ELISA за сифилис: техника за анализиране, дешифриране, причините за фалшиви положителни резултати

Захранване

Списъкът на стандартните диагностични мерки, използвани за инфекциозни заболявания, включва ензимен имуноанализ. Ако IFA за сифилис е положителен, не се паникьосвайте веднага.

Нека разгледаме по-подробно характеристиките на тази изследователска методология и принципите на дешифриране на резултатите, получени при различните категории пациенти.

Същността на изследването

Имуноензиматичният анализ е един от най-разпространените методи за диагностициране на инфекциозни заболявания. Тя принадлежи към категорията на тепонемалните тестове, т.е. с негова помощ е възможно да се установи присъствието в тялото на пациента на причинителя на сифилис - бледо трепонема.

Чрез метода на ELISA, сифилисът се открива чрез откриване на антитела към трепонема. Те се съдържат в кръвта на пациента, а техният вид и количество зависят от етапа и формата на заболяването, което позволява получаване на важна информация за настоящото състояние на човешкото здраве.

Този метод се използва и за диагностициране на други венерически и инфекциозни заболявания, по-специално на автоимунни, паразитни, системни и т.н.

Предимства и недостатъци

ELISA често се предписва за съмнение за сифилис или други инфекциозни заболявания. Това се дължи на факта, че анализът може да се идентифицира точната вида и стадия на заболяването, и надеждността му се поддържа високо ниво - вероятността за грешка за резултатите от няколко проучвания е само 1%, първичната IFA има точност от около 90%.

Използването на качествени реагенти и модерно оборудване позволява да се постигне максимална точност на индикаторите.

Като цяло предимствата на метода са:

  1. Висока точност на резултата. Вероятността за получаване на неверни данни е много малка.
  2. Намаляване на човешкия фактор на влияние. Съвременното оборудване за извършване на ELISA изключва влиянието на дадено лице върху резултатите от изследването поради автоматизирането на процеса.
  3. Идентифициране на специфични антитела. Заблуждаването на антигени от един вид с други е невъзможно, поради което анализът показва точния резултат за конкретна диагноза.
  4. Определяне на най-малките отклонения от нормата. Дори и най-незначителната концентрация на патологични агенти няма да остане без внимание.

Не забравяйте слабите страни на този метод. IFA има следните недостатъци:

  1. Високата цена. Високата цена се дължи на много фактори, по-специално на необходимостта от добро оборудване, качествени реактиви и специалисти с достатъчно ниво на обучение.
  2. Необходимостта от предварителна диагноза. Необходимо е да се знае кои антигени да се търсят, тъй като без допълнителни данни е невъзможно да се направи точна диагноза.
  3. Вероятност от фалшив положителен резултат. Някои състояния на тялото и други фактори могат да изкривят окончателните данни.

Индикации за провеждане

Лекарят може да предпише ензимен имуноанализ за диагностициране не само на сифилис, но и на редица други инфекциозни заболявания.

Ако разгледаме ситуацията директно с инфекция от трепонема, причината за изследването може да бъде:

  • появата на външни симптоми на заболяването (канкре, сифилитичен обрив, дъвка и др.);
  • значително намаляване на имунитета;
  • откриването или подозрението за сифилис в сексуалния партньор, роднини и членове на семейството;
  • положителна реакция при други тестове;
  • идентифициране на други заболявания, които могат да бъдат свързани със сифилис;
  • личното желание на лице да бъде разгледано.

Методи на провеждане

ELISA може да се извърши по различни начини. Във всеки конкретен случай се избира най-подходящият вариант.

На първо място, има разделение на методите на:

  1. Качествена. Има инфекция или вирус в тялото на пациента.
  2. Количествен. Той определя концентрацията на антитела срещу патогенния агент в човешкото тяло, което показва степента и интензивността на заболяването.

Също така има класификация на методите за ELISA съгласно принципа на възпроизвеждане на необходимата реакция.

Има 3 опции:

  1. направо. Маркирани антитела се въвеждат в доставените кръвни проби.
  2. Непряко с антигени. Преди това, сорбираните антигени се поставят в полистиренови плаки за ELISA. След това към тях се прибавят антитела от вируси, което провокира образуването на имунни комплекси, необходими за по-нататъшна оценка на резултатите.
  3. Непряко с антитела. За венерически болести този метод често се използва. Той включва предварителната сорбция на антитела, само тогава към плаката се прибавят антигени.

Правила за приемане на материали

За да се намалят рисковете от получаване на ненадеждни резултати, е необходимо правилно да се достави кръв за анализ.

Преди да преминат ELISA, трябва да спазвате някои ограничения:

  • избягвайте интензивен физически и емоционален стрес;
  • да се въздържат от пушене и пиене на алкохол в продължение на поне 1 до 3 дни;
  • за няколко дни трябва да преминете към правилното хранене;
  • жените се съветват да контролират фазата на менструалния цикъл, тъй като хормоните могат да изкривят резултатите;
  • последното хранене трябва да бъде 8-10 часа преди даряването на кръвта;
  • В продължение на 10 дни се изключва медикамента, което може да повлияе върху резултатите от проучването.

За IFA се приема венозна кръв от улнната вена, тя трябва да се приема сутрин на празен стомах. Като цяло се прилагат стандартните правила за подготовка за събиране на венозна кръв. В зависимост от наличието на която болест се тества, могат да бъдат въведени допълнителни изисквания за предварителната подготовка на пациента.

Метод на провеждане

Инструкциите за извършване на ELISA са съвсем прости:

  1. Пациентът взема кръв от вената.
  2. Полученият материал се приготвя и се разделя на проби на специална палета с фини окото.
  3. Антигените се смесват с антитела съгласно избрания метод.
  4. Реакцията се оценява. Пробите се сравняват с контролни проби и се извършва качествена и количествена оценка на резултатите.
  5. Данните се записват в специална таблица с прилагане на количествени показатели (общо антитела).
  6. Лекуващият лекар дешифрира резултатите. При необходимост се предписва подходящо лечение.

След извършване на изследвания на пациента е даден документ с резултати. Тя е под формата на таблица с подходящите обозначения срещу всеки тип имуноглобулин в пресечната точка с имената на инфекциозни заболявания.

препис

Само специалистът може интелигентно да дешифрира резултатите от тестовете. Независимо трудно да се разбере, например, това означава, че в резултат на ELISA к = 1 4. сифилис също могат да се появят по различни начини, което също се отразява на окончателните данни.

Резултатите показват 3 вида имуноглобулини:

  1. IgM. Оставя се да се определи срокът на заразяване със сифилис. Положителният резултат показва изостряне на заболяването. Тяхното отсъствие може да показва опрощение на хронични патологии или латентна форма на заболяването.
  2. IgA. Показва болестта от момента на инфекцията, която е преминала повече от месец. Това също е знак за остра фаза на заболяването, както при нормални патологии, така и при пренебрегвани хронични заболявания.
  3. IgG. Това е знак за пиковия период на заболяването, тоест за влошаването му. При сифилис се появява положителна реакция известно време след лечението. При някои видове заболявания може да бъде признак на развит имунитет.

Тези вещества се произвеждат от тялото в определена последователност, което е допълнителен признак на болестта. С качествени тестове се установява само наличието на имуноглобулини в кръвта на всеки тип.

Това се отразява в промяната на цвета на материалите, включени в анализа. Количествените индикатори са помощни, те по-точно описват ситуацията. Съотношението на антигени и антитела показва тежестта на заболяването и интензивността на реакцията на тялото.

Какво да направя

Ако пациентът има сифилис, винаги се открива положителен ELISA и не е възможно да се забележи наличието на treponemes в такова проучване. Не се отчайвайте, болестта е лесна за лечение, особено в началните етапи.

Какво трябва да направите с положителните резултати от теста:

  • според теста на лекаря, да вземете допълнителни тестове;
  • да премине курса на антибиотична терапия според избраната схема;
  • директни усилия за укрепване на имунитета;
  • съобщавайте за болестта на сексуалния си партньор;
  • в бъдеще редовно преминават превантивна диагностика до отстраняване от регистъра в диспансера (след 5 години при липса на положителни резултати от теста).

Не е необходимо да се отлага кърменето в болния списък и да се страхувате да публикувате резултатите. Диагноза е криптирана и остава в тайна, но заплахата от заразяване на други хора да се информират близките за проблема и сексуалния партньор, че те са преминали задължителните изпити.

Фалшив положителен резултат и причините за него

Понякога резултатът от други тестове и IFA е фалшиво положителен за сифилис. Ето защо се препоръчва да се извършват 2 - 3 допълнителни методи и след известно време да се повтори ензимния имуноанализ.

Такива неточности са редки, те се дължат основно на такива фактори:

  • бременност;
  • хронични заболявания;
  • скорошна ваксинация;
  • нараняване.

Фалшивите положителни резултати са разделени на остри и хронични, в зависимост от естеството на фактора, който ги провокира.

ELISA-диагностика: каква е същността, дефиницията на антителата, как да се провеждат и в какви заболявания е ефективна?

ELISA (ELISA - English) влезе в живота на практическата медицина още някъде през 60-те години на миналия век. Първоначалната му задача е хистологично изследване за научни цели, което се равнява на търсенето и идентифицирането на антигенната структура на клетките на живия организъм.

Методът ELISA се основава на взаимодействието на специфични антитела (АТ) и свързани антигени (АХ) с образуването на комплекс "антиген-антитяло", който се открива посредством ензим. Този факт доведе учени до идеята, че методът може да се използва за диагностични цели, за да се идентифицират специфични имуноглобулини от различни класове, участващи в имунния отговор към конкретна инфекция. И това беше пробив в клиничната лабораторна диагностика!

Методът е използван активно едва в началото на 80-те години, а предимно в специализирани институции. Първите immunoenzyme анализаторите бяха оборудвани центрове и преливане станция кръв, инфекциозни и венерически болници, като роден на африканския континент, който се появи на хоризонта тук и там и след това да се присъедини към "старите" инфекции страхотен СПИН изискват незабавни диагностични мерки и да се потърси медицинска препарати, които влияят него.

Обхватът на метода ELISA

Възможностите на ензимния имуноанализ са наистина големи. Сега е трудно да си представим как може да се направи без такива изследвания, които се прилагат буквално във всички области на медицината. Изглежда, какво може да прави IFA в онкологията? Оказва се, може би. И много. Способността да се анализира откриването на маркери, характерни за някои видове злокачествени неоплазми, е в основата на ранното откриване на тумора, когато по друг начин все още не е определена поради малкия му размер.

Modern клинична лабораторна диагностика (CDL), с изключение на туморни маркери, значителна панели масив за ELISA и ги използва за диагностициране на различни патологични състояния (инфекциозни процеси, хормонални нарушения) и мониторинг фармацевтични терапевтични средства за определяне на техните ефекти върху тялото на пациента и, между другото, не само човек. В момента имуносорбентен метод се използва широко в ветеринарните служби, защото "нашите по-малки братя" също са обект на много заболявания, от които от време на време, много страдание.

По този начин, ELISA, поради своята чувствителност и специфичност, следвайки модела на кръвта, взети от вената, може да определи:

  • Хормонален статус (хормони на щитовидната жлеза и надбъбречните жлези, полови хормони);
  • Наличието на вирусни и бактериални инфекции (HIV, хепатит В и С, хламидия, сифилис, urea- и микоплазмоза, херпес и факел-инфекция и много други заболявания, причинени от патогенни микроорганизми);
  • Следи от жизненоважна активност на микроорганизмите, които причиняват инфекциозен процес, който завършва щастливо и преминава на етапа на образуване на имунен отговор на този патоген. Такива следи, т.е., антитела, в много случаи остават в кръвта за цял живот, отколкото да предпазват човека от повторна инфекция.

Каква е същността на ELISA?

Имуноензимен метод позволява да се определи не само наличието на самия патоген (качествен анализ), но и количественото му съдържание в кръвния серум на пациента.

Вирусната или бактериалната доза оказва значително влияние върху хода на инфекциозния процес и неговия резултат, поради което количественият анализ не е последната роля при диагностицирането и лечението на заболявания в различни форми и етапи.

Обаче, познавайки ензимния имуноанализ като метод ELISA, ние дори не мислим как може да достигне толкова широка гама от микроорганизми, обитаващи нашата планета, много от които носят пряка заплаха за здравето и живота на хората и животните. И въпросът е, че IFA има много варианти (неконкурентни и конкурентни - преки и непреки), всеки от които решава задачата и по този начин позволява да се харчи целенасочено търсене.

За идентифициране на имуноглобулини от всякакъв клас използва конвенционален полистирен панел 96-(таблетка), където ямките се концентрира в твърда фаза адсорбира рекомбинантен протеин. Капан в добре със серумни антитела или антигени на кръвни са "познат" обект, и образува с него комплекс (AG - AT), че с фиксирана ензим конюгат, при четене резултати явна промяна на цвета в ямките.

Имуноензиматичният анализ се извършва на тестови системи със специфична специфичност, произведени в специални лаборатории и оборудвани с всички необходими реактивни компоненти. Изследвания може да се извърши с помощта на шайбите ( "перални") и спектрофотометри за четене, където голяма част от ръчния труд, участващи. На пълен автоматичен, освобождавайки лаборатория от сивото инстилацията, измиване и други рутинни въпроси, разбира се, по-бързо и по-удобни, но не всички лаборатории могат да си позволят такъв лукс и продължават да работят по старомодния начин - на полу-автоматични машини.

Тълкуването на резултатите от ELISA е в компетенцията на лаборатория за лабораторна диагностика и е необходимо да се вземе предвид присъщото свойство на почти всички имунохимични реакции, за да се дадат фалшиво положителни или фалшивоотрицателни отговори.

Видео: модерно представяне на ензимния имуноанализ

Резултати от ELISA, използвайки примера за сифилис

Имуноензимен анализ е подходящ за откриване на всички форми на сифилис, и освен това се използва при провеждане на скринингови проучвания. За извършване на анализа се използва венозна кръв на пациента, приета на празен стомах. Работата използва таблетки със специфична специфичност (AT от класове A, M, G) или общо антитела.

Като се има предвид, че сифилис антитела, продуцирани в определена последователност, ELISA може лесно да отговори на въпроса, при възникване на инфекцията и в какъв етап е процес, и декодирането на резултатите могат да бъдат представени, както следва:

  • IgM показва продължителността на инфекциозния процес (може да възникне при обостряне на хронични възпалителни заболявания);
  • IgA заявява, че инфекцията е станала преди повече от месец;
  • IgG показват, че инфекцията е в разгара си или за скорошно лечение, което е лесно забележимо при събиране на анамнеза.

Анализът за сифилис, ямките с отрицателна реакция (и отрицателни контроли) остават безцветни, докато с положителен (като положителна контрола) дава светло жълт цвят се дължи на промяната на цвета на хромогена добавя по време на проучването. Интензитетът на цвета обаче не винаги съвпада с контрола, т.е. той може да бъде леко бледо или леко жълтеникав. Това е съмнителни резултати, които обикновено са предмет на повтаряща разследване на задължителни количествени мерки получени на спектрометър, но като цяло, цветът е пряко пропорционална на количеството на имунни комплекси (взаимосвързани и AG AT).

Най-вълнуващият имуноанализ е ELISA за HIV

Тестът за ХИВ е може би най-интересният за широк кръг от хора, тъй като все още не е възможно да се твърди със сигурност, че са изчезнали много социални проблеми (проституция, наркомания и т.н.). За съжаление, ХИВ засяга не само тези слоеве на човешкото общество, може да се заразите при различни обстоятелства, които не са свързани със сексуална неодобрение или употреба на наркотици. Но ако има нужда от тест за ХИВ, тогава не трябва да се страхувате, че всички около вас ще разберат за посещение в такава лаборатория. Сега хората, заразени с ХИВ, са защитени от закона и обвиняемите могат да се обърнат към анонимни служби, където могат да решат проблема без страх от публичност и убеждение.

Имуноензиматичният метод, използван за диагностициране на HIV инфекцията, е една от най-важните стандартни проучвания, които обаче изискват специални условия, тъй като темата е много деликатна.

ELISA за ХИВ е целесъобразно да се похарчи след сексуален контакт, кръвопреливане, други медицински манипулации, и в края на инкубационния период ("серонегативния прозорец"), но трябва да се има предвид, че този времеви интервал не е постоянен. Тя може да приключи за 14-30 дни и може да продължи до шест месеца, така че средната стойност се счита за интервал от 45 до 90 дни. За ХИВ кръвта се дава по същия начин, както при други инфекции - от вените до празен стомах. Резултатите ще бъдат готови в зависимост от натрупването на материал в лабораторията и нейното натоварване (от 2 до 10 дни), въпреки че най-често лабораториите дават отговор на същия ден или следващ ден.

Какво можете да очаквате от резултатите за ХИВ?

ELISA за HIV инфекция се определя от антитела срещу два вида вируси: HIV-1 (по-често срещани в Русия и други страни в Европа и Азия) и HIV-2 (по-често срещани в Западна Африка).

ELISA HIV предизвикателство е да се намери AT клас G, които са разкрити във всички тестови системи, но в по-късен период и в класове А и М, разкрива ново поколение рекомбинантни теста позволява да намерите антитела в най-ранните етапи на (период на инкубиране - "Серонегативен прозорец"). От ELISA можете да очаквате следните отговори:

  1. Първичен положителен резултат: кръвта се преглежда повторно на тестова система от същия тип, но евентуално друга серия и от друго лице (лаборантен асистент);
  2. Повторението (+) включва ново вземане на кръв в пациент с изследване като първичен анализ;
  3. Друг положителен резултат е предмет на референтен анализ, при който се използват много специфични тестови комплекти (2-3 броя);
  4. Положителен резултат в двете (или в три) системи се изпраща до имуноблотинг (същата ELISA, но се провежда индивидуално за тестовите комплекти с особено висока специфичност).

Заключението за ХИВ инфекцията се прави само на базата на имуноблотинг. Разговаряме с инфектирания човек в пълна конфиденциалност. Разкриването на медицинските тайни в Русия, както всъщност и в други страни, е обект на наказателно наказание.

ОВОС открива хламидии, цитомегаловируси и дори паразити

Анализите за метода на хламидията и цитомегаловирусния имуноанализ също са придобили специална популярност, предвид факта, че той позволява да се определи времето на инфекцията, стадия на заболяването и ефективността на терапевтичните мерки.

Когато въвеждате хламидия, можете също така да наблюдавате появата на антитела от различни класове в различни фази на патологично състояние, причинено от инфекциозен агент:

  • IgM може да се открие в рамките на седем дни след заразяването;
  • IgA предполага, че инфекцията в организма живее повече от месец;
  • IgG потвърждават диагностиката на хламидиите, помагат да се следи лечението и да се определи неговата ефективност. Трябва да се отбележи, че антителата от клас G остават и циркулират в тялото, независимо от преминаването на болестта, толкова правилен анализ на разшифроването трябва да вземе предвид референтните стойности (норми), които, между другото, за всеки CDL нея: като се има предвид степента на тестовата система и спецификата на реагенти, включени в комплекта. Стойностите на нормата съответстват на формата до резултата от ELISA.

Що се отнася до цитомегаловируса (CMV), тук е малко по-различно: антитела от клас М се появяват приблизително на месец-един и половина, т.е. положителен резултат (IgM +) става във фазата на първична инфекция или по време на реактивиране на латентна инфекция и остава от 4 месеца до 6 месеца.

Наличието на AT клас G е характерно за появата на първична остра инфекция или реинфекция. Анализът посочва, че вирусът се осъществява, но информацията, на какъв етап е инфекциозният процес, не е така. Междувременно, определянето на титър норма IgG също води до трудности, тъй като тя изцяло зависи от имунния статус на човека, което, обаче, е разположен откриване на имуноглобулинов клас G. С оглед на това поведение на антитела в диагностицирането на CMV инфекция е необходимо да се оцени способността на антителата да взаимодействат с клас G TSMV, след това да го "неутрализира" (AT avidity). В началния етап на болестта е много лошо IgG се свързват с антигените на вируса (ниска склонността) и едва след това започват да се проявяват активност и следователно можем да говорим за повишаване на готовността, антитела.

Алгоритъм на IFA-проучвания с подозрение за CMV

Какви са паразити - едва ли си струва да казвам, защото те се занимават с човек от детството и, в пълния смисъл на думата, отрова живота си (паразити отпадъчни продукти са силно токсични). Те са на внушителни размери (хелминти, и просто - червеи) или малък (амеба, Trichomonas, Giardia).

Преди появата на ензимния имуноанализ в клиничната лабораторна диагностика, сега е много трудно да се намерят паразити, тъй като те казват: "Няма проблем!". И всичко това, защото има ELISA, който ще открие паразит в каквато и да е форма (кисти, ларви, яйца или възрастни индивиди) и във всяка част на човешкото тяло не беше. За да направите това, трябва само да вземете кръв от вената и да намерите антитела, които тялото вече е реагирало на чуждите антигени.

Предимствата на ензимния имуноанализ може да се каже за дълго време и много, защото този метод успя да реши много диагностични проблеми, като използва само венозна кръв. Не са необходими дълги очаквания, притеснения и проблеми при вземането на материали за научни изследвания. Освен това тестовите системи за ELISA продължават да се подобряват и не е далеч от този ден, когато тестът ще даде 100% надеждност на резултата.

Анализ за сифилис ELISA - тълкуване на анализа. Норма и отклонения.

Когато се предписва анализ, дайте ELISA тест за сифилис. Методи на лабораторна диагностика. Резултатите от анализа - как да се определи скоростта и отклонението. Цената на ензимния имуноанализ.

В какви случаи е направен анализ за ELISA за сифилис

По правило, постоянно на адрес в амбулаторен отдел, лекарите предписват да предават различни анализи. Това им позволява да идентифицират инфекциите и болестите, които хората страдат. ELISA или така нареченият ензимен имуноанализ е чудесен начин за оценка на имунната система на организма и за идентифициране чрез наличие на антитела на инфекцията и на стадия на заболяването.

Като се има предвид, че голям брой паразити проникват в човешкото тяло, е желателно да се правят тестове и да се проверява всеки от тях, така че един ден да не получи положителен резултат за инфекцията.

Анализът позволява да се идентифицират вещества и паразити, които са антигенни за човешкото тяло и откриването на имуноглобини. Това не само прави възможно определянето на болестта, но и диагностицирането на етапа. Резултатите от анализа ELISA са дадени както количествено, така и качествено.

И така, кой е възложен да вземе този тест и какво е ензим-свързан имуносорбентен анализ? Лекарите написват този анализ, ако човек развие следните заболявания:

  • Обривът на тялото е алергична реакция.
  • Вируси - херпес, цитомегалавирус.
  • Полово предавани болести - сифилис, трихомонии.
  • Патология, свързана с рака.
  • Невросифилис.

В допълнение към тези заболявания, анализът е предназначен да определи нивото на хормона в кръвта. В резултат се оценява качеството на терапията. Какво е сифилис със сигурност знае всеки човек, но не представлява неговата степен и колко много хора са заразени, които ходят до нас.

В момента сифилисът е най-често срещаното заболяване. Това е treponem, който засяга човешкото тяло. И в резултат на това се засягат всички вътрешни органи на болните.

Проникването на паразити в тялото причинява инфекция на човек. Тази венерологична болест може да бъде заразена не само сексуално, но и по метода на домакинството, заслужава си да се помни и да се следват прости правила за превенция.

Това е много опасна инфекция и често се случва тя да не се показва дълго време. Следователно, човек може дълго време да бъде превозвач и дистрибутор, без да знае, че е болен.

Метод на лабораторна диагностика

Медицината не стои неподвижна, съвременните анализи се различават значително от старите методи за изследване на тялото. Макар че те изпълняваха перфектно ролята си, но понякога трябваше да чакат седмици и месеци. Това естествено не е благоприятно за заразеното лице. Какво е очакването на резултата беше болен човек.

Класическите тестове - откриването на сифилис по метода на Васерман, методът на Кан започва да заема позициите си и се заменя с тестове като ELISA.

Това е най-модерният метод за откриване на инфекция при хората. Резултатът се декриптира, като се използва компютър. Това ви позволява да определите по-точно положителния резултат или отрицателния анализ.

По време на транскрипцията се извършва търсене на антитела към специфични заболявания. И в резултат на анализа е възможно да се идентифицира инфекцията, когато резултатът е положителен. Използвайки ELISA за откриване на сифилис, се предполага тристепенно прилагане на имуноглобулини:

  • G, M, A - за диагнозата са най-важни.
  • Те се произвеждат в заразен човек стриктно в определена последователност.
  • Бързо определете етапа на инфекция.

Резултати EIA - норма и положителен анализ

Ако говори за анализа на ELISA за сифилис, тогава в този случай е трудно да се каже, че има норма или отклонение. Резултатът обикновено е отрицателен или положителен. В допълнение, има заглавия, които определят количеството антитела в кръвта.

Има много финес в дешифрирането на анализа, ако показа положителен резултат, анализът все пак ще трябва да бъде възстановен няколко пъти, за да се изключи методът за фалшиви положителни реакции.

Тъй като при декодирането на анализа имаше много тънкости, само резултантният лекар може да определи резултата. Нека да дадем примери в таблицата, които могат да бъдат показани за ензимния имуноанализ:

Ако на сифилис

Какъв е методът ELISA?

Имуноензиматичният анализ е основата за диагностицирането на много инфекции, не само венерически и сифилис. Този метод се основава на определянето на антитела в серума от кръвта на пациента, взети от вената.

Кръвта на всеки един от нас има специални структури на протеин природата - антитела, които са представени от различни класове.

Една от основните функции на антителата е свързване с антигени и образуването на определени комплекси, които трудно се разтварят. За производството на антитела са отговорни за кръвните клетки - лимфоцити.

Когато има наличие на инфекциозен агент от всякаква болест в човешката кръв, в отговор се произвеждат антитела, които чрез своите рецептори образуват контакт с ясно дефинираните антигени на този патоген.

Такъв комплекс се нарича комбинация от "антигени + антитела". И това е ELISA методът за сифилис, който позволява да се записват отделни комплекси от антитела и антигени чрез treponem със сифилис в присъствието на ензими и специални етикети в реагентите.

Определянето на такива ELISA комплекси по метода на инфекция със сифилис е възможно само с помощта на специални ензимни съединения, които са добавени към изследваното вещество.

Поради това, което този диагностичен метод се използва активно за определяне на отделните класове имуноглобулини, които се появяват на фона на определена инфекция.

В допълнение, с ензимния имуноанализ, не само присъствието, определя се качествената реакция, но и количественото, броят на титрите на антителата.

Такъв анализ на сифилис ви позволява да оцените състоянието след инфекцията и след лечението, за да наблюдавате динамиката на фона на получената терапия.

Специфичните серологични тестове се наричат ​​тепонемални тестове, тъй като тези тестове използват бледо тропонеми или техните антигени, които са антигени с трепенемален произход.

Целта на тепонемалните тестове е откриването на специфични антитела към антигенните структури на причинителя на сифилис, т.е. антитела, насочени специфично срещу самите бактерии Т.

Pallidum, а не срещу тъканите на тялото повредени treponemoy. Protivotreponemnye специфични антитела от клас IgM могат да бъдат открити в края на втората седмица на заболяване.

Навременното и качественото разпознаване на сифилитична инфекция понастоящем е свързано с широкото въвеждане на тестонемалните тестове.

Treponemal тестовете се използват само за диагностициране на сифилис и не се използват за мониториране на излекуването. Трепнемалните реакции при някои пациенти могат да останат положителни в продължение на много години след пълното лечение на сифилис.

Според клиничната специфика тестомемните тестове са сравними с тестовете без тепонема, при клинична чувствителност те са по-добри.

ELISA или ензимен имуноанализ се отнася до серологични тестове и е предназначен за откриване и диагностициране на патологични микроорганизми в кръвния серум.

Чрез анализа се определят различни класове имуноглобулини за бактериите: IgM - при остър патологичен процес и IgG на етапа на възстановяване, които в някои случаи се запазват през целия живот.

С помощта на имуноензимна диагностика се разкриват заболявания с различна етиология:

  • Вирусни. Вирусните хепатити, цитомегаловирус (CMV), херпес, морбили, заушка, варицела, Т-клетъчна левкемия, рубеола, грип, парагрипни, аденовируси, мононуклеоза.
  • Бактериален. Туберкулоза, бруцелоза, салмонелоза, дифтерия, Helicobacter Pylori инфекция, легионелоза, магарешка кашлица. Инфекции, причинени от стрептококи, стафилококи, пневмококи, менингококи, хемофилус инфлуенца - менингит, пневмония, възпаление на сливиците, скарлатина, ревматизъм, сепсис, абсцеси, пиелонефрит, хранително отравяне, и урогениталния тракт: хламидии, микоплазма, Ureaplasma, гонорея.
  • Инфекции, причинени от протозои. Амебиазис, токсоплазмоза, криптоспоридиоза.
  • Паразитни. Ехинококоза, токсокариаза, пневмоцитис.
  • Гъбична. Аспергилоза, кандидоза.

ELISA също е показан за диагностициране на сифилис с потвърждаване на положителните резултати чрез метода RV и позволява наблюдение на ефективността на лечението в патологичен процес.

Имуноензимният анализ се предписва съгласно указанията (ако има съмнение, че е заразен с микроорганизми), е задължителен при бременност и преди операция за идентифициране на носителя на различни бактерии.

Процедурата за анализ се извършва сутрин на празен стомах, от вената се взема материал (кръв). Резултатите от диагностичното проучване се изготвят до 10 дни.

Видове изследвания и биоматериали за анализ

По-долу са известни тестомемните тестове:

  • Реакция на фиксиране на комплемента (реакция на Wasserman) с трепенемален антиген (RSKT).
  • Флуоресцентно трепонемално антитяло (FTA). Използва се в няколко модификации: RIF-200 (FTA-200); RIF-abs (FTA-ABS; FTA-ABS двойно оцветяване; FTA-abs IgM; RIF-abs-IgM; 19S-lgM-FTA-abs); RIFTS е реакцията на имунофлуоресценция с цяла кръв.
  • Пасивна реакция на хемаглутинация (TPGA; тест за хемаглутинация на Treponema pallidum, TPHA).
  • Реакцията на пасивна аглутинация на желатинови частици, сензибилизирани с антигени на причинителя на сифилис (TPPA, тест за агрегиране на частиците на Treponema pallidum)
  • Имуноензимен анализ (ELISA, Enzyme Lynced Immunosorbent Assay).
  • IHL - имунохимилуминесцентно проучване (IHL, химиолуминесцентни имуноанализи, CLIA)
  • Реакцията на имобилизиране на бледо treponem RIBT (RIT), в чуждестранната литература TPI (Treponema pallidum тест за имобилизация). През последните години се използва все по-рядко и само за научни цели и в изследователски лаборатории.
  • Имуноблокиране (Western Blot, линейно блотиране). Като правило се използва линейно имуноблотиране, което е вариант на ензимния имуноанализ. Използва се в две версии: за откриване на IgG и IgM антитела към причинителя на сифилис

Реакция пасивна хемаглутинация (РНА) и ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) за антитела от клас IgM, IgG и общо имат универсален смисъл и се използват за скрининг, и за потвърждаване на диагнозата.

Тези техники са прости и достъпни в поведението, имат висока възпроизводимост, са автоматизирани. При използване на ELISA или RPGA задължителното условие е използването при многократния анализ на същата система за изпитване, както при първоначалния преглед.

ДМА (флуоресцентен treponemal антитяло, ДМА), базирани на визуализацията под флуоресцентни микроскопия комплекси на антигени с антитела, използвайки серуми срещу човешки Ig белязано с флуорохром.

IEF методи, ELISA, имуноблотинг (IB) могат да открият специфични антитела за антигените на Т. Pallidum (сифилис тестове са положителни) от 3-тата седмица след заразяването и по-рано, РНА и RIBT - от 7-8 седмици.

От най-разпространените специални изследвания treponemal в света, в които се използва аглутинация, могат да бъдат изброени по-долу. В TPHA (Treponema Pallidum хемаглутинацията анализ, TPHA) mikrogemagglyutinatsii реакция (анализ microhemagglutination за Treponema Pallidum, MHA-TP) с положителен резултат на аглутинация на еритроцити, покрити с (обработени) treponemal антиген, в присъствието на анти-treponemal антитела. Използване желатинови или латекс носещи частици в тест TRRA на (Treponema аглутинационни Pallidum частиците) дава възможност да се прилага тест за натоварване в случая на лизис на еритроцити (еритроцитите разпадане поради разрушаване на техните мембрани) серуми на някои пациенти, и също така придава стабилност на реактивите.

Жива патогенна трепонемия

RIT, RIBT (реакция на имобилизация на бледо тропонеми)

RIF (имунофлуоресценция реакция) FTA-ABS (RIF с абсорбция), RIF-с, IEF капилярна кръв от пръст и т.н.

Протеините се разделят чрез електрофореза с полиакриламиден гел и се прехвърлят в мембрани чрез метода Western blot

Протеините се разделят чрез електрофореза с полиакриламиден гел и се прехвърлят в мембрани чрез метода Western blot

Лабораторните тестове за откриване на трепонема се наричат ​​серодиагностици. Серодиагнизирането на сифилис условно се разделя на две групи:

  • Специфични тестове, които дават положителен тест дори след лечение на болестта;
  • Неспецифични анализи, показващи резултата, ако има заболяване в определено време.

Каква е името на анализа за сифилис? Изследването е разделено на две групи:

  • Сифилис rpga, който се дешифрира като реакция на пасивна аглутинация или сифилис, което се превръща в хемаглутинация на Treponema pallidum;
  • RIF или имунофлуоресцентна реакция;
  • RIT или реакция на имобилизация с treponem;
  • Имуноензиматичен анализ;
  • Имуноблот за сифилис или имуноблотинг;

Диагнозата на сифилис има някои особености и се различава от диагнозата на други бактериални инфекции. Сложната структура и антигенните свойства на бледо трепонема причиняват грешки при тълкуването на резултатите от серологичните реакции.

Кръвен тест за сифилис се предлага на 3 основни групи пациенти:

  1. 1 Проверка и преглед на групи от населението (включително бременност, регистрация в женската консултация, влизане в работа и регистрация на medknizhki и т.н.).
  2. 2 Проверка в рискови групи (незащитен секс с лице, заразено със сифилис, хора след принудителни сексуални контакти, инфектирани с ХИВ и т.н.).
  3. 3 Лица със симптоми на заболяването или лица, за които има съмнение, че имат сифилитична инфекция.

Всички лабораторни методи условно се делят на преки и косвени.

Директни методи

  1. 1 Идентификация на Treponema pallidum в тъмно поле (микроскопия на тъмно поле).
  2. 2 Инфекция на експериментални животни (култивиране на лабораторни животни).
  3. 3 PCR (полимеразна верижна реакция).
  4. 4 ДНК проба или хибридизация на нуклеинови киселини.

Непреки методи

Серологични тестове - диагностични методи лаборатория въз основа на откриване на антитела (съкратено AT) до антигени на Treponema Pallidum (съкращение AG). Те са от първостепенно значение за потвърждаване на диагнозата.

  1. 1 Нетрепонемални тестове:
    • Реакция на Васерман (RAC);
    • Реакцията на микро-утаяване (MR, RMP) и неговите аналози, които са дадени по-долу;
    • Изпитване на бързи плазмени реагенти (RPR, RPR);
    • Тест с червен толуидин и серум (TRUST);
    • Нетрепенемален тест на Лабораторията за изследване на полово предавани болести - VDRL.
  2. 2 Treponemal тестове:
    • Намаляване на имобилизирането Treponema pallidum - RIBT / RIT;
    • Р-тионна имунофлуоресценция - RIF, FTA (разреждания на серуми RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
    • P-пасивна хемаглутинация (RPHA, TPHA, TPHA);
    • Имуноензимен анализ (ELISA, EIA);
    • Имунологично.

Фигура 1 - Алгоритъм на серодиагниза на сифилис

Хистоморфологични методи

Тези методи се свеждат до идентифициране на характеристиките на хистоморфологията на сифилитичните прояви. Внимание се отделя на тънкостите на структурата на твърдия канкре.

Диференциалната диагноза на инфекцията, използваща хистологията обаче е много трудна. Хистоморфологията се използва при други лабораторни и клинични тестове.

За идентифициране на болестта се използват различни методи и биоматериали. В ранните стадии, сифилисът се определя като се използва бактериоскопичен тест.

Пробите се изследват под микроскоп. Устройството може да открива щамове на патогена.

По-късно се извършват серологични тестове. Благодарение на тях в пробите се откриват антигени и антитела срещу болестта.

Методите за определяне на сексуалната инфекция се разделят на две категории:

  • Директен, разкриващ патогенен микроорганизъм. Те включват: тъмно поле микроскопия, RIT-анализ (инфекция на зайци биоматериали за изследвания), PCR - полимеразна верижна реакция (я използват за намиране на патогена генетични елементи).
  • Непреки (серологични) могат да открият антитела срещу патогена. Те се произвеждат от имунната система, като отговор на инфекцията.

Серологичните методи са разделени на 2 категории: трепонемален и нетрапонемален.

Нетрапонемални, включително: тест с толуидиново червено, RSK анализ, RPR тест, кръвен тест чрез RMP бърз метод.

Treponemal, комбиниращ: имуноблотинг, RSK-тест, RIT анализ, изследване на RIF, RPHA-тест, ELISA-анализ.

Информативността на тестовете за инфекция е различна. Най-често се правят основните видове тестове за сифилис, които включват серологични техники. Пациентите, които се нуждаят от тест, лекарят определя тестове индивидуално.

Биоматериал за научни изследвания

За да идентифицирате бледо трепонем - патоген, който прилича на спирала и причинява сифилис, вземете проби:

  • венозна кръв;
  • цереброспинална течност (секреция от гръбначния канал);
  • съдържанието на лимфните възли;
  • тъканна язва.

Ако е необходимо да се проведат тестове за откриване на сифилис, кръвта се предаде не само от унна вена, но и от пръста. Изборът на биоматериал и методът на изследване се влияе от тежестта на хода на инфекцията и от оборудването на диагностичния център.

Потвърдете или изключете сифилиса: анамнеза, симптоми, тестове

Потвърдете или изключете диагнозата може да дерматоневролог. Уролог или гинеколог може само да подозира за заболяване с външни признаци. И тогава те трябва да насочат пациента към дерматоневролог за по-нататъшно изследване, лечение и проследяване.

Диагнозата "сифилис" се основава на комбинацията от следните симптоми:

  1. При наличие или отсъствие на външни прояви и симптоми.
  2. Резултатите от най-малко два лабораторни теста: нетрепенемални (RMP, RW или RPR) и трипонемални (RPGA или ELISA) тестове.
  3. На данните за наличието на сифилис и дали вече е извършил лечението.

Ако симптомите продължават

Ако няма външни признаци


Тогава диагнозата става по-сложна. Тук лекарите разчитат само на тестове и информация за текущо или преди това нелекувано лечение.

Опции в този случай:

  • Ако не-treponemal (един от HLR / RW / RPR) и тест treponemal (TPHA / IFA) - положително, проведено допълнително алтернативен тест treponemal (ELISA, ако първият тест е РНА, и обратно - TPHA ако е IFA). Ако тестът е отрицателен, тогава кръвта на пациента се подава към експерт лаборатория и провеждане на допълнителни анализи. Ако вторият тест treponemal стане положително, диагностициран като "латентни сифилис".Such състояние може да се появи известно време след лечението. Ако пациентът е проведено преди началото на лечението, за да се потвърди диагнозата, провеждане на допълнителни изследвания на I гр M. В положителни резултати - диагнозата е потвърдена, но все още се препоръчва изследвания, за да се повтори след 2 седмици. В отрицателни резултати от сифилис опровергана.
  • Ако тестът не-treponemal (HLR / RW / RPR) е отрицателно и treponemal (TPHA / IFA) е положителен, състоянието може да бъде оценена като "края сифилис" или "липса на сифилис", ако пациентът е предварително провеждат пълно лечение. За да се разграничат тези две състояния се осъществява на допълнителен тест I г М (IFA I г М, RIF -abs- I г М, Immunoblotting- I гр М). Ако съм в кръвта, налице е "късно сифилис" и се лекува. Ако не, пациентът се счита за здрав.
  • Ако RPR (или RW / VLR) е положителен, TPHA положителен и ELISA отрицателен (или обратното: РНА "-" и IFA "+"), резултатите от теста са съмнителни, и се препоръчва да се изпрати на кръв към експерт лабораторията или поведение алтернативни тестове (IFA, на иму).
  • Ако тестът не-treponemal (PMP / RW / RPR) положителен и treponemal (TPHA / IFA) е отрицателен, тогава проведе допълнително treponemal тест (ELISA / TPHA). Ако даде положителен резултат, кръвта се изпраща в експертната лаборатория. Ако е отрицателен, диагнозата се отхвърля и резултатът от нетрепенемален тест се смята за фалшиво положителен.

Класификация на методите за лабораторна диагностика

Серологично диагностика помага на лекаря да изследва динамиката на образуването на антитела в организма на сифилис в ранните стадии на болестта, на пациента по време на лечението и след прекратяването му, за да се реши проблема с рецидив на болестта при пациент или повторно заразяване (повторно заразяване), диагнозата на сифилис в масови заболявания.

Антитела към бледо трепонема IgM

Първите антитела IgM започват да се развиват след инфекция. Те започват да се откриват с помощта на серологични реакции от втората седмица след инфекцията.

На 6 - 9 седмици от заболяването техният брой става максимален. Ако пациентът не се лекува, тогава антителата изчезват след шест месеца.

IgM антителата изчезват след 1 до 2 месеца. след лечение на ранен сифилис след 3 до 6 месеца.

- след лечение на късен сифилис. Ако се регистрира растежът им, това е признак за рецидив на сифилис или показва повторна инфекция.

IgM молекулите са големи и не преминават през плацентата към плода.

Антитела към бледо трепонема IgG

Антителата от IgG имуноглобулини се появяват в края на първия месец (на 4-та седмица) от момента на инфекцията. Техният титър е по-висок от тигъра IgM. IgG продължава дълго време след излекуване.

Неспецифични антитела

Има много серологични реакции. Това се дължи на антигенното множество от бледо тропонеми.

кръвния серум на пациента на различни етапи от сифилис в допълнение към специфичната форма или друг не-специфични антитела - аглутини, комплемента, immobiliziny, антитела, които предизвикват имунен флуоресценция pretsipitiny и др.

Серологични тестове за откриване на неспецифични антитела имат относителната специфичност, така че да се избегне диагностични грешки, трябва да използвате не една, а комплекс от серологични тестове (DAC).

Фалшиви положителни тестове за сифилис

reagin антитяло, се произвеждат в кръвта срещу кардиолипин антиген, записани не само в сифилис, но и в други заболявания: kollagenozah, хепатит, заболяване на бъбреците, тиреотоксикоза, онкологични заболявания, инфекциозни заболявания (проказа, туберкулоза, бруцелоза, малария, тиф, скарлатина), с бременност и месечни цикли, с приема на мастни храни и алкохол.

Отличителна черта на нетрепонемалните тестове е производството на фалшиви положителни реакции. Трябва да се отбележи, че броят на фалшивите положителни реакции се увеличава с възрастта.

Фиг. 2. На снимката, първичен сифилис при жените.

Серологичните тестове за сифилис се разделят на тестонемални и нетрепонемални тестове.

1. Нетрепонемални тестове

Като антиген в тази група от тестове се използва кардиолипин антиген. Липидните антигени на сифилис патогени са най-многобройни.

Те съставляват 1/3 от сухата маса на клетката. Използвайки нетрепонемални тестове, се откриват антитела-реагенти, които се произвеждат срещу кардиолипинния антиген.

Тази група включва реакцията на фиксиране на комплемента (RSKard), реакцията на микро-утаяване (RMP), бързата реакция на плазмената реакция (RPR) и др.

първичен скрининг сифилис (скрининга на населението) се извършва чрез използване на не-treponemal тестове, и води до възможността за получаване на количествен изпълнение позволява използването на тези тестове за мониторинг на ефективността на лечението.

Положителните резултати от нетрепонемалните тестове трябва да бъдат потвърдени чрез тепанемални тестове. Отличителна черта на нетрепонемалните тестове е производството на фалшиви положителни реакции.

2. Treponemal тестове

Трепонемалните тестове използват антигени с трепенемален произход, изолирани от култивиран тропонем. С тяхна помощ положителните резултати от нетрепонемалните тестове се потвърждават.

Групата включва: RSKtrep - свързване на комплемента, RIF - имунофлуоресценция и неговите модификации, RHS, RIBT - реакция обездвижване бледо treponemes, TPHA - пасивна реакция хемаглутинацията, ELISA - ензимен имуноанализ.

3. Тестове за сифилис при използване на рекомбинантни антигени

Антигени за тази група от тестове се получава чрез генетични инженерни средства и се използват в реакциите - TPHA и ELISA Анализи имуноблотинг (IB) и имунохроматографски анализ.

Фиг. 3. За диагностика на сифилис се използва набор от серологични тестове.

За откриване на сифилис се използват нетрепонемални тестове или комплекс от серологични реакции (DAC). Серологичната диагноза се прилага от 5-та седмица от момента на инфекцията или 2-3 седмици след появата на твърд канкре.

Антителата се откриват при практически всички пациенти с първичен, вторичен и повтарящ се сифилис. Серологичните реакции са положителни при 70-80% от пациентите с третичен активен сифилис, в 50-60% от случаите при пациенти с третичен латентен сифилис.

Серологичните реакции, използващи нетрепенемални тестове, могат да доведат до фалшиви положителни резултати.

Фиг. 4. Вземане на кръвни проби за анализ на сифилис.

Тяхната отрицателна страна е невъзможността да се използва за мониторинг на ефективността на лечение, получаване на положителни резултати в spirochetosis и не-венерически treponematoses и получаване на фалшиви положителни резултати за рак, проказа, някои ендокринни заболявания.

При извършване на тестове с използването на treponemal антигени treponemal произход на изпитанията, TPHA, ELISA и IFA остават положителни за години след сифилис лек, а в някои случаи за живота.

RIBT и RIF са по-специфични за всички серологични реакции, използвани за диагностициране на сифилис. Те правят възможно разграничаването на фалшиви положителни реакции, за да се идентифицират късни форми на сифилис, които се появяват при отрицателни реакции.

С помощта на RIBT се приемат фалшиви положителни реакции при бременни жени, когато е необходимо да се реши проблемът с инфекцията на детето.

Реакцията на имобилизиране на бледо treponemes (RIBT, RIT)

Същността на реакцията е, че антителата в серума на пациента блокират бледото трепонема. Отрицателна е реакцията при имобилизиране на до 20% от патогени, слабо положителна - 21-50%, положителна - 50-100%.

RIBT понякога дава фалшиви положителни резултати. Тестът е сложен и отнема време, но е абсолютно необходим за диференциалната диагноза на латентните форми на болестта и фалшивите положителни резултати от серологичните реакции, включително при бременни жени.

RIBT дава 100% положителни резултати при вторичен, ранен и късен сифилис, в 94-100% от случаите - при други форми на сифилис.

Реакцията на имунофлуоресценция (RIF)

Заедно с серологични диагностични методи за откриване на бледите treponemes (микробиологични диагностика) играе важна роля, особено по време на серонегативни сифилис, когато няма антитела в кръвта, но това е първата проява на пресни първични сифилис (шанкър).

За изучаване на биологичен материал се отделя от повърхността на твърда язви гнойни syphilides (шанкър) съдържание, влажни и ерозивни папули, точковидни заразени лимфните възли, гръбначно-мозъчната течност и околоплодната течност за PCR - кръв.

Най-добрият метод за откриване на сифилис патогени е да се изследва биологичния материал в тъмното поле на микроскопа. Тази техника ви позволява да видите бледо treponema в живо състояние, за да изучите структурните му характеристики и движения, да разграничите патогенните патогени от сапрофитите.

Фиг. 15. Анализ за сифилис - микроскопия на тъмно поле.

Фиг. 16. При изследването на сухи удари се използва оцветяването според Romanovsky-Giemsa. Блед тропонем оцветен в този случай в розов цвят, всички други видове спирохет - във виолетово.

Откриването на бледо тропонем с микроскопия в тъмно поле е абсолютен критерий за окончателното диагностициране на сифилис.

Фиг. 17. За откриване на бактерии се използва реакцията на имунофлуоресценция (RIF) - тестонемален тест. В специфичен антиген-антитяло комплекса, когато се комбинира със специфичен серум белязано с флуорохром, флуоресцентно осветление светлинен микроскоп бактерии дава зеленикав цвят.

Фиг. 18. Причиняващите агенти на сифилис могат лесно да се видят в петна, приготвени по метода на Levaditi (импрегниране със сребро). Блед тропонем с тъмни цветове на фона на жълт цвят на клетките на заразените тъкани.

Фиг. 19. Причиняващият агент на сифилиса при множество увеличения.

Фиг. 20. В снимката на колонията блед Трепонем. Трудно е да се получи култура от бактерии. На практика те не растат на изкуствени хранителни среди. На медии, съдържащи конски и заешки серуми, колонии се появяват на 3-тия и 9-ия ден.

В таблица 1 по-долу дадохме възможните резултати от анализите и тяхното декодиране. Както може да се види в таблицата, основната стойност за декодиране е комплексната оценка на тестовете.

Таблица 1 - Дешифриране на резултатите от серологичните реакции (кръвни тестове за сифилис). За да видите кликнете върху таблицата

Оценката на реактивността на теста също се извършва чрез кръстоски:

  1. 1 Максималната реакция (рязко положително изпитване) се показва с помощта на 4 кръста.
  2. 2 Положителна проба се показва с помощта на 3 кръста.
  3. 3 Слабо позитивната реакция е показана с два кръста.
  4. 4 Един кръст показва съмнителен и отрицателен резултат.
  5. 5 Отрицателният отговор е отбелязан с знак минус.

Проблемът с оптимизирането на лабораторната диагностика на сифилис не е загубил значимостта си към настоящия момент. Съвременните методи за диагностика, независимо от желанието на учените да привеждат диагнозата до възможно най-висока степен на чувствителност и специфичност, изискват контролна проверка и индивидуален подход.

Особеността на сифилитичната инфекция е феноменът на серо-резистентност, който никога не е получил научно обяснение. Диагнозата се прави след пълно изследване на пациента с епидемиологични, клинични, лабораторни методи.

На фона на икономическото и техническото развитие на медицината има и напредък в разработването на нови критерии за диагностициране на сифилис. Всичко това бързо, успешно и точно ще лекува пациентите.

Някои пациенти, които идват на преглед на гинеколог или анеролог, не предоставят обективна информация за качеството на сексуалния си живот.

Може би причината е в обичайните неудобства, или може би вина е липсата на информация в областта на полово предаваните болести.

Къде да направите анализа

Резултатите от тестовете и клиничните прояви директно зависят от имунния отговор на тялото.

Ранен сифилис

В условията на оборудвани лаборатории и медицински центрове, определянето по метода на ензимно свързана ензимна реакция от treponema може да се извърши по няколко метода, които се наричат ​​директни и индиректни.

Тези методи обаче се основават на един метод, който позволява анализ на сифилис чрез ELISA. Това изпитване се извършва по определен начин.

Лабораторен техник има специален плоскостен панел с дупки под формата на заоблени кухини в размер до сто. Когато се определя сифилис чрез ELISA, в комплектите за този тест се използват специално приготвени концентрирани антигени до сифилис, които се поставят в ямките на ELISA плаката.

След като приеме кръвта на пациента сутрин на празен стомах, серумът се отделя от кръвта и се поставя в гнезда с антигени. В ямките се осъществява свързването на антигена с антителата.

Методът ELISA за сифилис се основава на реакцията на свързване на първите стадии на имунните съединения и конюгатите със специален ензимен етикет, който е необходим, за да се прочете качеството на реакцията.

На този етап в допълнение към ензима пероксидаза се добавят хромогенни оцветители за оцветяване на материала в зависимост от резултата от реакцията. Въз основа на появените цветни кладенци в плочата IFA сифилисът се дешифрира.

В комплектите за различни методи за ELISA са прикрепени таблици с цветови схеми, съгласно които се определя количеството, нивото на имуноглобулините, антителата от серума на пациента в 1 обемна единица.

Специално оборудване, спектрофотометър за извършване на фотометрични измервания и оценка на плътността на материала в ямките се използват за оценка на резултата от реакцията в сравнение с контролните проби.

Въз основа на плътността, резултатът е ясно определен за всеки патоген на сифилис в рамките на нормите и патологията.

За да се получат най-точните резултати от лабораторната диагностика на венерологичното заболяване на сифилис, се препоръчва да се използват няколко теста наведнъж, въпреки че продължителността на това изследване отнема малко повече време, но си заслужава.

Най-често подаденият кръвен тест за сифилис след прегледа се дава под формата на цифри, чието декодиране има следното обозначение:

  • "4 +" - говори за остър положителен резултат;
  • "3+" е просто положителен резултат;
  • "2+" е слабо положителен резултат;
  • "1+" е съмнителен резултат;
  • "-" - отрицателен резултат.

Въпреки това, след като сте получили резултатите от анализите с положителни данни, не се отчайвайте веднага, както е отбелязано по-горе, не всички тестове могат да осигурят пълна информация за наличието на сифилис.

Например, клиничният анализ на RW, поради липсата на специфичност, може да даде фалшиви положителни резултати, ако пациентът страда от други заболявания. Такива като:

  • лупус еритематозус;
  • ревматоиден артрит;
  • склеродермия;
  • мононуклеоза;
  • морбили;
  • хепатит;
  • инфаркт;
  • злокачествено образуване на всеки орган.

Също така, фалшиви положителни резултати могат да бъдат открити при напълно здрави хора или хора, които злоупотребяват с алкохол и наркотици.

Ето защо искам да подчертая това, което беше казано по-рано, че е необходимо да се направи кръвен тест за сифилис едновременно с няколко метода и за предпочитане с тепонематологично тестване.

Важна роля в надеждността на резултатите от анализа на кръвния серум за сифилис играят правилната подготовка за неговото прилагане, както и изборът на лаборатория за диагностика. Днес такъв анализ се провежда както в обществените, така и в частните медицински лаборатории.

Разбира се, в частните институции такива диагностики ще имат определена цена, като правило цената на анализите зависи от избрания метод и от неотложността на изследването. Тук можете да го направите анонимно.

За да анализирате кръвта за сифилис е възможно най-точен, следвайте няколко прости правила:

  1. Първо, да давате кръв само на празен стомах и по-добре сутрин.
  2. На второ място, в навечерието на теста, е строго забранено да се пият алкохолни напитки, дори и с най-нисък състав.
  3. Трето, в допълнение към серума, който обикновено се взема от вената на лакътния, като материал за лабораторно тестване за наличието на сифилис, може да се превърне в разряд шанкър (характеристика на сифилитичен лезии) или пробиване на лимфните възли.

Ако подозирате, че вие ​​или някой от вашето семейство са се заразили със сифилис, но по някаква причина се направи кръвен тест лаборатория пациента за сифилис не е възможно, тогава основната диагноза, можете да използвате специален бърз тест у дома,

Можете да си купите такъв тест във всяка аптечна мрежа и да го следвате стриктно в съответствие с приложените инструкции. Само в този случай ще можете да получите надежден резултат.

Като правило бързата диагностика на сифилис у дома се извършва въз основа на кръвта. Ще ви отнеме буквално една капка, за да получите очаквания резултат, който няма да ви остави да чакате (буквално няколко минути).

Има и комплекти за диагностициране на сифилис у дома с по-нататъшно изпращане на биологичния материал, направен в специализирана институция.

Човек не трябва да се игнорира съветите на специалист, и след самодиагностика, самолечение, или напротив, тя се откаже, ако се приеме, че не е нужно болестта. Във всеки случай, за да се изясни пълната картина, е необходимо да се консултирате с лекар без неуспех.

Ензимният имуносорбентен анализ (ELISA) е един от многобройните методи за серологична диагностика на инфекциозни заболявания.

Имуноензимен анализ (ELISA) при серодиагниза на сифилис е тест за антитела от класове M, G и A (IgM, IgG, IgA) срещу бледо трепонема антигени. Може да се направи ELISA с CSF.

Въвеждането на практика имуносорбентен анализ (ELISA) вместо Wasserman кардиолипин и друг тест, значително повишава качеството на лабораторната диагностика на сифилис. Основно предимство на този метод е възможността за автоматизиране на изследователския процес, който позволява да се намали влиянието на човешкия фактор.

1. История на метода ELISA

Основните принципи на ензимния имуноанализ на повърхността на твърдофазовия носител са разработени от Е. Engvar и съавтор.

(1971), В. Ван Вееман и А.

Schuurs (1971). Ензимният свързан имуносорбентен анализ първо беше предложен за диагностика на сифилис през 1975 г.

Visser, който оцени потенциала на този автоматизиран тест. ELISA започна да се използва широко при диагностицирането на сифилис през 80-те години.

, когато са разработени и сертифицирани диагностични тестове и са стандартизирани методите за тестване. В СССР техниката за определяне на ELISA за диагностициране на сифилис е разработена от Б.

V. Kotrovsky (1982, 1983).

2. Принцип на метода ELISA

Имуноензимният анализ (ELISA) чрез механизма на реакцията е близо до RIF (същите антитела се откриват). Изследването имуноанализ Реакционната ензим се отнасят до имунологични реакции, въз основа на високо специфичното взаимодействие между антигени на Treponema Pallidum антитела сифилис пациенти.

При сифилологичната практика се използва индиректен вариант на ELISA. Принципът на най-често използвания непряк вариант на реакцията е както следва.

На повърхността на полистиренова плака, имунните комплекси са фиксирани, образувани от взаимодействието на антитела на пациента със сифилис с бледо тропонемови антигени.

След това те се идентифицират в цветна реакция, използвайки специфични конюгати и съответните субстрат-хромогенни добавки.

Процедурата за провеждане на теста е както следва: серумът на пациента се поставя върху носител в твърда фаза с прикрепен към него антиген. Когато в него са налице антитела, върху повърхността на носителя се образува комплекс антиген-антитяло.

За да се "проявят" резултатите от реакцията, се използват античовешки антитела срещу човешки Ig конюгирани с ензимни маркери. В случай на положителна реакция, ензимът, който се присъединява към комплекса антиген-антитяло, разлага субстрата, добавен към системата, в резултат на което се развива оцветяване на цвят с различна интензивност.

При определяне на реакционен комплекс адсорбиран върху твърдата фаза AG и AT се провежда чрез използване на антиглобулиновия антитела маркирани с ензим, за цветна реакция с ензим субстрат.

В реакцията, определянето на комплекса от антигени, сорбирани върху твърдата фаза и антителата, се извършва с ензим-белязани антиглобулинови антитела.

ELISA представя възможността за откриване на серумен Ig от различни класове. Има системи на пазара, които позволяват отделно да се определят IgM и IgG и общите антитела.

С развитието на лабораторната диагностика в условията на модернизация на руската здравеопазването в практиката на лабораторни автоматизация лабораторни изследвания, включени, което ви позволява да се стандартизира аналитични етапи на научните изследвания.

Това помага да се подобри качеството на диагнозата. С въвеждането на автоматизацията са въведени нови високотехнологични методи с висока чувствителност и специфичност, като имунохемилуминесцентен имунологичен тест (CLIA).

Идентифициране на сифилис чрез ELISA, достойнства:

  • Висока чувствителност на метода - повече от 90%;
  • Способността да се наблюдава динамиката на заболяването, сравнявайки броя на антителата в различни интервали от време;
  • Практически във всяка медицинска институция.

За да избегнете риска от изкривяване на резултатите по време на анализа, трябва да следвате правилата. Ако това не бъде направено, може да се направи фалшиво позитивен тест за сифилис. За да се изключат грешките, е необходимо:

  • Да дава кръв на празен стомах;
  • Въздържайте се няколко дни от алкохол, мазни храни и физическа умора;
  • Не пушете 2 часа преди теста;
  • Разкажете за взетите лекарства, за последните ваксинации, за наличието на заболявания, за състоянието на бременността и други налични обстоятелства.

Продължителността на ELISA за сифилис зависи от работното натоварване на лабораторията и наличието на медицинско оборудване в него.

Имуноензимен анализ (съкратено ELISA) се основава на специфична реакция на антиген-антитяло. Биологичен материал (кръвен серум на пациента, цереброспинална течност) се въвежда в ямките на твърдата повърхност, на които са фиксирани антигени на бледо трепонема.

Изпитваният материал се инкубира, след което се промиват антитела, които не се свързват с антигени (виж Фигура 5).

Идентифицирането на получения комплекс се извършва във ферментационния етап с помощта на белязан с ензим имунен серум. Когато възниква химична реакция, ензимът оцветява получените комплекси.

Интензивността на оцветяването зависи от количеството специфични антитела в кръвта на пациента и се фиксира със спектрофотометър.

Фигура 4 - Схемата на ELISA (ензимен имуноанализ)

Чувствителността на ELISA е повече от 95%. Методът се използва в автоматизиран режим, за да се изследват наложените популации: донори, бременни жени и други, за да се изясни диагнозата за положителни и фалшиви положителни нетрепонемални тестове.

За изследователска манипулация често се използва кръв от вена. В определени ситуации лабораторен техник може да вземе проба за диагностика от пръста или от гръбначния мозък.

Интервалът от датата на доставка до получаването на резултатите може да варира: от един ден до две седмици. Всичко ще се определя от вида на тестването.

Когато се подготвяте за извършване на кръвен тест за идентифициране на въпросното заболяване, трябва да се спазват следните препоръки:

За да започне изследване на органа за идентифициране на въпросната болест, следва неспецифични тестове.

В повечето случаи лекарят предписва сезиране на МЗ. Дори ако резултатът е слабо позитивен ("+"), пациентът продължава изследването - но този път той ще вземе конкретни тестове (често RIF и RPHA).

Никой тест не може да даде 100% гаранция, че човек е заразен със сифилис.

Положителният анализ не винаги показва заболяване.

Тя може да бъде фалшива със следните явления:

  • Инфекция на тялото (мононуклеоза, туберкулоза).
  • Бременност.
  • Рак.
  • Автоимунни патологии.
  • Лицето преди това е било заразено със сифилис и е преминало успешно лечение.

Изпраща пациентите на анализ на лекар-венеролог. Частните лаборатории извършват анонимни проучвания за сифилис по искане на клиента. За да преминат теста, те не се нуждаят от препратка от лекар.

Правила на изследването:

  • Кръвта в лабораторията се приема сутрин на празен стомах (яжте след процедурата). Преди теста може да се пие само вода.
  • За 2 дни преди изследването е забранено: да се ядат мазни храни и да се пие алкохол.
  • Кръвта се взема от пръст или вена.
  • Колко време трае проучването? Обикновено не повече от един ден. Анализът на тестовете за сифилис се получава от лабораторни помощници или от лекар, който отговаря.
  • Колко тест е валиден? След 3 месеца резултатите от теста вече не са валидни. Те се връщат отново.

Ако анализът покаже, че тестът е положителен, е необходимо да посетите венеролог, който ще предпише допълнителен преглед, за да потвърди точно диагнозата и да избере необходимия режим на лечение.