Богата на тромбоцити тромбоцити

Симптоми

21 февруари 2012 г.

Богата на тромбоцити тромбоцити Една концепция, която характеризира кръвна плазма с увеличено съдържание тромбоцитите. Описвайки този феномен, често се използват термини като тромбоцитен гел, тромбоцитен концентрат, богата на тромбоцити плазма или съкратено PRP.

Поради факта, че основната функция на тромбоцитите е участие в процесите на излекуване и регенерация на тъканите, кръвосъсирваемост на кръвта, Богатата на тромбоцити плазма може значително да подобри ефективността на определени лечения. Към днешна дата въз основа на такава човешка кръвна плазма е разработена медицинска техника Plazmolifting, който е многофункционален. Използва се в стоматологията, козметологията и други индустрии.

Нормално тромбоцитите средно е около 200 хиляди. / L и може да варира в границите от 180 до 350. Учените са показали, че този стимулаторен ефект на PRP се постига, когато концентрацията на тромбоцитите в кръвта е 1000000 / мл. По този начин плазмата с това съдържание на тромбоцити се нарича наситена. Когато нивото на кръвни клетки данни попада горе граница стимулиращ ефект не се случи, освен това, излишъкът над концентрацията на 1.000.000 / мл не доведе до допълнително ускоряване на регенерация.

Механизмът на действие на богатата на тромбоцити плазма

Много дълго време е доказано, че тромбоцитите са отговорни за кръвосъсирването в случай на увреждане на тъканите. Преди около тридесет години се разкри, че при осъществяването на тази функция тромбоцитите отделят специални протеини - растежни фактори, които са биологично активни молекули от полипептиден произход. Те излъчват специални сигнали, възприемани от рецепторите, които се намират върху увредените клетки. Тези, от своя страна, получават сигнал и започват да стимулират разделянето на такива клетки. По този начин, увеличаването на нивото на тромбоцитите в кръвта води до увеличаване на интензивността на тяхното влияние върху регенериране на тъкани. Използването на плазма, богата на тромбоцити, ускорява лечението няколко пъти. Такава плазма е напълно безопасна и биосъвместима, но не носи риск от инфекция, тъй като се получава от собствената си кръв.

Техника на използване

За да се получи тромбоцит, богат на тромбоцити, пациентът се взема от 20 до 100 ml кръв, в зависимост от необходимото количество плазма при изхода и първоначалното съдържание на тромбоцитите. В резултат на центрофугирането на 2 етапа, първо се премахва кръвта еритроцити, защото те са най-тежките елементи. След това кръвта напуска левкоцити, и тромбоцитите са в супернатанта. Второто центрофугиране води до концентрация на тромбоцитите. За да бъде плазмата удобно използвана, е възможно да се добавят тромбоген активатори към изолираната фракция, като например калциев хлорид в комбинация с тромбин. Процесът на получаване на богата на тромбоцити плазма отнема не повече от половин час, вследствие на което концентрацията на тромбоцитите се увеличава приблизително пет пъти, отколкото първоначално в периферната кръв. Гелът, получен в резултат на такива манипулации, се използва за имплантиране заедно с остеопластични материали или независимо.

Използването на богата на тромбоцити плазма

Има много области на приложение на ТЕЦ, сред които може да се отдели специално хирургия, стоматология, спортна медицина, лечение на нелекуващи рани и язви, плешивост и много други заболявания.

По време на развитието на операцията учените са се опитали да намерят лекарство, което да подобри лечението на рани след операция и да сведе до минимум вероятността от инфекция, появата на болка, белези и тумори. Медицински източници твърдят, че кръвната плазма, богата на тромбоцити, днес най-добре постига гореспоменатите цели. За стоматологията БТП също беше ценно откритие. Използва се за ускоряване на лечението на рани, което води до няколко пъти по-бърз процес. Поради честото нараняване на сухожилията и мускулите в спорта, спортната медицина се нуждае от лек за лечението, по-малко инвазивно и по-ефективно. Използването на ТЕЦ за такива цели често дава добри резултати, което се потвърждава от многобройни проучвания. Лечението на нелекуващи рани, язви от какъвто и да е произход е главната посока при използването на богата на тромбоцити кръвна плазма. Такива рани са голям проблем на съвременната медицина, те не подлежат на лечение. Благодарение на лечението на хронична травма и язви, използването на това лекарство е възможно дори и у дома. В допълнение, този инструмент се използва при лечението на плешивост, урологични заболявания, възстановяване на сърдечните клапи, възстановяване на междупрешленни дискове и хрущяли и т.н.

Методът за получаване на тромбоцити, богати на кръвна автоплазма

Изобретението се отнася до областта на медицината, по-специално до хирургия, травматология, ортопедия. Метод за получаване на богата на тромбоцити кръв autoplasma тръбна костна регенерация, включващ прилагане на автоложна кръв стабилизатор, той центрофугиране, добавяне прокоагулантната съдържащ 10% разтвор на СаСЬ 2, и фактор на кръвосъсирването, при центрофугирането се провежда при стайна температура в продължение на 6-8 минути при скорост 1000-2300 об / мин, а след това като коагулационен фактор протромбиновото а се прибавя 5000 единици. Изобретението осигурява увеличаване на производствения капацитет на богата на тромбоцити плазма чрез намаляване на времето, необходимо за производството му, като се намаляват разходите за процеса чрез елиминиране на скъпо оборудване.

CLASS = "b560m" на тяхното приложение. Дисертация. MD - САМАРА, 1999. US 2005152886, 14.07.2005. CN 1077391, 20.10.1993.

Изобретението се отнася до медицина, по-специално до хирургия, травматология, ортопедия.

Метод за получаване на кръвната плазма чрез въвеждане на стабилизатор, последвано от отделяне на кръвна плазма, където кръвта се прилага след стабилизиране на сместа от метилови естери на 15-флуоро-15-E deoxyprostaglandin2 и 15-флуоро-15-деокси-11-епи-простагландин Е2 до крайна концентрация от всеки от тях 5-10 g / ml (прототип). Описание на изобретението за. 902355, IPC A61K 35/16, приоритет 26.06.80, publ. в Бул. 39, от 23.10.82 г., авторът. КМ Лакин, В. Макаров, В. В. Бегуглов, Л.Д. Бергелсън.

Недостатъци: използването на скъпи химически активни чужди вещества, което води до значително увеличение на разходите за процеса и до влошаване на местните реакции за възстановяване на тъканите. Получената плазма, обогатена с тромбоцити, поради наличието на химически активни вещества в нея, няма много полза при оптимизиране на регенерацията на тубуларната кост.

Най-близкото решение е описанието, направено от интернет: http://www.dental-azbuca.ru/articles/prp_last/.

Богата на тромбоцити плазма (BTP) беше получена чрез клетъчния сепаратор Electro Medics 500 (Medtronics) директно в операционната зала за костна екстракция. С използването на този клетъчен сепаратор 450-500 ml автоложна кръв се събира чрез централен венозен катетър, който е инсталиран по време на операцията. Кръвта се събира със скорост 50 ml / min. Скоростта на въртене на центрофугата е 5600 об / мин. Когато оградата да се предотврати съсирването на кръвта към нея автоматично добавен консервант (Citro-glyukofosfat) в съотношение 1 мл консервант на 5 мл кръв. В центрофугата кръвта се разделя на три основни компонента: еритроцити, BOTP и плазма с тромбоцити. Това е възможно поради тяхната различна плътност. Сепараторът отделя съставката от порядъка на най-малката до най-плътната. По този начин първата плазма отслабена от тромбоцити (около 200 ml), след това BTP (около 180 ml). След отделя бедна на тромбоцити плазма, скоростта на въртене на центрофугата е намалена до 2400 об / мин за по-точно разделяне на еритроцити и PRP. Според авторите, потвърждаващи Reeder и СО / 4 /, най-малките и най-активните тромбоцитите трудно стари и така смесени с най-леките еритроцитите. Поради наличието на еритроцити в тази фракция, BOTP придобива червеникав цвят, в противен случай ще е сламено жълт. Цялата процедура трае 20-30 минути и обикновено се провежда по време на приема на автогенно кост или подготовка на получаващия леглото, и следователно няма ефект върху общото време на операцията. Medtronics клетка разделителни фирми са в по-голямата част от извършването на САЩ, където той прекарва ортопедични и сърдечна операция, така че допълнителните разходи включват само за еднократна употреба тръби, венозен катетър и камера за кръвта, което в общия размер на около $ 300.

Преди използване PRP трябва да започне процеса на коагулация със смес от 10 мл 10% разтвор на калциев хлорид (CaCl2) и 10,000 единици говежди тромбин (Gentrac) (тук и по-нататък тази смес ще бъдат наричани прокоагулантната), за активиране на всяка нова част на PRP е необходимо да използвате нова спринцовка. Това е необходимо, за да се предотврати прокоагулантните остатъци от спринцовката в камерата за PRP, тъй като дори малко количество от него може да предизвика преждевременно коагулация на целия обем на PRP. 6 ml BTP, 1 ml прокоагулант и 1 ml въздух се изтеглят в спринцовката. Въздухът е необходим за смесване в спринцовката на BOTP и прокоагулант. Спринцовката се изпомпва 6-10 секунди преди началото на коагулацията и след това съдържанието й се смесва с костния материал. При смесване на BOTP с костен материал, фибринът лепи частиците си, което пречи на тяхната миграция. В допълнение, полученият конгломерат е пластмаса - той лесно може да бъде оформен в желаната форма. Също така е известно, че фибриновата мрежа подобрява остеодуктивните свойства на костния материал. Броят на тромбоцитите в кръвта на пациентите е средно 232 хиляди / μl и е в диапазона от 3 до 523 хиляди / μl.

Концентрацията на тромбоцитите в БТП е средно 785 хиляди / мкл и варира от 595 до 1100 хиляди / мкл. Това означава, че използваният метод за изолиране на тромбоцитите позволява да се увеличи концентрацията им с 338% спрямо първоначалното ниво.

Недостатъци: дълга продължителност на производствения процес на BoTP, необходимостта да се използва скъпо внесено оборудване.

Технически резултат: повишаване на производителността на производствения PRP чрез намаляване на времето за това производство, намаляване на разходите на процеса поради отстраняване на скъпо оборудване, което се постига от факта, че в процеса на получаване на богата на тромбоцити в кръвта autoplasma след прилагане на автоложна кръв стабилизатор, центрофугира се и добави просъсирващ, като центрофугирането се извършва при скорост от 1000-2300 об / мин за 6-8 минути. Продуктивността в сравнение с прототипа се удвоява поради факта, че центрофугирането се извършва във времето за 6-8 минути. центрофугира в продължение на една стъпка (в предшестващото състояние на техниката за двата етапа) и по-ниска скорост - от 1000-2300 об / мин (в прототипа на 2400-5600 об / мин).

6-8min време избран емпирично така в продължение на 5 минути не съществува отделяне на клетъчни кръвни фракции, и повече от 8 минути, изразено започва разрушаване на клетъчни елементи, което също намалява качеството на PRP, намаляване на броя на оборотите на центрофугиране позволява прилагане на метода на вътрешния оборудване, което се предлага във всички градски и областни здравни заведения.

скорост Избор 1000-2300 об / мин се дължи на факта, че, ако вземете чужд пределната скорост на 900 об / мин, а след това при тази скорост е невъзможно да се получи високо качество (подходящи) PRP и при скорост от 2400 об / мин, с положителен резултат може да се получи само на скъпо оборудване, но е много скъпо. Всички данни се получават и се избират експериментално.

Този метод може да се използва във всяка медицинска институция, която има конвенционална лабораторна центрофуга, а останалите манипулации се извършват ръчно, т.е. скъпото внесено оборудване е изключено и първоначалната цена е намалена 60 пъти (от $ 300 до $ 5).

Пример за прилагане на метода.

Пациент К., ликвидаторът на аварията в Чернобил през 1986 г., претърпя операция в травма отделение 10 дни след нараняване с диагноза отворен раздробена ставния фрактура на долната трета (п / з) дясното пищяла със значително изместване на костни фрагменти и дефект на кортикалната кост.

След метал остеосинтеза за AO / Асиф направена от пластмаса PRP обем тибията дефект от 70 мл се получава интраоперативно чрез вземане на проби автоложна кръв от периферна вена в количество от 400 мл. След прибавяне към него консервант - 3,8% натриев нитрат 01:10 автоложна кръв се центрофугира при 1200 об / мин, при стайна температура в продължение на 7 минути. Долният слой, получен обем autoplasma на 60 мл, екстрахира се със спринцовка, се смесва с 5000 U на протромбина и 10% разтвор на СаСЬ2 (калциев хлорид).

След експозиция в продължение на 5 минути при стайна температура, получените 70 ml ВТР се въвеждат в зоната на дефект на пищяла. Раната се измива, слоя по слой. Асептичен дресинг. Гипсовата лингета се прилага в продължение на 10 дни преди отстраняването на шевовете. Ранно функционално натоварване след 7 дни. Шест седмици по-късно, видими радиационни жилки. Ограничен товар след осем седмици. Движение в глезена почти изцяло.

Целият процес на получаване на богата на тромбоцити автоплазма от кръв в сравнение с прототипа е два пъти по-бърз и неговата цена е намаляла многократно.

ФОРМУЛА НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО

Метод за получаване на богата на тромбоцити кръв autoplasma тръбна костна регенерация, включващ прилагане на автоложна кръв стабилизатор, той центрофугиране, добавяне прокоагулантната съдържащ 10% разтвор на СаСЬ2 и фактор на кръвосъсирването, характеризиращ се с това, че центрофугирането се извършва при стайна температура в продължение на 6-8 минути при скорост от 1000-2300 об / мин и след това се прибавя 5000 ED протромбин като коагулационен фактор.

Говорим за обогатения кръвен тромбоцит

Недостатъчният синтез на тромбоцитите води до недостиг в кръвта, което увеличава риска от прекомерно кървене поради лошо кръвосъсирване и еластичността на съдовете намалява. На фона на дефицит на тромбоцитите може да се развият различни заболявания, свързани с нарушена хематопоетична функция на организма. Елиминирането на недостиг на тромбоцити е в състояние да инжектира обогатена плазма. Характеристиките на процедурата, нейната ефективност и рискови фактори ще бъдат разгледани по-долу.

Инжектиране от плазма, обогатена с тромбоцити

Плазмата, обогатена с тромбоцити, е обикновена кръвна плазма, при която броят на тромбоцитите е няколко пъти по-висок от нормите на биологично естественото съдържание на свободни от ядрени клетки в кръвта. Тази богата на тромбоцити плазма инжектиран в засегнатата област на тялото с ултразвукова машина. За да може такова инжектиране да има терапевтичен ефект, броят на тромбоцитите трябва да бъде най-малко 100 000 единици на ml.

Тази концентрация се получава чрез изкуствено обогатяване на собствената кръв. За това човек се взема от вената, преминава през специален сепараторен апарат, където се изолират тромбоцитите и плазмата, като се отстраняват останалите компоненти. След това полученото вещество се използва като инжекция.

Запълването на недостиг на тромбоцити е възможно да се постигне терапевтичен ефект при лечението на повече от 100 заболявания.

Индикация за

Най-често процедурата се използва в такива отрасли като:

  1. Спортна медицина - при рехабилитация на спортисти, които са претърпели наранявания и фрактури на костите. Инжекциите могат да стимулират производството на собствени тромбоцити, както и да нормализират процесите на хематопоезата.
  2. Стоматологията - инжекциите позволяват да се укрепи структурата на зъбите, да се предотврати преждевременното им пролапване и да се неутрализира възпалителния процес при наличие на кариозни зъби.
  3. Козметология - инжекции в кожата предпазват от стареене. Използва се и след козметична хирургия с малка загуба на кръв, както и ускоряване на регенерацията на постоперативни конци.
  4. Хирургичните инжекции позволяват нормализиране на нарушения кръвен поток и намаляване на възпалителния процес.

Тромбоцитите, обогатени с тромбоцити, помагат да се види ефективността след първата употреба при лечението на заболявания като:

  • обилна загуба на скалпа;
  • лечение на акнето на лицето и кожата на гърдите и гърба;
  • хронична себорея;
  • отстраняване на белези и стрии след операция или след разтягане на кожата.

Характеристики на процедурата

За инжекции не е донор, но собствена кръв. Вземете я от вената в количество от най-малко 200 ml. Поставете я в епруветка и след това я изпратете в центрофуга, където под въздействието на центробежна сила, кръвта се разпада на фракции. Първо, червените кръвни клетки се разделят, като най-тежките кръвни телца. След това тромбоцитите са изолирани. Понякога този процес става по-сложен, за да се ускори процесът, тромбинът и натриевият хлорид могат предварително да бъдат добавени към епруветката, под влияние на която тромбоцитите се отделят от общата маса по-бързо.

След като тромбоцитите се поставят в отделно отделение, останалата кръв се подлага на вторично центрофугиране, като от нея се извличат всички останали частици. В резултат на това остава плазма, в който постепенно се въвеждат тромбоцити. Полученото вещество е готова за приложение и може да се съхранява и в продължение на няколко дни.

Не се колебайте, задайте въпросите си на редовен хематолог директно на уебсайта в коментарите. Определено ще отговорим.Задайте въпрос >>

Това ви позволява да правите инжекции не само след вземане на кръвни проби, но и в рамките на 3-5 дни. В същото време богата на тромбоцити плазма се намира в специални контейнери, където се поддържат оптимални условия близо до тялото.

В резултат на това се получават около 3-5 ml от необходимото вещество, което може да се използва като инжекции. За да се получи по-голяма маса, оградата се произвежда многократно, но не по-често 2 пъти на ден.

За тези, които вярват, че инжекциите с обогатена плазма се произвеждат от донорска кръв и тромбоцити - не е нужно да се притеснявате. Те използват само собствената си кръв, която по време на целия процес е в стерилни условия и не влиза в контакт с околната среда.

Каква е значимостта и особеностите?

Лечебният ефект се задържа само от тази плазма, при която концентрацията на тромбоцитите не е по-ниска от 1 000 000 в 1 ml кръв. Ако дендрааризираните частици са по-малки, да чакаме терапевтичен ефект е безсмислено. В хода на емпиричните изследователски методи беше установено, че това е най-подходящият индикатор за организма и не предизвиква нежелани реакции.

Излишната доза, както и дефицитът, нямат ефект от инжекцията.

Фактори на растежа

Когато плазмата е обогатена с тромбоцити в тялото, oима активиране на четири фактора на растежа:

  1. Съдов ендотелен растеж, при които еластичността им се увеличава, което прави възможно да се избегнат разширени вени и други заболявания, свързани с неспособността на съдовите стени да се разтягат.
  2. Растеж на тромбоцитите - стимулирането на мегакариоцитите, които започват да произвеждат липсващия брой тромбоцити сами по себе си, се осигурява, като нивото им съвсем естествено се повишава.
  3. Растеж на епитела - поради ускоряването на регенерацията на епителните клетки, при което лечебният процес на раната се редуцира няколко пъти.
  4. Трансформиране на растежа - Тромбоцитите са способни да повишат активността на левкоцитите, което е важно в присъствието на възпалителния процес, а също така частично се трансформира и се адаптира към нуждите на тялото.

Текущите процеси се извършват непрекъснато и успоредно един с друг. Не надценявайте резултата от лечението. Въведената плазма не може да поправи костта или да запълни дефицита на клетките. Тя е способна само да ускорява растежа на клетъчните структури и също така да съкрати продължителността на регенерацията. Но за да постигнете максимален ефект, ще имате нужда от собствени резерви. Тромбоцитите не могат да се прикрепят към стените на кръвоносните съдове и напълно да изпълняват функциите си, ако тялото не синтезира колаген и анти-емболични рецептори. Адхезията без съпътстващи компоненти не е възможна.

В противен случай инжекцията ще бъде еквивалентна на въвеждането на нормален физиологичен разтвор.

Принцип на действие

Въведена е в определена част на тялото Тромбоцитите заедно с плазмата започват дейността си в няколко посоки наведнъж в същото време:

  • укрепват клетъчния метаболизъм и нормализират междуклетъчния метаболизъм;
  • укрепване на външните стени на съдовете, прикрепени плътно към тяхната повърхност;
  • стимулира клетъчната митоза, в резултат на което увредените тъкани бързо се регенерират;
  • провокира пролиферацията на съединителните клетки на съдовете, поради което се осигурява растеж на кръвоносните съдове в тялото.

Веднъж в кръвта, тромбоцитите продължават да функционират известно време, но след 5-7 дни те са напълно изхвърлени от далака и черния дроб, а след това отстранени от тялото. При наличие на допълнителни проблеми с адхезията, за максималната ефективност преди инжектирането на инжекцията се получава спомагателно стимулиране. Пациентът получава специален разтвор (често натриев хлорид), който подобрява адхезията, като ускорява процеса на коагулация на кръвта.

Процесът се показва във видеоклипа

Някои характеристики на обогатената плазма

Въпреки това, за да се ускори процеса на агрегация и изолиране в центрофуга на тромбоцитите клетки в кръвта се добавя към говежди тромбин, който е в състояние бързо да се търкаля необходимо за клетъчна инжекция. Естествено, с това въведение, цялата процедура не отнема повече от 10-15 минути, но реагентът може да предизвика странични реакции.

Тази съвкупност е добра, тъй като в много отношения тя е подобна на тази в кръвта на човек. Но в редки случаи тялото може да реагира неадекватно на говежди тромбин, като възприема чужди клетки като заплаха. Минималното време голям обем на белите кръвни клетки, получени, които са способни напълно неутрализиране на тромбин, в резултат на инжектиране ефективност може да бъде драстично намалена, и пациентът ще развият сериозни нежелани реакции (бързото образуване на тромб в съда).

Ето защо, преди да продължите с процедурата, е важно да предадете тестовата проба за съвместимост с агрегатора. Ако реакцията на тялото е незначителна, ефективността на инжекцията ще бъде висока.

Също така си струва да се обърне внимание на поносимостта на антикоагуланти, използвани в процеса на обогатяване на плазмата. Антикоагуланти предотврати преждевременното тромбоцитна адхезия плочи, но могат да се възприемат като заплаха от имунната система, след което те ще бъдат напълно отстранени от левкоцити.

Противопоказания за процедурата

При група от заболявания, при които не се правят плазмени обогатени инжекции, включват:

  • онкологични заболявания, особено тумори на вътрешните органи и мозъка;
  • психични разстройства, както и фенилкетонурия и епилепсия;
  • възпалителни процеси на хроничния план;
  • наличие на хронични заболявания: туберкулоза, чернодробна цироза, рак на белите дробове;
  • алергични реакции, включително лекарства;
  • проблеми с органите на хематопоезата и цялата сърдечно-съдова система.

Ефективност на употребата в стоматологията

Плазмата, обогатена с тромбоцити, ви позволява да се справите с различни заболявания на устата и също така предотвратява унищожаването на костната тъкан на зъбите. Може да са указания за употреба следните прояви:

  • хроничен гингивит;
  • периодонтално заболяване;
  • възпалителни и гнойни процеси в корена на зъба.

Използва се и при стоматологична хирургия, когато извличането на зъбите се извършва чрез ексцизия на дъвка, както и при монтажа на зъбен имплант.

Тромбоцитите ускоряват регенерацията на тъканите и възпрепятстват разширяването на възпалението.

Видеото показва използването в спортната медицина, нека поговорим по-долу

Спортна медицина

Инжектираната обогатена плазма позволява на спортистите да се възстановят от наранявания с минимални загуби на здравето. Подобна терапия се характеризира с висока ефективност, поради което спортната медицина и травматологията са незаменими.

Ускореното регенериране се дължи на активирането на естествените регенеративни процеси, което премахва необходимостта от лечение с наркотици.

Използвайте го в други случаи

Нестандартна употреба на инжекции ви позволява да се справите с такива патологии като:

  1. Алопеция (особено при мъжете) - микроинжектирането в скалпа събужда космените фоликули, стимулира ги за активен растеж.
  2. Рани и язви, които не се излекуват при прилагане върху различни мехлеми и кремове, са характерни за пациенти с диабет и псориазис. Инжекциите започват процесите на регенерация на клетъчно ниво, след което раната се стяга.
  3. Други заболявания - има случаи, при които тромбоцитите, богати на тромбоцити, стимулират лечението на следните заболявания:
  • уролитиаза и урологични патологии (включително периода на рехабилитация след хирургическа интервенция);
  • прекъсвания на съединителната тъкан на перинеума по време на раждането;
  • възстановяване на храненето на междупрешленните дискове, особено когато са нарушени;
  • в ортопедия, с отстраняване на дефекти в костната тъкан;
  • регенериране на хрущялната тъкан на ставите на коляното и лакътя.
По този начин, процедура със свои собствени характеристики показва добри резултати.

Предлагаме Ви да видите голяма презентация по тази тема

Не е нужно да търсите дарител, защото инжекциите използват собствена плазма, получена от венозна кръв. Безопасността и ефективността на процедурата директно зависят от готовността на пациента, здравния статус и от наличието на автоимунни заболявания.

Богата на тромбоцити плазма

Какво може да се нарече плазма, обогатена с тромбоцити, и какво не може да се нарече

Какво може да се нарече плазма, обогатена с тромбоцити?

Ако тълкуваме термина "дословно", плазмата, обогатена с тромбоцити, е плазма, чиято концентрация на тромбоцитите надвишава нормалната. Обикновено концентрацията на тромбоцитите в кръвта варира между 150 000 / μL и 350 000 / μL и средно е 200 000 / μL. моден стил Научно е доказано, че стимулиращият ефект на плазмено обогатената плазма се проявява, когато концентрацията на тромбоцитите в нея е 1.000.000 / μL. Поради това, понастоящем обогатена с тромбоцити, плазмата се нарича плазма, обогатена с тромбоцити, ако концентрацията на тромбоцитите в нея е равна на 1,000,000 / μl. При по-ниски концентрации на стимулиращ ефект не се появява в същото време все още не е доказано, че повишава концентрацията на тромбоцитите на повече от 1000000 / mm води до допълнително ускоряване на регенерирането (Фиг.1).

Тъй като плазмата, обогатена с тромбоцити, се различава от рекомбинантните растежни фактори

Тъй като богата на тромбоцити плазма се получава от собствена кръв на пациента, тя е напълно безопасно от гледна точка на предаване на инфекциозни заболявания, такива като HIV или хепатит. С увеличаване на концентрацията на тромбоцитите повишава концентрацията на растежни фактори. Изброените по-долу са седем основни растежни фактори, съдържащи се в богата на тромбоцити плазма, получен от тромбоцити растежен фактор (PDGF-AA, PDGF-BB, PDGF-AB), трансформиращ растежен фактор (TGF-β1, TGF-β2), съдов ендотелен растежен фактор (VEGF ) и растеж епителен фактор (EGF). Тези естествени растежни фактори са биологично определени съотношения. Всичко това отличава богата на тромбоцити плазма от рекомбинантни фактори на растежа. Рекомбинантните фактори на растежа са синтезирани от културата на овоцити от китайски хамстер, в която сърцевината чрез бактериален вектор въвежда човешки ген. Резултатът произведена от един вид на растежен фактор, който след това се използва без изкуствена или естествена среда. В естествения съсирек, съдържащ фибрин, фибронектин и витронектин, известен също като адхезионни молекули, които са от съществено значение за клетъчната миграция, osteoconduction, епителизация и остеоинтеграция. В PRP, тези вещества се съдържат в същата концентрация, както в нормалната съсирек (т.е. 2-4 г / л), поради което не е PRP фибриново лепило. В допълнение, PRP не остеоиндуктивен ефект, т.е. Такава плазма не може да инициира образуването на кост без присъствието на костни клетки. По този начин има само ефект костни морфогенни протеини (ILC), които са в състояние да индуцират образуване на кости де ново. Въпреки това, проучвания са показали, че при използване на рекомбинантен ILC образува незряла костна и за неговото формиране изисква повече време, отколкото е необходимо ин виво. Възможно е комбинация от PRP и Комисията може значително да се подобри дейността на последния. PRP стимулира ангиогенезата (т.е., съдов растеж) и митоза на клетките, участващи в процеса на регенерация. Поради това, PRP може да не се подобри значително състоянието на не-клетъчни костни материали. Въпреки това, тъй като скъсяването на костния растеж и зреене е демонстрирана при използване на газова кост и PRP, може да се приеме, че комбинацията от газова кост, костен noncellular материал PRP и също така води до увеличаване скоростта на образуване на кости.

За да се установи неточно PRP множество термини, използвани в литературата. Най-често срещаните сред тях е "тромбоцитна маса". Това не е съвсем вярно, тъй вярно тромбоцитите концентрат трябва да съдържа само тромбоцитите, но не съдържа плазмата, и следователно не може да се свие и образуване на съсирек. В клиничната практика, продукт, който е концентрат на тромбоцитите в малък обем на плазма, и поради това би било по-правилно да наричаме ", богата на тромбоцити плазма". На следващо място, терминът "тромбоцитната гел", също не е точна. PRP - е нищо друго освен кръвния съсирек, в която повишена концентрация на тромбоцитите. Това куп са адхезионни молекули (от които споменато по-горе), които повишават биологичната активност на куп, но те не гел. Някои автори са интерпретирани терминът PRP в "супер-богати плазмата тромбоцитната", "много богата на тромбоцити плазма" и дори "много, много богата на тромбоцити плазма", която по своята същност е пустословие, че е подходящо в кафенето, а не в клиничната литература.

Устройства за производство на BoTP

На пазара, както на компанията и отделни изследователи са насърчаване на значителен брой устройства, за да получат PRP. Практикуващият трябва да бъде наясно, че PRP концентрация на тромбоцитите трябва да бъде най-малко 1 Mill. / L, да бъде стерилна и свободна от пироген. И накрая, на тромбоцитите в PRP трябва да бъдат жизнеспособни. Трябва да се отбележи, че стерилността и апирогенен - ​​това не е едно и също нещо. Стерилитет - е липсата на микроорганизми. Неапирогенни - е липсата на всяко вещество, което може да предизвика треска. Така че само сертифицирани апирогенни материали трябва да се използват в устройства, за да се получи PRP. За да се изолира тромбоцитите от родния кръвта, центрофуга трябва да работи на два етапа. В първия етап на еритроцитите се отделят от плазмата с тромбоцитите и левкоцитите. По време на втория етап се подлага на окончателно разделяне на плазма, левкоцитите и тромбоцитите с незначително количество на еритроцитите към PRP и бедна на тромбоцити плазма (присъствието на малко количество червени кръвни клетки в PRP е неизбежна, тъй като малките и най-активните тромбоцитите се държат заедно с леката фракция на еритроцити. Последните и да PRP. себе си червено тромбоцитите имат сламеножълт цвят -. Забележка платно)... В един етап се формира отделянето на истинската кръв PRP. Вместо това, смес от богата и бедна на тромбоцити плазма с изключително ниска концентрация на тромбоцитите. Независимо на въртене на скоростта на центрофуга и време на центрофугиране разделяне на еритроцити и тромбоцити в един етап не е възможно. Тази забележка е за тези, които ще си купя лабораторна центрофуга или неговата модификация за PRP. Тези центрофуги са предназначени за диагностични цели, а не за PRP. Те не дават значително увеличение на концентрацията на тромбоцитите, а повреди на последния в разпределението, не са одобрени от FDA, Пирогенетичните материали, използвани в някои от тях. Така че не трябва да използвате такива центрофуги. одобрение от FDA и в действителност е необходимо. Пациентът е защитена от разпространението на инфекцията чрез PRP като автоложна този продукт, но на персонала - не. Устройства, в които кръвта може да изтече на съда или изтичане в резултат на неправилна инсталация на противотежест на опасни медицински аспект и законно. Практически лекари-добре да използват устройства, които са били одобрени от FDA като устройство за получаване на PRP. Най-доброто решение е да се използват устройства за PRP, която има одобрение от FDA за използване на PRP с материали за костите презасаждане. Нито на зъболекар не може да получи лиценз за вливане или кръв реинфузионен или неговите компоненти, но това не е необходимо, тъй като PRP се прилага локално. За PRP достатъчно вземат в пациент с използване венепункция 45-60 мл кръв. Тази лека загуба на кръв не се отразява на здравословното състояние не изисква никакви пречиствателни или промени начина на живот. Няма нужда от повторно вливане, още повече, че това не е безопасно.

BTP може да бъде смесен с костен материал, приложен върху приемния слой преди прилагането на костния материал, приложен върху костния материал или използван като биологична мембрана. Във всеки случай ПТП трябва да се коагулира ex tempore (т.е. непосредствено преди употреба). Коагулацията на кръвта се придружава от активиране на тромбоцитите, като по този начин се освобождават растежни фактори (Фигура 2).

През първите 10 минути. тромбоцитите секретират около 70% от факторите на растежа на тези, които са в тях. Пълното освобождаване на факторите на растежа става в рамките на един час. След това тромбоцитите продължават да синтезират допълнителен брой растежни фактори за около 8 дни, след което тромбоцитите умират (Фигура 3)

Следователно BTP трябва да бъде активиран непосредствено преди употреба и в никакъв случай предварително. Необходимо е да се вземе критично отношение към публикациите, които докладват за изследването на PTS, тъй като често става въпрос за фактори на растежа, получени от свеж букет или от течност, която е над съсирек. Bot след активирането - това е свеж съсирек и течността, която е над него.

Изложените по-горе факти са полезни за онези, които се опитват да разработят концепция за получаване на BTP от кръвосъсирване, както и за компании, които популяризират "серумните сепаратори" на пазара. Серумът не е плазма, в него практически няма тромбоцити. Вземете същото BTP от кръвосъсирването и това е невъзможно! Като естествена функция на тромбоцитите е да започне процеса на оздравяване и хемостаза, по време на образуването на кръвни съсиреци всички тромбоцити него ще останат и тромбоцити в серума не. По този начин е възможно да се получи BTP само от кръв, която все още не е била договорена, т.е. от кръвта, в която се добавя антикоагулант.

Кой антикоагулант трябва да използвам

Изборът на антикоагуланти е достатъчно голям. Въпреки това, само два от тях могат да подпомагат метаболизма на тромбоцитите и да осигурят екскрецията на последния, без да ги увреждат. Цитратният антикоагулант с декстроза (ACD-A) е най-предпочитан. Цитратът свързва калциевите йони, така че кръвта не коагулира, а декстрозата и буферите подпомагат метаболизма на тромбоцитите. Това антикоагулант се използва в кръвните банки за съхраняване на тромбоцитната маса за инфузии. Може също да се използва цитрат фосфат декстрозен антикоагулант (CPD), но трябва да се отбележи, че в сравнение с ACD-A, той е с 10% по-малко ефикасен при поддържане на метаболизма на тромбоцитите.

Фактори на растежа, PTS и тумори

Тъй като растежните фактори стимулират клетъчната пролиферация, се предполага, че рекомбинантен костен морфогенен протеин и ВТР могат да доведат до развитието на тумори. Всъщност, никакъв растежен фактор не може да причини рак, защото всички засягат клетъчната мембрана, а не клетъчното ядро. Вторичният медиатор на растежните фактори инициира нормалната експресия на гените, а не патологичния израз, който стои в основата на развитието на тумори. Факторите на растежа не са мутагени, за разлика от истинските канцерогени, като йонизиращо лъчение, тютюнев катран и др. Факторите на растежа са естествените протеини на човешкото тяло. BTP е естествен кръвен съсирек, но с високо съдържание на тромбоцити.

Приемане и използване на ТЕЦ

BTP се получава най-добре от автоложна кръв, която е направена малко преди началото на операцията или веднага в началото на операцията. Това трябва да се направи, тъй като тромбоцитите се концентрират в областта на операцията, инициират коагулация и лечение. В същото време концентрацията им в кръвта леко се понижава. Концентрацията на тромбоцитите намалява още повече, ако се случи хемодилуция по време на операцията поради интравенозни течности. След като се получи BTP, тя остава стерилна в течно състояние в продължение на 8 часа. Освен това, след 8 часа тя ще бъде толкова ефективна, колкото и веднага след получаването й, затова може да се използва за продължителни интервенции. Непосредствено след отделянето на плазмата, белите кръвни клетки и тромбоцитите в BOTP и плазмата бедна на тромбоцити, първата трябва да се отдели възможно най-бързо от втората. Ако това не стане, с течение на времето, тромбоцитите ще се разпръснат в плазмата с ниска тромбоцитна концентрация и концентрацията им в BTP ще намалее.

При зъбната имплантология най-очевидната област на приложение на БТП е операциите, включващи използването на голям обем от костни материали (повдигане на синусите, растеж на алвеоларния ръб) (Фигури 4 и 5).

Към днешна дата няма документирани клинични проучвания, които да потвърдят ефективността на смес от не-клетъчен материал за костно присаждане и BTP. В крайна сметка целта на BTP е стволовите клетки и прогениторните клетки, а в не-клетъчния материал няма нито тези, нито другите. Въпреки това може да се очаква, че използването на смес от BTP, автоложна кост и не-клетъчен костен материал или костен морфогенетичен протеин ще бъде клинично ефективно. Резултатите от проучванията, при които се използва BTP за лечението на леглото преди поставянето им, са обещаващи. Ускорява се ускорението на осеоинтеграцията. Използването на BTP е показано в областта на горната челюст, в присъствието на кост от лошо качество, остеопороза, интервенции, предназначени да запазят разкъсващите се импланти и т.н. Ефективността на BoTP за ускоряване на лечението на меките тъкани и епителизата е доказана. Предвид гореизложеното, използването на PRP е показано по време на трансплантация без манипулиране на съединителната тъкан на присадката с mucoperiosteal клапи и капацитет на меките тъкани в козметични интервенции в устната кухина. Факторите за растеж като цяло и БТП по-специално са част от нова биотехнология, чиято ефективност вече е доказана и чието оптимистично бъдеще е извън съмнение. Точното разбиране на тази технология и нейното правилно използване в полза на пациентите, които поверяват нашето здраве в нашите ръце, е задачата на практикуващия лекар. Надявам се, че тази статия служи на тази цел.

Методът за получаване на автоложна плазма, обогатена с тромбоцити, за стоматология

Изобретението се отнася до областта на медицината, а именно до стоматологията. Същността на изобретението се състои в това, че от ушналната вена на пациента се взема кръв с първата и втората спринцовка. Първата спринцовка се центрофугира при 250 g в продължение на 10 минути. Образуваната плазма и коагулираната кръв във втора спринцовка се центрофугират при 1000 g в продължение на 10 минути. Лошата тромбоцитна плазма се отделя от плазмата, обогатена с тромбоцити. От супернатанта се приготвя богат на тромбоцити плазмен активатор след центрофугиране на коагулираната кръв и лошата плазма на тромбоцитите в масово съотношение 1: 1 на части и 10% разтвор на калциев хлорид. Последният се въвежда на капки, при разбъркване, докато се получи необходимата консистенция на сместа. Тромбоцитите, обогатени с тромбоцити, се смесват с активатора в съотношение на масата съответно в части: 1: 3. Използването на метода позволява по-пълно извличане на тромбоцитите от избраната кръв, което повишава ефективността, физиологията и безопасността на получената плазма. 1 z.s. F-Ly.

Изобретението се отнася до областта на медицината, както и до препарати, използвани за медицински цели, съдържащи материали от бозайници, по-специално съдържащи компоненти на човешката кръв, и могат да се използват в стоматологията при хирургично лечение.

Метод за получаване на автоложни активиран богата на тромбоцити плазма за стоматология съгласно която кръв вземане на проби се извършва от кубитална вена в вакуум пластмасови тръби с 9 мл, в който вече съдържа коагулация активатор серум (плазма). На лабораторна центрофуга фирма «Heltich» етапа на събраната кръв се центрофугира в една и съща тръба в продължение на 12 минути при 2600 об / мин. Крайният продукт е пластинчата фибрин гел (M.Yu.Yurchenko, A.V.Shumsky "Преглед на оборудване и процедури за производството на автоложни богата на тромбоцити плазма в стоматологията" // списание "Нов в Стоматология", 2003 г., №7, стр. 47).

Недостатък на известния метод е, че активатори от животински произход или изкуствено синтезирани активатори се използват за активиране на тромбоцитите, което намалява физиологичното естество на метода. В допълнение, методът не позволява да се получи от избрания материал максималния брой тромбоцити, т.е. максималното използване на избрания материал, тъй като не само утайката на червените кръвни клетки, но и плазменото бягство на тромбоцитите в отпадъците. Освен това, този факт намалява екологосъобразността на известния метод.

Най-близък до изобретението е метод за получаване на автоложни активиран богата на тромбоцити плазма за стоматология съдържащ спринцовка кръвни проби от вената на кубитална 9-милилитрова епруветка, която съдържа antikaogulyant кръв - цитрат. Събраната кръв в същия епруветката се центрофугира в два етапа в лабораторна центрофуга «Heraeus Labofuge 300". В първия етап се центрофугира за 12 минути при 4000 об / мин. След това, получената плазма - супернатанта от първата спринцовка тръба изготвен в друга спринцовка флакон без цитрат и се обработва в центрофуга за 15 минути при 3600 об / мин. След отделяне на плазмата бедна на тромбоцити - супернатант до получаване на крайния продукт - в богата на тромбоцити плазма в количество от 0.3 мл. Активният богата на тромбоцити плазма лекарство «Cerasorb» - изкуствено синтезирани бета-трикалциев фосфат. За тази «Cerasorb» предварително смесени с кръв, взета от раната, и след това се добавя към смес, богата на тромбоцити плазма (M.Yu.Yurchenko, A.V.Shumsky "Преглед на оборудване и процедури за получаване на автоложна богата на тромбоцити плазма в стоматологията" // вестник "Ново в стоматологията", 2003, No. 7, p.46).

Недостатък на известния метод е, преди всичко, в малко количество на крайния продукт: от 9 мл кръв се получава 0,3 мл богата на тромбоцити плазма, въпреки двуетапна обработка кръв центрофугиране, което намалява ефективността на известния метод. Това се дължи на факта, че в известния метод, при всеки етап като се използват високо центробежна скорост на въртене: 4000 и 3600 об / мин, което предотвратява образуването на кръвни компоненти последователно разделена в съответствие с тяхното тегло и част отива неизползван тромбоцитите пелети. В допълнение плазмената плазма също оставя отпадъците. В резултат на това известният метод не осигурява максимално използване на материала, избран за производство на тромбоцити, което на свой ред не позволява максимално извличане на тромбоцитите от избраната кръв. Освен това, тъй като в известния метод отпадъците напускат както седимента на червените кръвни клетки, образувани след първото центрофугиране, така и плазмата, която е бедна на тромбоцити, това намалява екологичната съвместимост на известния метод.

Освен това, по време на приготвянето на активатора по известен метод се използва кръв от раната на пациента, което не е безопасно по отношение на възможността за инфекция, тъй като частици от мъртва тъкан, гной и други могат да влязат в активатора заедно с кръв. Това, както и използването на изкуствено синтезиран суроватъчен активатор, намалява физиологията на метода.

По този начин, разкрити от методите за патент търсене за получаване автоложна активиран богата на тромбоцити плазма за стоматологията, аналог и най-близо до претендираното изобретение, прилагането не осигурява постигането на технически резултат, състояща се във възможността за пълно извличане на тромбоцитите на събраната кръв, и следователно да се подобри ефективността метод за повишаване на физиологията, намаляване на безопасността, подобряване на екологичната съвместимост на метода чрез намаляване на количеството отпадъци след получаване на крайния продукт по метода.

Методът съгласно изобретението за получаване на автоложни активиран богата на тромбоцити плазма за стоматология решава проблема за създаване на съответния метод, който постига технически резултат, състояща се във възможността за пълно извличане на тромбоцитите на събраната кръв, а оттам и за подобряване на ефективността на процеса, за подобряване на физиологията, за намаляване на сигурността, при повишаване на екологичната съвместимост на процеса поради възможността за намаляване на количеството отпадъци след получаването на крайния продукт а на процеса.

Резюме на изобретението се състои в това, че в процеса за получаване на автоложни активиран богата на тромбоцити плазма за стоматологията, съдържащ кръвна проба от кубитална вена на спринцовка, епруветка, центрофугиране кръвта проби в една и съща тръба, плазма трансфер (супернатанта фракция, отделяне след tsetrifugirovaniya,) в празна тръба центрофугиране отново избран отстраняване продукт от тръбата, образувана от супернатантата (плазма бедна на тромбоцити) активиране на остатъка ин витро богата на тромбоцити плазма, нов е фактът, че допълнително включва втори спринцовка кръвни проби, епруветка в количество половината от обема на събраната кръв -probirkoy първата спринцовка, която се оставя в изправено положение за съсирване на кръвта, при което първият спринцовката с проби кръв тръба се поставя в центрофуга и се центрофугира при ускоряване на 250 грама за 10 минути, след което получената плазма се прехвърля в празна тръба и се центрофугират при 1000 грама за 10 минути, след това се отделят от тръбата за центрофуга, последвано от образование shuyusya след центрофугиране, плазма, бедна на тромбоцити отделя от богата на тромбоцити плазма и се прехвърля в празна тръба, и след това се приготвят активатор богата на тромбоцити плазма, която да гарантира, че кръвта съсирена във втора спринцовка тръба, при което тръбата с съсирена кръв се поставя в центрофуга и се центрофугира ускорение 1 000 грама за 10 минути, след което тръбата се отделя от центрофугата и се прехвърля получената сгъстяване на кръв след центрофугиране супернатанта към втори празна тръба на които след това се прибавя към плазма, бедна на тромбоцити, в тегловно съотношение в части: 1: 1 и се смесва добре, след това капе при разбъркване се прилага 10% разтвор на калциев хлорид, докато желаната последователност смес, всички се смесват, след което се активира богата на тромбоцити плазма, това се смесва с активатор в съотношение в тегловни части: 1: 3, съответно. Освен това, тръби с плазма и съсирена кръв се центрофугира в същото време, предварително се, че кръвта съсирена във втора спринцовка тръбата.

Техническият резултат се постига както следва. Характеристиките на претенциите: съдържащи кръвни проби от кубитална вена на спринцовка, епруветка, центрофугиране кръвта проби в една и съща тръба, плазма трансфер (супернатанта фракция, отделяне на първия tsetrifugirovaniya,) в празна тръба, центрофугиране отново избрани отстраняване продукт от тръба образува супернатанта, активирането останалите ин витро богата на тромбоцити плазма, са основни за получаване на богата на тромбоцити плазма метод две стъпки. Тези характеристики осигуряват изпълнението на изобретения процес и по този начин, осигуряват постигането на твърди технически резултат.

Известно е, че червените кръвни клетки са много по-тежки от тромбоцитите. Изобретателите са емпирично заключението, че за да се получи утайка, след центрофугиране на първия максимум броя на червените кръвни клетки от 250 грама достатъчно ускорение. Оптималното време центрофугиране при което се утаява максималния брой червени кръвни клетки, също емпирично получени от авторите на претендирания метод и е на 10 минути. Тъй като при метода съгласно изобретението, първата спринцовка с проби кръв тръба се поставя в центрофуга и се центрофугира при 250 г, след това се утаява червени кръвни клетки, както на тежките и леките тромбоцити остават в супернатанта слой - плазма. Избор на режим на центрофугиране за първия етап осигурява максимално отделяне на червените кръвни тромбоцити, което спомага за по-пълно възстановяване на тромбоцитите от събраната кръв и увеличава ефективността на претендирания метод.

Признаци на формула: "... след това получената плазма се прехвърля в празна тръба и се центрофугират...... формира след центрофугиране, плазма, бедна на тромбоцити отделя от богата на тромбоцити плазма..." предоставят възможност за извършване на втори краен етап за получаване на богата на тромбоцити плазма, и следователно предоставят възможност за извършване претендирания метод и постигането на претендирания технически резултат. Параметри центрофугиране във втория етап: ускорение 1000 г за 10 минути, получени от авторите на претендирания метод и са емпирично оптимизиран за максимално увеличаване на броя на тромбоцитите в богатата на тромбоцити плазма, което увеличава ефективността на претендирания метод.

Опитът показва, че се дължи на избор на оптимални условия на центрофугиране, използвани в претендирания метод, процедура от две стъпки центрофугиране осигурява по-пълно извличане на събраната кръв тромбоцитите в сравнение с предшестващото състояние на техниката, а именно: от 9 мл кръв, 1.5 мл богата на тромбоцити плазма, докато тъй като в прототип от същия обем от избрания материал се получават 0.3 ml богата на тромбоцити плазма. В резултат на това се дължи на оптимални режими избор центрофугиране осигурява по-пълно възстановяване на тромбоцитите от събраната кръв, което увеличава ефективността на претендирания метод.

В метода съгласно изобретението за активиране богата на тромбоцити плазма с помощта на активатор, който се получава от кръвта на същия пациент, а именно да се активира тромбоцитите в фибриноген обогатен плазмата се използва като съдържаща се в кръвта, взета от същия пациент. Това ни позволява да изоставим употребата за активиране на богатия на тромбоцити плазмен волски тромбин или изкуствено синтезираните активатори. Освен това за препарата се използват само продукти за центрофугиране, които се получават от стерилни тръби. В резултат на това в метода съгласно изобретението е предвидено и се увеличава в сравнение с прототипа, безопасността на процеса, и следователно се увеличава и физиологичен начин.

За производството на активатора допълнително съдържа втора спринцовка кръвни проби, епруветка в количество половината от обема на събраната кръв, първата тампона спринцовка. Количеството кръв, необходимо за получаване на достатъчно количество фибриноген, се определя експериментално от изобретателите и е оптимално. Това осигурява на обема на кръвта в по-нататъшното получаване на фибриноген в количество, достатъчно да позволи на общия обем на богата на тромбоцити плазма, получена от избрания материал - кръвта на пациента в съответствие с претендираното метода, което увеличава ефективността на претендирания метод. Тъй като тръбата на кръв за получаване на активатор оставя да се съсири кръвта и във вертикално положение, в резултат на съсирване в дъното на епруветката като еритроцитите се натрупват най-тежки. В този случай фибриногенът се концентрира в супернатанта по-лесно. За окончателното разделяне на фибриноген от еритроцити и други кръвни съставки тежки предварително се, че във втората спринцовка витро кръв сплъстена, при което тръбата с съсирена кръв се поставя в центрофуга и се центрофугира при 1000 грама за 10 минути. режим центрофугиране автори получени емпирично и е оптимална за екстракция от максимално количество кръв фибриноген на пациента, което увеличава ефективността на претендирания метод. След центрофугиране, втората тръба се отделя от центрофугата и се прехвърля супернатанта след центрофугиране на получената сгъстяване на кръв във втората тръба заготовката, като по този начин отделяне на утайката от получената супернатанта, съдържащ фибриноген. В този случай, поради предложен режим центрофугирането в супернатанта съдържа фибриноген в максимален размер.

За да се повиши ефективността на процеса, чрез намаляване на времето за получаване на активатор, епруветката с плазмата и съсирена кръв се центрофугира в същото време, предварително се, че кръвта съсирена във втора спринцовка тръбата.

Лошата плазмена плазма съдържа също фибриноген. Поради факта, че в процеса на изобретението се добавя бедна на тромбоцити плазма на супернатанта, получена след центрофугиране на съсирена кръв, общото количество на фибриноген се увеличава без увеличаване на общия обем на кръвта е изтеглено от пациента. В същото време увеличаването на количественото съдържание на фибриноген осигурява пълно и сигурно активиране на тромбоцитите в обогатената плазма. Това осигурява физиологичното естество на метода. Освен това, използването на бедна на тромбоцити плазма се намалява в метода съгласно изобретението, в сравнение с предшестващото състояние на техниката, общото количество на отпадъците след третирането кръв, което увеличава околната среда лекотата на претендирания метод.

Добавянето на бедна на тромбоцити плазма в супернатанта, получена след центрофугиране на съсирена кръв, в тегловно съотношение в части: 1: 1 е оптимално, получени от изобретателите емпирично и осигурява съдържание фибриноген в получената течна фракция в количество необходимо за активиране на цял екран богат тромбоцити от плазма, получени по метода, претендиран. В същото време, внимателното смесване на съставките осигурява равномерно разпределение на фибриногена в течната среда. В резултат на това е повишена ефективността на претендирания метод.

Въведение към получената смес на 10% разтвор на калциев хлорид предизвиква реакция на полимеризация на фибриноген, в резултат на фибриновия съсирек оформен. Капково на 10% разтвор на калциев хлорид с разбъркване, за да се получи смес на желаната консистенция позволява последователност регулиране активатор (плътност фибринов съсирек), което от своя страна позволява да се получи желаната плътност на активирания съсирек богата на тромбоцити плазма. В резултат на смесването на плазмата, обогатена с тромбоцити, с произтичащия активатор започва реакцията на дегранулиране на тромбоцитите, т.е. тяхното активиране. Смесване богата на тромбоцити плазма с активатор в съотношение 1: 3, съответно, при което се получава активиране на тромбоцити плазма, богата на цял екран, което увеличава ефективността на претендирания метод.

Освен това, по време на подготовката на тромбоцитите на активатор, съдържащи се в плазмата бедна на тромбоцити, активиран и след активиране на богата на тромбоцити плазма се допълват общия брой на активираните тромбоцити в крайния продукт. В резултат на метода на изобретението осигурява максимално възстановяване на тромбоцитите от кръв, извлечени от пациент, което увеличава ефективността на претендирания метод.

В резултат на претендирания метод, ние получаваме на изходния продукт за стоматологията: автоложна активиран богата на тромбоцити плазма съсирек под формата на активираните тромбоцити с по-високо съдържание на фибрин, изцяло получени от кръвта на пациента. Където активирани тромбоцити са растежни фактори, които са включени в регулирането на растежа и клетъчна функция в регенерацията на периодонтално тъкан и фибрин участва в процеса на osteoconduction. Освен това, тъй като в бедна на тромбоцити плазма и в супернатанта след центрофугиране на съсирена кръв левкоцити присъстват, те се съдържат в крайния продукт, като същевременно се осигури директен прилагането на локална антибактериално действие. В този случай, основното предимство на метода е, че активираният богата на тромбоцити плазма се подготвя напълно от кръвта на пациента, което елиминира риска от въвеждане в тялото на пациента, са несъвместими с кръвта на пациента биологични органи и намалява риска от инфекция. Всичко това повишава безопасността, физиологията и ефективността на заявения метод. По този начин използването на бедна на тромбоцити плазма за получаване на активатор намалява количеството на отпадъците по време на получаване на богата на тромбоцити плазма, която увеличава околната среда лекотата на претендирания метод.

По този начин, от гореизложеното следва, че съгласно метода за получаване на автоложни активиран богата на тромбоцити плазма за стоматология в изпълнението постига технически резултат, състояща се във възможността за по-добро възстановяване на тромбоцитите на събраната кръв, а оттам и за подобряване на ефективността на процеса, за подобряване на физиологията, за намаляване на сигурност, подобряване на екологичната метод се дължи на възможността за намаляване на количеството на отпадъците, след като крайният продукт на SPO OCU.

Заявеният метод за производство на автогенна активирана плазма, обогатена с тромбоцити за стоматологията, се извършва както следва. Извършвайте вземане на кръв от ушнарната вена на пациента с първата спринцовка. Освен това, съдържащ втора спринцовка кръвни проби, епруветка в количество половината от обема на събраната кръв, първата тампона спринцовка. Втората спринцовка е оставена във вертикално положение за коагулация на кръвта. Първият спринцовката с кръв тръба се поставя в центрофуга и се центрофугира при 250 гр продължение на 10 минути, след което получената плазма се прехвърля в празна тръба. Уверете се, че втората спринцовка витро кръв сплъстена, тръби, след това с плазмата и съсирена кръв се поставя в центрофуга и се центрофугира при 1 000 грама за 10 минути. След това епруветките бяха отстранени от центрофугата, след което плазмата след центрофугиране на бедна на тромбоцити плазма се отделя от богата на тромбоцити плазма и се прехвърля в празната тръба. След това се подготвят активатор богата на тромбоцити плазма, която се образува след центрофугиране супернатанта сгъстяване кръв се прехвърля във втората празния флакон, към който след това се прибавя към плазма, бедна на тромбоцити, в тегловно съотношение в части: 1: 1 и се смесва добре, след което капково когато разбъркване прилага 10% разтвор на калциев хлорид за да се получи смес на желаната консистенция, всичко се смесва старателно. След богата на тромбоцити плазма се активира за тази цел се смесва с активатор в съотношение в тегловни части: 1: 3, съответно.

При провеждането на метода се използва лабораторна центрофуга, която осигурява ускорение от поне 1000 g. Стандартна система с пеперуда се използва за извличане на кръв от унна вена на пациента. Всички тръби в използвания метод са стерилни. За основната кръвна проба се използва 9 ml спринцовка EDTA / K2-Gel; за допълнително вземане на кръв се използва тръба тип "Спринцовка" от типа S / 4.7 от серумния гел; епруветка три - тръба с размери и плътно затваряща запушалка; четвърта тръба с плътно затваряща се тапа тип Vacutainer, обем 7 ml; пета тръба с плътно затварящ се капак тип Vacutainer, обем 10 ml. Трансфузията на течности се извършва чрез стерилни Pasteur пипети.

Препоръчва се за оптимално използване на центрофугата за максимално намаляване на вибрациите, което е важно за пълна кръв утаяване на частиците, използвайте четен брой тръби, например, когато две кръв главно ограда - първите две тръби и с по-нататъшното - втората тръба.

След центрофугиране, плазмата от първите епруветки се прехвърля съответно в трети епруветки. Количеството на плазмата в епруветките се изравнява чрез трансфузия един в друг. От трета тръба след центрофугиране на бедна на тромбоцити плазма се отцежда в четвърта тръба и останалата богата на тромбоцити плазма в трети тръби изпитване са кондензирани с една трета тръба. След това се приготвя активатор на плазма, обогатена с тромбоцити. Супернатантът от вторите епруветки се отцежда в пета тръба. Съдържанието на петата епруветка се прибавя към бедна към тромбоцити плазма в масово съотношение 1: 1 на части и се смесва добре. След това се капва, при разбъркване, 10% разтвор на калциев хлорид, докато се получи необходимата консистенция на сместа, всички се размесват старателно. След това се активира плазмата, обогатена с тромбоцити, която се смесва съответно с активатора в съотношение 1: 3.

Използвайки метода съгласно изобретението, от 9 ml кръв, взета от пациента, се възстановяват 1.5 ml богата на тромбоцити плазма.

1. Метод за получаване на автоложни активиран богата на тромбоцити плазма за стоматологията, съдържащ кръвна проба от кубитална вена на спринцовка епруветка, центрофугиране кръвта проби в една и съща тръба, плазма трансфер (супернатанта фракция, след центрофугиране, отделена) към празна тръба, центрофугиране на продукта отново избран, изтриване тръба, образувана от супернатантата (плазма, бедна на тромбоцити), останалата активирането ин витро богата на тромбоцити плазма, характеризиращ се с това, че допълнително оса кръв вземане на проби fected втора спринцовка, епруветка в количество половината от обема на събраната кръв първата спринцовка, епруветката, което се оставя в изправено положение за съсирване на кръвта, при което първата тръба спринцовка с събраната кръв се поставя в центрофуга и се центрофугира при 250 гр за 10 мин, след което получената плазма се прехвърля в празна тръба и се центрофугира при хилядаграма продължение на 10 минути, след това се отстранява от центрофужната епруветка, след което получената плазма след центрофугиране, лошо тромбоцити се отделят от богата на тромбоцити плазма и се прехвърлят празна тръба, и след това приготвени активатор богата на тромбоцити плазма, която да гарантира, че кръвта съсирена във втора спринцовка тръба, при което тръбата с съсирена кръв се поставя в центрофуга и се центрофугира при 1 000 грама за 10 минути, след това се отстранява от центрофужната епруветка и се прехвърля в получената супернатанта след центрофугиране, празния флакон втората кръв сгъстяване, към който след това се прибавя към плазма, бедна на тромбоцити Tammy, в съотношение в тегловни части: 1: 1, и се смесват, след това се въвежда на капки при разбъркване с 10% разтвор на калциев хлорид до получаване на желаната консистенция на сместа, всички се смесват, след което богата на тромбоцити плазма се активира за тази цел се смесва с получени от активатора при съотношение на масата в части: 1: 3, съответно.

2. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че плазмените и кръвосъсирваните епруветки се центрофугират едновременно и първо се установява, че кръвта се навива във втората спринцовка.

Богата на тромбоцити плазма при решаване на проблеми със зъбите

Използването на тромбоцитна обогатена плазма в стоматологията става все по-често срещана техника. Значително подобрява ефикасността на имплантирането или отстраняването на зъбите, решаването на проблемите с пародонталното възпаление. Техниката на използване на PRF-съсиреци позволява значително да се ускори лечението на тъканите, да се намалят рисковете от развитие на инфекциозни усложнения, да се намали болката. По отношение на характеристиките на подготовката на тромбоцитна обогатена плазма и нейното използване при лечение на зъби прочетете на estet-portal.com.

Защо плазмата е обогатена с тромбоцити в стоматологията?

Богата на тромбоцити фибрин (PRF), която се използва в стоматологията, е по същество кондензирана част от плазмата, която се получава от кръвта на пациента чрез центрофугиране. PRF - фибриновите съсиреци се използват съгласно следните указания:

  • натрупване на меки и костни тъкани,
  • пародонтална терапия,
  • имплантиране на зъби,
  • регенерация на смолата след извличане на зъба.

В рамките на около една седмица след приложението PRF пациент - съсирек нея бавно освобождаване на левкоцити, които стимулират остеогенезата, протеини, ускоряване на растежа на нова тъкан, както и различни растежни фактори, чиято задача е да се подобри растежа на нови кръвоносни съдове, меки и костни тъкани, контролна клетка пролиферацията и клетъчното изпълнение на техните функции.

Това, което зъболекарят трябва да работи с плазма, обогатена с тромбоцити

За да работите с плазма, обогатена с плазма, зъболекарят трябва да има следното оборудване:

  • центрофуга за PRF с 40-градусов ъгъл на наклоняване на тръбите,
  • PRF-кутия - табла за приготвяне на фибринови мембрани (за затваряне на костни дефекти) и фибринови тапи (отвори за пълнене след изваждане на зъбите);
  • купа и купа за PRF - специални устройства за изработване на готови фибринови мембрани, обработващи присадки с инжектиран PRF.

Що се отнася до режима на центрофугиране, основният фактор, влияещ върху времето за приготвяне на PRF-съсирека, е центробежното ускорение, което зависи от скоростта на ротора и от разстоянието от тръбата до централната ос на апарата. Тъй като радиусът на ротора в различните центрофуги е различен, скоростта на центрофугиране също ще бъде различна.

Резултатът от центрофугирането е PRF-fibrin clot - автогенна плазма, обогатена с тромбоцити, където се концентрират активирани тромбоцити с повишено съдържание на фибрин. Тези тромбоцити регулират растежа и функционирането на клетките на костите и пародонталните тъкани.

Много е важно плазмата, обогатена с тромбоцити, да се приготвя от кръвта на пациента, което означава, че рискът от въвеждане на несъвместими биологични тела в тялото на пациента е елиминиран и рискът от инфекция е сведен до минимум.

Този фактор повишава ефективността и безопасността на метода, както и привлекателността му в очите на пациентите.

Как правилно да се подготви богата на тромбоцити плазма

За успешна работа с плазма, обогатена с тромбоцити, зъболекарят трябва да спазва някои прости правила:

центрофугирайте кръвта не по-късно от 1 минута след оградата - това ще позволи достатъчно голям размер на съсирек;

преди началото на центрофугирането, да се събере в епруветката събраната кръв - това ще ускори образуването на тромбин и ще увеличи съсирека;

след центрофугиране пауза - съсирване процес преминава през образуване на тромбопластин преход протромбина в тромбин и фибрин впоследствие формация от него, и по този начин се нуждаят от време, за да се получи желаният съсирек.

Използването на богата на тромбоцити плазма ще позволи на зъболекаря значително да подобри лечебната ефективност на тъканите при пациенти след екстракция или имплантиране на зъби.

Освен това, техниката позволява да се привлекат нови пациенти, тъй като техниката предполага използването на собствена автентична кръв, вместо чужди материали, намалява болката след екстракция на зъбите и значително ускорява лечението на ямките без усложнения.

Преаналитичен етап в изследването на хемостазата

За проучване на хемостазната система проектирана и poluschili разпространено висока точност оборудване и надеждни лабораторни методи, които ви позволяват бързо и ефективно да идентифицират нарушения, водещи до кървене или тромбоза, но тяхната възпроизводимост и точност значително намален неспазване на сроковете и условията на предварително аналитична фаза. Вземане на кръвна проба, транспорт и обучение за разследване на хемостазната система трябва да се разглежда като важен етап poluscheniya правилни резултати,

на които трябва да се обърне голямо внимание във всяка лаборатория, която извършва изследвания на хемостазата.

Кръвта за изследване на хемостазата се отнема сутрин на празен стомах след поне още един път. 8 часа след последното хранене. Важно е събирането на венозна кръв да се извършва в спокойно състояние, така че преди поставяне на вената, пациентът се препоръчва да седне за 20-30 минути. За да се получат надеждни резултати при изследването на хемостазата на тромбоцитите в деня преди анализа, пациентът трябва да избягва стрес, упражнения, промяна на дневния режим и промени в хранителния режим, прием на алкохол. Специално е необходимо да се спазват тези условия в изследването на маркерите за активиране на тромбоцитите (β-тромбоглобулин, тромбоцитен фактор-4).

Лекарят трябва да съзнава медикаментите, предписани и прилагани от пациента>, тъй като редица лекарства могат да нарушат агрегирането на тромбоцитите или да причинят промяна в коагулационните параметри. В такива ситуации, често трябва да се вземат под внимание само на антикоагуланти или антитромбоцитна р Ню Йорк ефекта на лекарства, използвани като идентифицира много нарушения на хемостаза по време на лечение с антикоагуланти или антиагреганти не е възможно.

Пациентите в интензивното отделение не трябва да приемат кръв от подклавичния катетър, тъй като това е най-честата причина за навлизането на хепарин в кръвна проба. Пациентите в отдела по хемодиализа не могат да вземат кръв от артериовенозна фистула. Въпреки това, при някои критични условия, вземането на кръв в епруветка или вакуум от кубитална вена не е възможно поради намаляване на налягането. В такива ситуации е приемливо да се вземе кръв от подклавичния катетър за изследване, но трябва да се отбележи, че списъкът на извършените процедури ще бъде силно ограничен поради възможното наличие на хепарин в пробата.

Натриевият цитрат свързва калциевите йони и спира реакциите на съсирване. Тъй като антикоагулант за да се определи най-показателите на коагулацията и тромбоцитите хемостаза използване 0,105-0,109 М разтвор на натриев цитрат, който се получава чрез разтваряне Na3C6H507h2h3O 3.1-3,2 г в 100 мл вода. Този разтвор трябва да се съхранява при температура от 2-8 0 ° С не повече от 48 часа. При неспазване на температура по такъв разтвор е разработен микрофлора, при което концентрацията на цитрат намалява натриеви и изглежда примеси, имат потенциала да стимулира тромбоцити и активира реакцията на коагулация. В присъствието на препоръките на производителите на реагенти позволи използването на 0129 М (3,8%), натриев цитрат, но трябва да се има предвид, че различни концентрации на стабилизатора имат различни ефекти върху редица показатели на коагулация, включително на INR. Този ефект е особено забележим, когато се сравняват реагенти от различни производители.

EDTA също свързва калций, спирайки съсирването. Етилендиаминтетраацетатните соли се използват за стабилизиране на проби, предназначени да определят клетъчния състав на периферната кръв върху хематологични анализатори. К2-, КЗ- и Na2-соли на EDTA при концентрация от 1.2-2.0 mg / ml също се използват в допълнителни изследвания чрез ELISA и PCR. Недопустимо е да се използва EDTA за изследване на коагулацията и функционалния капацитет на тромбоцитите.

Хепаринът активира плазмения антитромбин, който необратимо се свързва с ензимните фактори на кръвосъсирването. Този антикоагулант се използва традиционно в ELISA; като правило, 12 до 30 U / ml натриева, калиева или литиева сол на нефракциониран хепарин е необходима за стабилизиране на кръвта. При получаване на плазма за изследване на коагулационните му свойства и функционалния капацитет на тромбоцитите, този антикоагулант не може да се използва.

При вземането и подготовката на кръвни проби за изследване на хемостазата трябва да се вземат мерки за предотвратяване на активирането на тромбоцитите и реакциите на коагулация. За кръвни проби не можете да използвате обикновени стъклени флакони. Тъй като стъклото активира коагулацията и сорбите коагулационни фактори. В продължение на много години се използват силиконови тръби за предотвратяване на тези ефекти, но имаше информация за недостатъчната способност на някои силикони да предотвратят активирането на тромбоцитите. В допълнение, тази процедура е трудна за стандартизиране и отнема допълнително време. Като алтернатива на силикона трябва да се използват пластмасови тръби, но различни видове пластмаси също варират в способността им да активират реакции на коагулация.

Добри резултати са получени чрез използване на вакуумни системи за кръв, съдържаща 3.2% буфериран разтвор на натриев цитрат (буфериране добавка често се постига чрез лимонена киселина). Цветното кодиране съгласно ISO / DIS 6710 за вакуумни системи, съдържащи натриев цитрат, осигурява светлосин или зелен цвят на капачките; за епруветки с EDTA - люляк или червено; за епруветки с хепарин - зелено или оранжево. Има доказателства за добри резултати при използване на специални CTAD системи (с стабилизатор, съдържащ натриев цитрат, trifosadenin, теофилин и дипиридамол) за определяне β-thromboglobulin, тромбоцитен фактор 4, PAI-1, мониторинг хепарин на аРТТ или анти-Ха определяне INR, Този стабилизатор обаче не е подходящ за изследване на функционалния капацитет на тромбоцитите.

ОПТИМЕН ЦИТРАТ / ВРЪЗКА С КРЪВТА

Тъй като повечето от факторите на коагулационната система се съдържат в плазмата, но не и в червените кръвни клетки, необходимото количество антикоагулант зависи от хематокрита при пациента. За да се стабилизират кръвните проби с хематокрит в нормалния диапазон (от 35 до 50%), обичайно се смесват един обем от 3.2% разтвор на натриев цитрат с девет кръвни обеми. Ако хематокритът се отклонява от посочените стойности, това съотношение трябва да се промени в съответствие с формулата Ingram:

X = Vx (100 - HST) / (595 - HST),

където X е добавеният обем от 3.2% цитрат, ml; V - окончателният обем на епруветката за кръв, ml; HCT е хематокритът при пациент,%.

ИДЕАЛ И РАЗПРОСТРАНЕНИЕ

За да се получат проби от венозна кръв, е необходимо да се включат най-опитни и квалифицирани процедурни медицински сестри, способни да пробият вената за няколко секунди с най-малко травматизъм и болка за пациента. Сестрата трябва внимателно да прочете посоката на изследването, да избере епруветките, да определи правилната последователност на пълненето им, да ги маркира и да посочи времето, необходимо за вземане на кръвта. В някои специализирани лаборатории по време на събиране на кръвта за да се подпомогне процедурно медицинска сестра насочено лабораторна техника, която може значително да увеличи капацитета на стаята за лечение, за да се намали вероятността от грешки при измерване проби етикетиране цитрат смени хематокрит и неточности.

Кръвна проба е за предпочитане да се вземе от кубитална вена; Мястото на пункцията се третира със 70% алкохол и се оставя да изсъхне. Валиден само за кратко (по-малко от 60) налагане на сноп рамо, като венозна стаза е активиране на фибринолизата; След като поставите иглата във вената, турникетът веднага се отпусна или отстрани. Най-добри резултати (дадена травма, болка, многофункционалност, скоростта на пълнене тръби) осигурява използването на игла с калибър 21G. Желателно е да не се вземат проучване хемостаза първата 2-3 мл кръв, така че те са съставени в тръбата и се използва без антикоагулант, например, за да се получи серум (биохимични, имунологични тестове, и т.н.). Освен това, пластмаса или силиконизирани тръби, напълнени с предварително добавя цитрат кръв от иглата от гравитацията, веднага затваря и се смесват чрез обръщане 4-6 пъти или въртене (без разклащане). Във връзка с използването на иглата разширения диаметър след венепункция в повечето случаи пациентът трябва да активира превръзка 2- 4 навивки на превръзката, поставяне на мястото на отвора с марля тампон с 70% алкохол.

Напълнете епруветки с цитрат чрез спринцовка за инжектиране е невъзможно, тъй като, когато nasasyvanii кръв и последващо прехвърляне на тръбата настъпва активиране на тромбоцитите и коагулационни фактори, дължащи се на контакт на кръвта с пластмасова спринцовка и допълнително разпенване, причинени от турбулентен движение на кръв в спринцовката.

СПЕЦИАЛИЗИРАНИ ВАКУУМНИ СИСТЕМИ

Стандартни клинични лаборатории проучване хемостаза, е да се използва за еднократна вакуумни системи (епруветка, и др.), Съдържащи 3,2% разтвор на натриев цитрат. Тяхната употреба значително ускорява, стандартизира процедурата за вземане на кръв и позволява значително намаляване на разпространението на резултатите. Ако кръвта за изследване на хемостаза вземат чрез катетър или система с игла пеперуда, трябва да се осигури цялостна система за запечатване и предварително пълнене с кръв "мъртви" обеми - лумена на катетър и игла адаптер, в противен случай може да има частична загуба на вакуум и непълна пълнене на тръби. За да се предотврати това, както и контактните части увредена тъкан кръв за анализ хемостаза не се препоръчва да се вземе първата вакуумна тръба.

Условията, изразени от кръвни съсиреци (полицитемия, дехидратация и т.н.), стандартно количество цитрат във вакуумни системи е прекомерно за намален обем плазма. При използване на вакуумни тръби и нивото на хематокрита в субект над 50% от разтвора на цитрат трябва да бъде предварително смучат тръби (например, чрез инсулинова спринцовка). Количеството цитрат, което трябва да бъде отстранено от стандартната вакуумна тръба, може да се определи по формулата:

Y = (V / 10) х (9 х HCT-405) / (595-НТТ),

където Y е обемът на цитрата, който трябва да бъде отстранен, ml; V - окончателният обем на епруветката за кръв, ml; HCT е хематокритът при пациент,%.