от токоизправител, осигуряващ постоянен ток с необходимото напрежение, и камера за електрофореза. Самият фотоапарат се състои от 2 вани; един от тях има постоянен дял, който е поставен платинен електрод (анод +), а другият електрод е изработен от неръждаема стомана (- катод). Между баните, напълнени с подходящ буфер, има свързващ мост, върху който са поставени ленти със специална филтърна хартия.

    2. Извършване на електрофореза. Напълнете двете вани с разтвор на Veronal буфер с рН 8.6. Буферният разтвор в баните трябва да бъде толкова голям, че да покрива фиксираната преграда, но е под подвижните прегради.

    Поставете електродите във ваните. Нарежете лентата с необходимия размер от филтърната хартия в зависимост от размера на камерата (обикновено широчина 4-6 cm) и маркирайте с обикновен молив мястото, където се прилага серумът (начало). Омекотете тези ленти във вернолен буфер. Поставете свързващия мост във ваните. Поставете лентите от хартия на форцепс сухи плоча, потапяне краищата на лентите в банята с буфер, и предварително маркирани части на хартията постави на 0,025-0,005 мл серум на разстояние 5-6 см от ръба на моста. Серумът се прилага отстрани на катода.

    Фигура 1. Схема на камерата за електрофореза на протеини на хартия:

    1-стабилизатор; 2-камерна за електрофореза; 3-буфериран разтвор; 4-поддържащ свързващ мост-електрод; 5-филтърна хартия за електрофореза.

    След прилагане върху хартиените ленти на серума, камерата се затваря с капак. На капака на камерата има заключваща скоба, която се използва за включване на камерата. Прикрепеният токоизправител захранва постоянен ток от 2 до 4 mA към камерата при постоянно напрежение 110-160 V. Електрофорезата се извършва при потенциален градиент от 3 до 8 V на 1 cm лента при стайна температура. Доброто разделяне се извършва в рамките на 18-20 часа.

    3. Изключване на устройството и откриване на протеинови фракции. Изключете устройството. Извадете камерите и извадете хартиените ленти от устройството. След това всяка лента се поставя в шкаф за сушене в продължение на 20 минути при температура 105 ° С. Това фиксира протеиновите фракции върху хартията. протеини оцветяване се извършва с разтвор на бромофенол синьо за 30 минути, след това се промиват electrophoretogram 2% разтвор на оцетна киселина. Получените електрофореграми се изсушават във въздуха. Протеиновите фракции са оцветени в синьо-зелено.

    4. Количествено определяне на протеинови фракции. Оцветените протеинови петна се изрязват, боята се елуира с 0.01 N алкален разтвор. Интензитетът на цвета на всяка фракция се определя колориметрично при FEC.

    Количественото определяне на протеиновите фракции върху електрофореграмата може да бъде установено по два начина: чрез елуиране на мастилото и фотоколориметрия и денситометричен метод.

    Съдържанието на протеинови фракции от кръвен серум, получени чрез електрофореза на хартия, е средно за възрастен:

    Денситометричен метод. В специален апарат (денситометър) преминава светлинен лъч през електрофореграмата, чиято абсорбция зависи от оптичната плътност на оцветените протеинови петна. Светлината предава чрез electrophoretogram, фотоклетката се улавя и се превръща в електрически ток, колебанията на която е фиксирана на хартиен лист във формата на крива, всеки връх на кривата съответства на определен протеин фракция.

    Фигура 2. Електрофореграмата на човешкия серум.

    Протеинови фракции чрез електрофореза

    Важна диагностична стойност е количествената връзка между отделните протеини на кръвния серум. В серума на здрав човек може да бъде открит чрез електрофореза на протеиновите фракции 6: преалбумин, албумин, алфа-1 глобулин, алфа-2-глобулини, бета-глобулини, гама-глобулин.

    Анализът на протеиновите фракции ни позволява да определим за сметка на коя фракция пациентът има увеличение или дефицит на протеин, а също и да прецени специфичността на промените, характерни за тази патология.

    Изследването на протеиновите фракции обаче дава възможност да се прецени излишъкът от протеини или дефицитът, характерен за болестта, само в най-общата му форма.

    Промените в фракцията на алфа-1-глобулин се наблюдават при остри, субакутни възпалителни процеси, обостряне на такива хронични процеси; увреждане на черния дроб.

    Промените в алфа-2-глобулиновата фракция се наблюдават при всички видове остри възпалителни процеси.

    Промени в бета-глобулиновата фракция. Бета-фракцията съдържа трансферин, хемопексин, компоненти на комплемента, имуноглобулини и липопротеини. Увеличаването на тази фракция се открива с първична и вторична хиперлипопротеинемия, чернодробни заболявания.

    Промени в гама-глобулиновата фракция. Гама фракция съдържа имуноглобулини G, А, М, D, Е. Следователно, повишени нива на гама глобулин се наблюдава в реакцията на имунната система, когато е развитието на антитела и антитела: в вирусни и бактериални инфекции, възпаления, колаген, деградация тъкан и изгаряния. Значителна хипергамаглобулинемия, отразяваща активността на възпалителния процес, е характерна за хроничния активен хепатит и цироза на черния дроб.

    Увеличаването на тази фракция се наблюдава при 88-92% от пациентитеRактивен хепатит, със значително увеличение (до 26 g / l и по-висока) при 60-65% от пациентите. Почти същите промени са били докладвани при пациенти с чернодробна цироза висока активност, в напреднала цироза, а често съдържание бета-глобулин надвишава съдържанието на албумин, който е лош прогностичен знак.

    Често, за да се оцени тежестта на диспротеинемията, се изчислява коефициентът на албумин-глобулин, т.е. съотношение на фракцията на албумина към стойността на фракцията от глобулини. Обикновено тази цифра е от 2,5 до 3,5. При пациенти с хроничен хепатит и чернодробна цироза, този коефициент се понижава до 1,5 и дори до 1 поради намаляване на албумина и увеличаване на фракцията на глобулините.

    Протеинови фракции чрез електрофореза

    Отбелязва се ясно повишаване на нивото на калций в кръвната плазма при развитието на тумори в костите, хиперплазия или аденом на паращитовидните жлези. В такива случаи калцийът влиза в плазмата от костите, които стават крехки.

    Важна диагностична стойност е определянето на нивото на калций при хипокалцемия. Състоянието на хипокалциемия се наблюдава при хипопаратироидизъм. Нарушаването на функцията на паратироидното желе води до рязко намаляване на съдържанието на йонизиран калций в кръвта, което може да бъде придружено от конвулсивни атаки (тетания). Намаляване на концентрацията на калций в плазмата също се отбелязва при рахит, слюнка, обструктивна жълтеница, нефрози и гломерулонефрит.

    Механизмът на кръвосъсирването.

    Системата за коагулация на кръвта е каскадна верига от протеолитични реакции.

    Каскадата от реакции осигурява постепенно укрепване на първоначалния слаб сигнал - ефект, който предизвиква активиране на вътрешните и външните механизми за задействане на коагулацията. Всеки следващ етап води до формирането на все по-големи количества от активната форма на следващия фактор. Съществува лавинообразно увеличение на "мощта" на всеки следващ етап от каскадата, в резултат на което стадият на превръщане на фибриноген във фибрин протича много бързо.

    Първият етап - намаляване на повредения кораб.

    Вторият етап - образуване на бели кръвни съсиреци. Протромбин (VII фактор) под действието на тромбопластин (III) тромбоцити и калциеви йони (IV) се превръща в активна форма - тромбин. В този етап се включват факторите на външния механизъм за задействане на коагулацията: проконвертин (VII); прокалерин (V); Stewart фактор (X), както и фактори на вътрешния механизъм за задействане на коагулацията: фактор Коледа (IX); фактор Rosenthal (XI); Фактор Hageman (XII)

    Третият етап - образуване на червен кръвен съсирек. Тромбин активира фибриногена (I), превръщайки го в активна форма на фибрин-мономер. След това се образува фибрин - образува се полимер (фибринов гел), който не се отличава с неговата сила. Тя може лесно да унищожи механичния ефект. Под действието на ензима трансглутаминаза на (HIIIa) образуват силни ковалентни връзки между фибринови мономери и между фибрин и фибронектин протеин, стабилизиращи гел фибрин.

    След един час съсирекът се компресира (отдръпване на кръвния съсирек). След това има фибринолиза (четвърти етап). Плазминоген от ензим урокиназа и тъканен плазминогенен активатор (ТАП) се превръща в неговата активна форма - плазмин (частична протеолиза), в която разцепва фибрин - полимерни пептидни връзки.

    Тромбът се разтваря в рамките на няколко дни.

    Ролята на витамин К в кръвосъсирването.

    Витамин К е част от ензими, които катализират карбоксилиране на глутаминова киселина, у-карбоксиглутаминова киселина, част от факторите на кръвосъсирването: II, VII, IX, X.

    Инхибитори на коагулационните фактори:

    плазмения протеин антитромбин III, инактивирайки по-голямата част от факторите на кръвосъсирването;

    други протеини са протеиназни инхибитори (а-макроглобулин, антикопретин, тромбомодулин).

    хепарин, активиращ антитромбин III;

    антивитамините К - дикумарин, недикумарин и др.

    Метаболизъм на хемоглобина. Синтез на хемо, хемоглобин.

    В кръвта има пет основни протеинови фракции

    Плазмата от човешка кръв обикновено съдържа повече от 100 вида протеини. Приблизително 90% от общия протеин на кръвта са албумини, имуноглобулини, липопротеини, фибриноген, трансферин; други протеини присъстват в плазмата в малки количества.

    Синтезът на плазмените протеини се извършва чрез:

    • черен дроб - напълно синтезира фибриноген и кръвни албумини, повечето от а- и β-глобулините,
    • клетки на ретикулоендотелната система (RES) на мозък и лимфните възли на костни - част от β-глобулини и у-глобулин (имуноглобулин).

    Съществуват доста различни методи за разделяне на протеините в зависимост от техните определени качества. Най-честият метод за фракциониране на кръвните протеини е електрофорезата.

    Електрофореза на протеини

    Филм от целулозен ацетат, гел, специална хартия (носител) се поставя върху рамката, като противоположните краища на носача висят в кювети с буферен разтвор. Серумът на кръвта се прилага към началната линия. Методът се състои в движението на заредени протеинови молекули по повърхността на носителя под въздействието на електрическо поле. Молекулите с най-голям отрицателен заряд и най-малък размер, т.е. албумини, се движат по-бързо от другите. Най-големите и неутрални (γ-глобулини) са последните.

    В хода на мобилността на електрофореза засяга вещества, които се отделят, което е в зависимост от редица фактори: заряда на протеини, електрическо поле, съставът на разтворител (буфер смес) на, вида на носител (хартия, фолио, гел).

    Общ поглед върху електрофорезата

    Броят на фракциите се определя от условията на електрофорезата. При електрофореза включен хартия и филми от целулозен ацетат в клиничните диагностични лаборатории, 5 фракции (албумини, α1-, α2-, β- и γ-глобулини), докато в полиакриламид гел - до 20 или повече фракции. С използването на по-напреднали методи (радиална имунодифузия, имуноелектрофореза и др.), В състава на глобулиновите фракции се откриват множество отделни протеини.

    Електрофореграмата (по-горе) и графичния резултат от нейната обработка (отдолу)

    Само протеините, чиято концентрация е достатъчно висока, оказват влияние върху появата на протеинограмата.

    Протеинови фракции в серума

    Определяне на количествени и качествени промени в кръвното основен протеин фракция се използват за диагностициране и проследяване на лечението на остри и хронични възпаления на инфекциозни и неинфекциозен произход, както и рак (моноклонална гамопатия) и някои други заболявания.

    Руски синоними

    Синоними английски

    Електрофореза в серумен протеин (SPE, SPEP).

    Метод на изследване

    Електрофореза върху агарозни гел плочи.

    Мерни единици

    G / L (грама на литър),% (процент).

    Какъв биоматериал може да се използва за изследване?

    Как да се подготвим правилно за проучването?

    1. Не яжте 12 часа преди теста.
    2. Изключете физическото и емоционалното претоварване и не пушете в продължение на 30 минути преди даряването на кръв.

    Обща информация за проучването

    Общият протеин на кръвния серум включва албумин и глобулини, които обикновено са в определено качествено и количествено съотношение. Тя може да бъде оценена с помощта на няколко лабораторни методи. Електрофореза на протеини в агарозен гел - метод за разделяне на протеинови молекули, въз основа на техните различни скорости на движение в електрическото поле в зависимост от размера, заряда и форма. Когато общият протеин на серума е разделен, могат да бъдат идентифицирани пет основни фракции. Когато се извършва електрофореза, протеиновите фракции се определят под формата на ивици с различни ширини с характерно гел място, специфично за всеки тип протеин. Интензитетът на лентите се определя така, че да определя фракцията на всяка фракция в общото количество протеин. Така например, основната протеинова фракция на серума е албумин. Той представлява около 2/3 от общия протеин на кръвта. Албуминът отговаря на най-интензивната зона, получена чрез електрофореза на здрави човешки серумни белтъци. Други фракции серум, откриваем чрез метода на електрофореза включват: алфа 1 (главно алфа-1 антитрипсин), алфа-2 (алфа-2-макроглобулин и хаптоглобин), бета (трансферин и С3 компонент на комплемента) и гама- глобулини (имуноглобулини). Различни остри и хронични възпалителни процеси и туморни заболявания са придружени от промяна в нормалното съотношение на протеинови фракции. Липсата на каквато и да е лента може да покаже протеинов дефицит, който се наблюдава при имунодефицит или липса на алфа-1-антитрипсин. Излишъкът от всеки протеин се придружава от повишаване на интензитета на съответната лента, което най-често се наблюдава при различни гама патологии. Резултатът от електрофоретичното отделяне на протеините може да бъде представен графично, като всяка фракция се характеризира със специфична височина, отразяваща нейния дял в общия серумен протеин. Патологичното увеличение на фракцията на фракцията се нарича "пик", например "M-пик" с множествена миелома.

    Проучването на протеиновите фракции играе специална роля в диагностиката на моноклоналните гамапатии. Тази група заболявания включва множествена миелома, моноклонална гамопатия с неизвестен произход, Waldenstrom макроглобулинемия и някои други състояния. Тези заболявания се характеризират с клонална пролиферация на В-лимфоцити или плазмени клетки, при които се наблюдава неконтролирано продуциране на един тип (един идиотип) имуноглобулини. При отделянето на суроватъчен протеин при пациенти с моноклонална гамопатия от електрофореза характерни промени наблюдава - появата на интензивно тясна лента в глобулин зона гама който се нарича връх М до, или М протеин. връх М може да отразява всяко хиперпродукция на имуноглобулин (IgG като множествен миелом и макроглобулинемия на Waldenstrom с IgM и IgA с моноклонална гамопатия с неизвестен произход). Важно е да се отбележи, че методът на електрофореза в агарозен гел не позволява различаване на различните класове имуноглобулини помежду им. За тази цел се използва имунна електрофореза. В допълнение, това проучване позволява приблизителна оценка на количеството патологичен имуноглобулин. Във връзка с това проучване не е показано за диференциалната диагноза на множествена миелома и-венамоноклоналнагамопатия с неизвестен произход, тъй като изисква по-точно измерване на количеството на М протеин. От друга страна, ако диагноза "множествен миелом" се проверява чрез електрофореза в агарозен гел метод може да се използва за оценка на динамиката на М белтъка в лечението на контрол. Трябва да се отбележи, че при 10% от пациентите с множествена миелома няма отклонения в протеинограмата. По този начин нормалната протеинограма, получена чрез електрофореза с агарозен гел, не напълно елиминира това заболяване.

    Друг пример за гамапатия, открит чрез електрофореза, е неговият поликлонален сорт. Характеризира се с хиперпродукция на различни видове (различни идиотипи) на имуноглобулини, което се дефинира като хомогенно увеличаване на интензивността на гама-глобулиновата ивица в отсъствието на пикове. Поликлонална гамопатия се наблюдава при много хронични възпалителни заболявания (инфекциозни и автоимунни), както и в патологията на черния дроб (вирусен хепатит).

    Изследването на белтъчните фракции на кръвния серум се използва за диагностициране на различни синдроми на имунната недостатъчност. Пример за това е агамаглобулинемията на Bruton, при която концентрацията на всички класове имуноглобулини намалява. Електрофорезата на серумните протеини на пациент с болест на Bruton се характеризира с отсъствието или изключително ниската интензивност на гама-глобулиновата ивица. Ниската интензивност на алфа-1-лента е характерен диагностичен признак на дефицит на алфа-1-антитрипсин.

    Широка гама от състояния, при които се наблюдават качествени и количествени промени в протеинограмата, включват различни заболявания (от хронична сърдечна недостатъчност до вирусен хепатит). Въпреки наличието на някои от типичен отклонения proteinogram на, което позволява в някои случаи с известна увереност за диагностициране на болестта, обикновено в резултат на електрофореза на серумните протеини не може да служи като критерий за недвусмислено диагноза. Следователно интерпретацията на изследването на протеиновите фракции на кръвта се извършва, като се вземат предвид допълнителните клинични, лабораторни и инструментални данни.

    За какво се използва изследването?

    • За да се оцени качествено и количествено съотношение на основния протеин фракция при пациенти с остри и хронични инфекциозни заболявания, автоимунни състояния и някои чернодробни заболявания (хроничен вирусен хепатит) и бъбрек (нефротичен синдром).
    • За диагностика и контрол на лечението на моноклонална гамапатия (мултиплен миелом и моноклонална гамапатия с неизвестен произход).
    • За диагностициране на синдроми на имунна недостатъчност (агумаглобулинемия на Bruton).

    Кога е възложено изследването?

    • При изследване на пациент с остри или хронични инфекциозни заболявания, автоимунни заболявания и някои чернодробни заболявания (хроничен вирусен хепатит) и бъбреци (нефротичен синдром).
    • С симптомите на множествен миелом: патологични фрактури или болка в костите, немотивирана слабост, персистираща треска, повтарящи се инфекциозни заболявания.
    • С аномалии в други лабораторни тестове, които позволяват да се подозира мултиплен миелом: хиперкалцемия, хипоалбуминемия, левкопения и анемия.
    • Ако подозирате, че има дефицит на алфа-1-антитрипсин, болестта на Брутон и други имунодефицити.

    Електрофореза на кръвните протеини

    Електрофореза на протеини - тип кръвен тест за оценка на връзката между различните кръвни протеини и за идентифициране на парапротеин.

    Синоними: серумна протеинова електрофореза, протеин ELP, SPE, SPEP.

    Електрофорезата на кръвните протеини е -

    изследване на количествените и качествените характеристики на кръвните протеини чрез тяхното разпределение в електрическо поле.

    От протеините се изграждат всички клетки на тялото. Протеинът е сложна молекула, съставена от по-прости "тухли" - аминокиселини. Напълно, всички протеини в кръвта се наричат ​​"общ протеин", а от своя страна се състоят от компоненти - албумини, глобулини.

    Протеините могат да носят положителен или отрицателен заряд в зависимост от киселинността на средата, в която се извършва електрофорезата. Движението на протеините зависи от размера на заряда, формата и размера на молекулата, нейното тегло и свойствата на средата.

    Положително заредените протеинови молекули се адсорбират по-добре от отрицателно заредените, поради което се използват отрицателни заряди за протеиновата електрофореза. Албуминът носи най-голямото отрицателно зареждане, така че се движи по-бързо към анода.

    Носители за електрофореза

    • хроматографска хартия
    • целулозен ацетат
    • агаров гел
    • акрилен гел
    • полиакрилов гел
    • капилярна електрофореза

    Кръвните протеини се разделят чрез електрофореза върху фракции 5-6 - албумин, алфа-1, алфа-2, бета и гама глобулин (понякога бета-1 и бета-2-глобулини).

    свидетелство

    • диагностика на моноклонални гамапатии (мултиплен миелом)!
    • повишен общ кръвен протеин
    • повишено ниво на гама глобулини
    • много висок честотен дебит - повече от 50 мм / час (когато няма друга причина за растежа му)
    • диагностика и мониториране на моноклоналната гамопатия (миелома)

    Единствената директна индикация за електрофореза на кръвните протеини е откриването на моноклонална гамапатия. Днес лекарят може да предпише анализ на конкретен кръвен протеин, който представлява интерес, а не електрофореза, която дава само индикативни резултати.

    Моноклонална гамопатия

    Моноклонална гамопатия - появата в кръвта на хомогенен клон на имуноглобулини - парапротеини, синтезирани от един клонинг клетки

    • мултиплен миелом
    • асимптоматичен миелом
    • моноклонална гамопатия с неизвестна етиология (MGUS)
    • плазмоцитом
    • първична AL амилоидоза

    С миелома значително количество от "грешния" протеин, парапротеин или протеин М се появява в кръвта. Този "моноклонален протеин", тъй като се синтезира само в клетки от единичен злокачествен клон на В-лимфоцити, е едно и също и е много ясно видим на кривата на протеиновата електрофореза. Количеството парапротеин (потъмняване, скок) показва наличието на миелом, позволява да се оцени неговият размер, прогресията и промените в концентрацията - ранен симптом на обостряне или ремисия.

    симптоми

    • болка в костите - особено гръбнака и таза
    • силно главоболие
    • промени в общия анализ на урина - протеинеутрий
    • изразена обща слабост, умора
    • често инфекциозни заболявания

    норма

    Името на протеиновата фракция

    Абсолютни стойности, g / l

    Не забравяйте, че всяка лаборатория или по-точно лабораторно оборудване и реагенти има свои собствени норми. Под формата на лабораторно изследване, те отиват в графиката - референтните стойности или нормата.

    Допълнителни изследвания

    • общ кръвен тест
    • обща урина
    • чернодробни тестове - билирубин, AST, ALT, GGT, алкална фосфатаза
    • бъбречни тестове - креатинин, урея, пикочна киселина
    • общо кръвен протеин, албумин, глобулини
    • имуновъзпроизвеждане на серумни протеини
    • моноклонални имуноглобулини
    • поликлонални имуноглобулини
    • свободни леки вериги в кръвта
    • бета2 микроглобулин
    • албумин в урината
    • електрофореза на белтъчните протеини
    • имуновъзстановяване на протеините в урината
    • разхлабени леки вериги в урината

    Какво влияе върху резултата?

    • повишено ниво на билирубин
    • хемолиза - унищожаване на червените кръвни клетки

    Протеинови фракции върху електрофоретичната крива

    1. преалбумин (Транстиретин) - чернодробно протеин се намира в предната част на албумин с кратък полуживот, се свързва тиреоиден хормон транспорт протеини за витамин А (предотвратява загуба на урина). Брой преалбумин за оценка протеини сигурност периферните тъкани. Намален с чернодробни заболявания и хранителни недостатъци.

    2. албумин - най-голямата част от кръвните протеини, пикът е ясно видим. Причините за намаляване на албумина са описани подробно в тази статия. Рядко с вродена мутация съществува дисалбуминемия - фракцията от албумин.

    3. Алфа-1-липопротеини - слаба равномерно оцветена област между албумин и алфа-1-глобулин.

    4. Размерът на зоната алфа-1-глобулин се определят от нивото на алфа-1-антитрипсин, орозомукоид, алфа-1-фетопротеин, алфа-1-микроглобулин. При остро възпаление, видимо потъмняване.

    • алфа-1-антитрипсин - генетичната вариабилност може да се прояви чрез промени в протеиновото движение, чернодробна цироза, повишени чернодробни тестове, при бременност - намаление
    • алфа-1-фетопротеин - маркер на чернодробни тумори и вродена патология при пренатална диагностика
    • с намаляване на скоростта на гломерулна филтрация - увеличение на кръвната алфа-1-микроглобулин

    5. Алфа-2-глобулин - образуването на тази зона е повлияно от алфа-2-макроглобулин, церулоплазмин, хаптоглобин, пре-бета-липопротеин. Промените нямат клинично значение.

    6. Интерзона между алфа-2 и гама глобулини - леко оцветени, хемолизата създава комплекси на хемоглобин-хаптоглобин, образувайки в тази зона видима ивица.

    7. Бета-1 глобулини - размерът на затъмняването се определя от количеството трансферин, фибриноген, С-реактивен протеин, хемопексин. Интензитетът корелира с общия капацитет на свързване на кръвния серум с желязо. При анемия с недостиг на желязо и бременност, синтеза на трансферин се увеличава и контрастът на зоната се увеличава

    8. Интерзона между бета-1 и бета-2-глобулините се образува от имуноглобулин А (IgA). Типичната лента образува бета-липопротеин.

    9. Бета-2-глобулини - образува C4 компонент на комплемента, увеличава - острото възпаление, намалява - образуването на имунокомплекси при автоимунни заболявания.

    Допълнение - 11 протеини, фактори на неспецифичен хуморален имунитет.

    • бета2 микроглобулин - част от системата HLA на повърхността на клетките, показва степента на клетъчно деление, увеличаването на кръвта - намаляването на скоростта на филтриране в бъбреците, лимфопролиферативните заболявания
    • фибриноген - протеин коагулация, се намира между бета и гама глобулини, увеличена в остро възпаление, намалена в тежка чернодробна недостатъчност, дисеминирана интраваскуларна коагулация

    10. Гама глобулини - характеристиките на зоната се определят от свойствата на класовете имуноглобулин G (IgG). Имуноглобулин М (IgM) се намира по-близо до началото.

    Моноклонални имуноглобулини - се откриват само в присъствието на заболяване, продукт на единичен клон от клетки от В-лимфоцити. С възрастта, откриването на парапротеин се увеличава, доброкачествената хиперимуноглобулинемия се появява без никакви симптоми.

    Протеинови фракции

    Синоними: Протеинови фракции, протеинограми, електрофореза в серумен протеин, SPE

    Един от основните компоненти на кръвта е протеин, който се състои от фракции (албумин и няколко вида глобулини), формиращи определена формула за количествена и структурна връзка. При възпалителни (остри и хронични) процеси, както и при патологични ракови заболявания, протеиновата фракционна формула е нарушена, което позволява да се оцени физиологичното състояние на организма и да се диагностицират редица сериозни заболявания.

    Обща информация

    Под влияние на електрическо поле (на практика се използва електрофореза), протеинът се разделя на 5-6 фракции, които се различават по местоположение, подвижност, структура и фракция в общата маса на протеините. Най-важната фракция (албумин) е повече от 40-60% от общия протеинов обем на кръвния серум.

    Другите фракции са глобулини:

    Те включват протеини с остра фаза (бърза реакция):

    • антитрипсинът промотира фибрилогенезата (процес на образуване на съединителната тъкан);
    • липопротеините са отговорни за доставянето на липиди до други клетки;
    • транспортните протеини се свързват и преместват важни телесни хормони (кортизол, тироксин).

    Също така включват протеини с остра фаза:

    • Макроглобулинът активира защитните сили на организма при инфекциозни и възпалителни лезии;
    • Хаптоглобинът се комбинира с хемоглобин;
    • церулоплазмин определя и свързва медните йони, неутрализира свободните радикали и е окисляващ ензим за витамин С, адреналин;
    • липопротеините осигуряват движението на мазнините.

    Тази група включва протеини:

    • трансферин (осигурява движението на желязо);
    • хемопексин (предотвратява загубата на желязо);
    • комплемент (участва в имунния отговор);
    • бета-липопротеини (преместване на фосфолипиди и холестерол);
    • някои имуноглобулини (също осигуряват имунен отговор).

    Фракцията включва най-важните протеини от имуноглобулини от различни класове (IgA, IgM, IgE, IgG), които са антитела и са отговорни за локалния имунитет на организма.

    В резултат на развитието на остро или екзацербация на хронични възпалителни заболявания съотношението на протеиновите фракции варира. Намаляването на количеството на определен вид протеин може да се наблюдава при имунодефицити, които показват сериозни процеси в тялото (автоимунни заболявания, ХИВ, онкология и др.). Излишъкът често е показателен за моноклонална гамапатия (продукция на ненормални видове имуноглобулини). Последиците от гамопатията включват множествена миелома (рак на плазмените клетки), Waldenstrom макроглобулинемия (тумор на костен мозък) и др. Може да възникне и поликлонална гамопатия (секреция на ненормални количества имуноглобулини). Резултатът е инфекциозни заболявания, автоимунни патологии, чернодробни заболявания (напр. Вирусен хепатит) и други хронични процеси.

    свидетелство

    Проучването на протеинови фракции позволява диагностициране на синдрома на имунната недостатъчност, онкологичните и автоимунните процеси.

    Също така, лекарят може да предпише протеинограма в следните случаи:

    • оценка на тежестта на възпалителни или инфекциозни процеси (в остра и хронична форма);
    • Диагностика на чернодробни заболявания (хепатит) и бъбреци (нефротичен синдром);
    • определяне на продължителността на заболяването, форми (остри, хронични), етапи, както и наблюдение на ефективността на терапията;
    • диагностика на моно- и поликлонални гамапати;
    • Диагностика и лечение на дифузни лезии на съединителната тъкан, включително колагенози (нейното системно разрушаване);
    • Наблюдение на пациенти с нарушен метаболизъм, диета;
    • Мониторинг на пациенти със синдром на малабсорбция (лошо храносмилане и абсорбция на хранителните компоненти);
    • подозрение за множествен миелом, характеризиращ се със симптоми: хронична слабост, висока температура, чести фрактури и дислокации, болки в костите, инфекциозни процеси в хронична форма.

    Проучването на протеиновите фракции в кръвта (протеинограма) разкрива концентрацията на общия протеин, количественото съотношение на албумини и глобулини.